第六章化学毒物的一般毒性作用

第6章一般毒性作用及评价11一般毒性：基础毒性，实验动物单次、多次或长期染毒所产生的总体毒性综合效应；特殊毒性：三致作用和生殖毒性。2化学毒物的一般毒性作用研究是毒理学工作中非常重要的内容。毒物的一般毒性作用观察是毒理学的经常性工作，对防治外源化学物所致急慢性中毒，对毒理学安全性评价和危险度评定，制订卫生标准以及管理毒理学的决策方面均具有十分重要的意义。3根据接触毒物的时间长短，一般毒性的实验方法分为：❖急性毒性

❖短期重复剂量❖亚慢性毒性❖慢性毒性4第一节急性毒性试验5In1984,5,000peoplediedand30,000werepermanentlydisabledduetoexposuretomethylisocyanate（异氰酸甲酯，MIC）fromanindustrialaccidentinIndiaManypeopledieeachyearfrominhalingcarbonmonoxide（CO）fromfaultyheaters6机体（实验动物或人）一次或24h内多次接触外源化学物后在短期内所产生的毒性效应，包括一般行为和外观改变、大体形态变化以及死亡效应。一、急性毒性的概念急性毒性（acutetoxicity）7实验动物接触化学物的方式或途径不同，“一次”的含义也有所不同

经口和注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化学物输入实验动物体内经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化学物的过程所以“一次”含有时间因素8❖化学物使实验动物发生中毒效应的快慢和剧烈的程度，可因所接触的化学物的质与量不同而异➢有的化学物在实验动物接触致死剂量的几分钟之内，就可发生中毒症状，甚至死亡➢而有的化学物则在几天后才显现中毒症状和死亡，即迟发死亡9急性毒性的概念需要注意急性接触的次数：一次，24h多次中毒效应出现的时间

不仅以接触毒物后毒性症状出现的时间，主要以接触毒物的时间，观察时间：7~14天强度：一次性大剂量，中毒症状明显，常发生死亡10二、急性毒性试验的目的求出致死剂量及其他急性毒性参数观察中毒表现、毒作用强度和死亡情况，初步评价毒物的毒效应特征、靶器官、剂量－反应（效应）关系和对人体产生损害的危险性为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察指标的依据为毒理学机制研究提供线索11总体原则三、急性毒性试验方法的要点实验动物染毒途径染毒剂量观察周期观察指标的选择、计算方法和评价12急性毒性反应与人近似易于饲养、操作方便繁殖力较强，数量较大价格较低，易于获得（一）实验动物的选择和要求主要原则13实验动物的物种和品系

啮齿类（rodentspecies）非啮齿类（nonrodentspecies）小鼠：昆明种、NIH、ICR大鼠：Sprague-Dawley(SD)、Wistar犬或猴14实验动物的物种和品系首先选择哺乳动物，其中以大小鼠为最常用。急性皮肤毒性实验：成年大鼠、豚鼠或家兔，优先考虑白色家兔。急性吸入毒性实验和经口毒性实验：优先考虑大鼠。根据接触途径选择实验动物15大鼠副：18恳0-佳24狼0g小鼠理：18脖-2肤5g家兔枣：2-阶2.赛5k练g实验吵动物典的年结龄和凑体重刚成打年、骄健康艘、未棚曾交瞒配和架受孕腥的动雄物小动盟物根澡据体茂重同一课次试寨验同档一批白实验难动物翅体重妥变异弓范围霸不应凳超过闪平均彩体重掏的20窜%16实验督动物蛙的性扯别雌雄全各半如雌拒、雄病动物头毒效激应有著明显纤差异估，应毙分别赞并求化出雌斩性和疗雄性不动物毕的LD50值特殊胡的试落验研敏究可选仅作呈单一挤性别错的急它性毒锄性试瞎验17实验泡动物秘分组费与数旅量根据傍组数游和每限组数遥量来书决定钱数量LD50，一退般为4-顷6组大、槽小鼠绳每组10只，塌犬类6只严格晨遵循关随机鉴化的可原则18实验旱动物许的预乞检给药饥前检小疫观牢察大、脑小鼠缠、兔野、豚耀鼠1周，纲犬猴2~浓3周适应滔新环拉境，妥减少柜环境先和生牌理条撒件变焰化可棍能对告试验旋结果忙的影脚响筛检旗健康黎状况热不符坝合试偿验要顶求的完动物19实验只动物腊的给绍药前偶禁食抛处理经口目途径复染毒床，实牌验动央物胃理肠道突内食睬物存波留量虎对化尤学毒更物的兵毒性伟可产鬼生较佛明显常的干阶扰大、游小鼠薄隔夜仙禁食爷，染妈毒2h后提恢供饲溜料经口岭多次灵染毒酒可不趟禁食20（二断）受获试物张及处烛理受试脉物的引接受球、分剃样、号保管版、称影量、旅配制骡以及幕在此欣过程韵中的怪严格败的质摊量保剑证是腾急性腐毒性竖试验负成功岂与否煎的重栽要环屡节。21（二禁）受级试物熄及处托理常用独剂型隶：水割溶液挑、混橡悬液健、油筑溶液所用出的溶张剂和针助溶挑剂应返该是秤基本猫无毒阿的，写与受贸试物率不起驼反应水溶带性受猜试物劣，蒸聋馏水齐、去退离子席水、防生理华盐水棉，保近持与凑体内胸渗透讯压一身致水不逝溶性辰受试笑物，复溶于虑或悬抖浮于躬适当荡的有寺机溶盈剂中受试说物一奸般应宾临用医前新歪配22（二详）受繁试物辆及处狸理急性炼毒性障试验套受试钳物给畏予动火物染易毒的辉量有找规定抵。常巩用实列验动纤物和就染毒鄙途径拖的适宜棚容积凳（最辣大容态积）分别陆为：傲大鼠哈灌胃1.蛇0（3.数0）ml晚/1脆00梁g体重妻（BW）；小鼠左灌胃0.采1（0.握4）ml娇/1曲0g（BW）。23适宜顺容积羽染毒毒性加较大树的受藏试物骂给药荣量较沉小毒性葵较低错的受推试物刃常需巧较大袄量的斯染毒给药言容积唤根据肿染毒争途径呼和实接验动历物经口演：20捏ml扶/k荷g(空腹剃动物)经皮挤：2m艳l/颗kg静脉邻：1m逝l/服kg箱(5汪mi浮n以上)受试仇物及产处理24(三)染毒判方法应考傲虑人附在生贴产和责生活盾环境更中接读触该侨化学腾毒物搞的情脱况，中通常申根据速实验浑目的膊、化温学毒俩物的胶性质禾和用扩途、婶人类喜实际糕接触栋途径撒和方勒式来衔选择矛染毒欠途径白。25(三)染毒葱方法模拟会实际职接触衔的途趣径和拿方式有利枪于不侧同化蓄学物编之间格结果颗的比谱较受试伯物的刚性质疼和用戒途受试堆物毒反性评树价程茎序的急要求26工业旺毒物绞：经勾呼吸暑道、雨皮肤农用产化学双物：浊经口很、皮晨肤、邪呼吸讽道药品榆：经家口、塌注射励、皮朱肤食品凭：经摊口环境载污染臭物：课经口裕、呼缎吸道滔、皮什肤染毒且途径消化松道、熔呼吸丢道、贡皮肤修、注祸射27染毒自途径狮影响宵受试回物急鸣性毒鸽性不同膏途径苏的吸涉收量羊和吸鞋收速京率吸收独速率抹：静植脉注栽射>呼吸胶道>腹腔酷注射>肌内适注射>皮下砍注射>消化冷道>皮内轨注射>经皮同一泡受试脊物不沃同染甜毒途碗径LD50的大挠小通固常符瞎合上溉述规谋律28经口浅（胃略肠道踪蝶）染徒毒LD50值来府比较馒不同斜化学谣物急豪性毒慰性大波小灌胃楚：溶液岛或混查悬液居，以水注射瓦器经告导管蒜注入驶胃内币，等渗容量个灌胃折法吞咽锁胶囊保：将受情试物径装入养胶囊众中，我放至肾舌后宣部，挡迫使祝动物绪咽下普。犬跨、猴喂饲志：将受者试物真掺入罗动物杏饲料保或饮章水中慕供实幼验动朵物自输行摄裂入29灌胃订法急性怒实验短多采猴用灌征胃法饺。小岁鼠的广灌胃决针长宝约4～5c得m，直隆径为1m刮m，大遮鼠的痰灌胃司针长虑约6～8c贡m，直侄径约1.夸2m乒m。灌懒胃针咸的尖吐端焊购有一父小圆史金属盲球，童金属监球为冲中空工的。痰焊金庆属球远的目齐的是鼻防止摇针头泼刺入炸气管认或损搜伤消因化道溪。针捐头金伞属球怕端弯溪曲成20脑°左右道的角陵度，关以适神应口吃腔、个食道碑的生来理弯齐曲度哗走向偿。30用左巧手固鸟定鼠歌，右请手持纠灌胃肝器，粉将灌取胃针壮从鼠苍的口同腔插架入，唐压迫床鼠的汽头部感，使青口腔颤与食眨道成竭一直昂线,将灌梦胃针毯沿咽皆后壁出慢慢潮插入堂食道严，可臭感到道轻微府的阻豪力,此时欢可略询改变嫌一下匠灌胃龟针方鸡向，倦以刺奋激引皆起吞带咽动颠作，伞顺势兔将药痕液注裤入。岛一般遣灌胃描针插银入小萄鼠深棚度为3～4c罩m，大商鼠或大豚鼠准为4～6c炭m。常森用灌量胃量此小鼠争为0.袖2～1m幕l，大庆鼠1～4m痛l，豚婆鼠1～5m视l鼠类砖的灌袍胃法31经呼翁吸道嗓染毒经呼倘吸道跳染毒能（in搁ha府la诱ti慨on）：研究创生产盖条件撞下以搜气体挖、蒸台气、袭粉尘煌、烟阁、雾丢等形神式存延在的魂化学茅毒物烧和评飘价环涝境空丙气污获染物术。32静式匪吸入矮染毒动式锻吸入隆染毒经呼故吸道易染毒气管扬内注迎入吸入横染毒33静式哀吸入娇染毒将一衔定量势的易冲挥发撇的静左态化你学毒辨物或劳一定踪蝶体积窝的气抽态化气学毒驱物加窜入到辨具有垦一定得体积离的密变闭容子器内欧，使椒实验底动物权吸入勺染毒配。34静式售吸入与染毒方法叔：一沃定体道积的兄密闭贺容器袖，加抬入易慎挥发敬的液答态或贡气态失受试景物染毒季柜体裁积、嘉动物斤数、部时间吵，依旷据实寨验动宅物最脱低需丽气量篇计算优点好：简测单、杯方便裹、受丛试物还消耗志少，诵适合痒于小舒鼠缺点磁：氧亏气减桌少，塑浓度气不稳籍定，雄经皮时吸收狱，不反适合序稍大宫动物助，挥演发性35动式富吸入庭染毒将实收验动兵物处旺于有纵空气拘流动绒的染惩毒柜槽中，床新鲜芝空气脏不断信流入眯，污乒染空润气不胳断流素出。滤温度吧、湿冶度、嫁氧及露二氧块化碳掌分压后相对裹恒定朱，并赛有随汗时补侦充受监试物度，维让持浓否度稳嗽定。到可采旷样监纠测受咱试物舅浓度面，可香持续耗接触狗受试亡物，希无时眉间限冰制。36动式个吸入组染毒践装置昌的组盈成染毒错柜机械僻通风召系统配气帮系统37动式钥吸入窃染毒蛾设备38动式义吸入须染毒侍方式海分类动式钉吸入拒接触纷（动跟式染彻毒）面罩歇接触刘（面腐罩吸间入染昌毒）39动式松吸入代染毒取优缺掠点优点统：受试颤物浓友度和援氧分而压较势稳定缺点跃：设备兆要求映高，孤消耗交受试恒物量需很大失，操奏作比萌较复仪杂，拦费时玩费工40气管溜注入芳法经喉脱插入克法、睡气管菌穿刺蛙法、宽暴露辉气管秃穿刺话法优点的：染毒枯剂量丹较准肤确，控用毒峡物量降少；寨形成令中毒量模型眉速度发快。缺点刮：操作火易造原成损匙伤，浩引起苏动物贞死亡迁；不挑能发画挥上防呼吸皮道的档防卫县作用益，与英自然躬吸入示有差捧异。41经皮贫肤染止毒液态揪、气夸态甚钉至粉矩尘状份态的意化学祖毒物多选队择家兔立和豚元鼠，采成用动宽物脊畏柱两阴侧皮较肤脱膊毛（聋剪毛蒙法、而剃毛滔法、亮拔毛稀法、利化学泄脱毛灵法）箩，虾局部刷涂敷尽受试炸化学战毒物农并以窝玻璃愿钟罩叔、油轨纸或答塑料念薄膜蚁覆盖降固定祝一定课的时竿间。42经皮仍肤染应毒农药楚、化按妆品翅、工拍业毒伞物、衣环境咬污染肯物、士外用稼药物常用匠大鼠染毒愚方式诱：脱毛螺：化稼学或收机械侍法脱妥毛（鼻体表规面积绸的10叼%）染毒扭：局般部涂砖敷或链大鼠秃、小露鼠浸沙尾法43经注堂射途山径染稿毒（in指ge巩st佩io配n）进行耀化学厉毒物巩的毒亡作用卧机制申研究批、比绑较毒集性研和究、吉了解搏化学樱毒物片代谢雅与毒柄物动增力学动参数州或对砍急救拔药物抢进行俭筛选刃研究虎。腹腔子注射句、静透脉注亚射（纲大、屠小鼠籍尾静疑脉、楼兔耳聚静脉钩）、赢肌内钟注射茅、皮贿下注蹄射等巩。44经注叠射途暴径染去毒45（四恋）命剂量周选择参考亿新化倡学物照的理个化性嫂质参考析相关赢资料先用绿少量夕动物斥，以经较大姓的剂热量间参隔染拨毒，仁找出10浊%-叫90设%（或0%淘-1听00慰%）的屈致死丛剂量珍范围牲，然迹后设尾计正鼠式实绕验的非剂量豆和分恢组根据此试验睁所选愉的LD50计算仗方法察确定盘剂量逗组数46了解语化学夜毒物铁的理与化特莫性，希纯度肃，杂设质成凤分与骑含量矛等有相短关毒嗽性资净料可以供参显考者没有砖毒性蜡资料劫可供汇查阅疼者预试临验找出围大致肾致死个范围(即死牙亡率组从0-完10嘴%至90辈-1直00遥%)设计役正式货试验锄的剂状量和歼分组近似索化学蒜物的LD50(L虚C50)值作渔预期器毒性鬼中间浮剂量宿，上脖下各功设计1～2个剂蛮量组最大何耐受皮量试尺验471各组软剂量框的计南算i介=（lg朽LD90-l房诚gL沟D10）/（n-里1）或i枣=（lg箩LD10叔0-超lg折LD0）/（n-球1）i为组支距，n为设寨计的焰剂量盆组数漂。以旗最低玩剂量笛值（LD0或LD10）的成对数抚剂量碧加上肺一个i值，内即是蛋第二踩个剂庸量组右的对蹄数剂鉴量，躺依次岛类推锈直至颂最高嗓剂量沾组48霍恩扒法（Ho树rn）：平均羽移动茫内插宝法（mo吹vi虾ng叛a泻ve庭ra翻ge充i肠nt宁er为po揉la数ti垫on）改进勇寇氏矿法Bl犯is委s法：最大委似然专性法撇（ma这xi陈mu域m启li普ke规li摄ho停od泄m赖et睁ho菜d），河最精告确的昏计算灾方法LD50的几堆种计电算方讽法49霍恩闷法设4个剂图量组每组吊动物隶数相湖等，铸一般剃为4只或5只各剂简量公敏比为√10。结牺果可浓查表昂求出LD50及其95灾%可信犬限。由于侄动物扭数量掀较少孕，其95参%可信挖限范奔围大苗，适迅用于稳预试递验较止好。50改进百寇氏畅法各组揪实验旱动物学数相睛等，脑一般枣为10只各剂陕量组颂剂量视呈等济比级消数排宣列，严至少然有5个剂士量组死亡虏率呈金正态乔分布晨，最金低剂食量组秘死亡未率小堆于20恼%，最康高剂勤量组绝死亡喉率高别于80蛙%，所贝选剂吹量对建数差搜值相容等。51化学五物LD50大于2g哀/k族g或5g顺/k富g，表款明毒良性不子大我国运药品而的毒鱼理研垮究指尸导原墙则规绸定要之以最告大容袖积最萌高浓宪度给浑予动至物后路未见吃死亡不必应计算LD5052化学留毒物亿的LD50（LC50）的测睬定一狸般要妥求计忧算实晒验动羡物接测触受充试物滋后14天内讨的总幸死亡推数。试验擦周期53全面狠观察蚕动物债的各候种反傅应和按变化宫，仔葱细分垒析实真验动报物在谁染毒架后出产现的中毒峡表现、剂量页效应、时间所分布。观收察记狮录的蜡内容左：（五翼）遍毒性悉作用温观察54中毒读体征衔及发条生过只程死亡谊情况存和时弱间分裹布体重病理河形态望学变省化（五娇）预毒性能作用墨观察55中毒腿体征木及发称生过还程详细卵观察赖和记笼录动雨物出沾现的酷中毒沙体征发生奖时间体征旺发展层的经刺过各个五系统幕的特泥征初步姐确定葱急性隔毒性占靶器桶官不同道表现后提供柴毒性杆机制防的信质息5657续表6-乱1啮齿困类动币物急妹性中案毒表耗现58死亡狠情况雅和时桶间分神布实验停动物色的死啄亡数计对LD50值产茄生明赔显影招响分析万中毒乱死亡槽时间村的分您布规扰律可符以提东供重盯要信腿息：惠原形吨，代灰谢59久效帅磷小怕鼠经丸口与兵腹腔衔注射虹染毒霸，均吼呈现货染毒传剂量晶增加腊，死色亡时术间缩挽短，窑呈直羡线负炮相关辨，这惰提示抄实验古动物推致死鬼原因皂是化熟学物狗原形惊所致女；过氧宽化二返磷酸林二环跌己酯啦给大打鼠腹罗腔注型射后棕呈现领明显床的染诸毒剂问量对乌数值御与死吉亡时这间呈援负相剧关关喜系，嫂但给血小鼠量腹腔急注射垫后，协染毒啄剂量浇与死竹亡时尽间无桂明显勺相关绘。这贤提示秃可能附与该灵化学熔物在列大鼠无和小肥鼠体锐内代泰谢不忘同有荒关。60体重体重估可反虎映动诱物中避毒后欠的整易体变午化。掩对存奋活动随物尤归其是擦对低猾于LD50剂量正组的箭存活填动物犹，应仙在观诉察期14天内途称量貌其体联重的陪变化曾，以旷便了与解受棚试物验引起会毒效唯应的抢持续南时间谜。61体重反映雁动物躁中毒盲后综颂合性锤整体蚀变化讨，比便较客岗观简夏便的短量化度指标应定绿期多误次称算量动犯物的惠体重晋变化栽，一伤般为诊每周1次或2次对体靠重指样标的搞变化托要仔善细观雁察和快分析62体重残变化乓的原绞因影响洗食欲消或消伐化系挪统的远功能影响郑食物才的吸俩收和扎利用影响疑水的其摄取肾功搭能急涉性损绞伤63病理们检查死亡剥动物挤：大体稠病理港变化地，如末脏器截外观紫、大陆小、止色泽陈的变族化，该有无箩充血激、出嫌血、尾水肿适或其赶他改幼变存活粮动物职：观察谎期结种束时诸应进劫行解列剖检酸查，岁必要藏时做当组织删病理燥学检锋查64（六终）波观察恶时间姜和周垃期染毒仅以后典应即速刻开衣始观免察动毅物中忠毒表睡现和蒙死亡茶情况给药种当天养应连笋续或锣多次省观察休，以栋后可裙根据村情况纷，每怠天2次或率多次反观察刮直至算试验外周期哲结束65观察轻周期消一般窗为14天LD50(L怜C50)计算背时以流观察缸周期被内各疼组动灿物的耗总死助亡数高为依锄据不同雷化学搂物质茅引起呆动物谷中毒扔体征妙出现啦的时促间不握同，耻而且幼引起删死亡币的时设间存眯在个积体差廊异速杀或型化输学毒道物仅醒计算24窜h的死闲亡率（六巧）齿观察象时间刊和周毯期66急性光毒性笛试验宪求出LD50(L拴C50)值，川通过LD50值进聋行急疲性毒孟性分细级(a雨cu逮te蚁t茂ox戒ic少it摊y担cl爹as脉si征fi坏ca烟ti扁on解)，评价砍毒物衣的急石性毒西性强乏弱，坑比较共毒物移的急导性毒麦性大交小四、党急性杠毒性桶分级录和评五价67■不论橡我国荷或国继际上扔的急戏性毒物性分上级标为准均斩还存浮在不碑少缺泡点，冒因为跟它们粱主要友是根剖据经率验确名定，扑客观朋性还算不足■目前冈还没娱有全首世界肠公认兄、统劫一的咳毒性爷分级馒标准急性摆毒性砖分级686970按照习急性占毒性事分级批标准湿评价矮毒性胜大小起是相锯对粗盏略的援分级报告寒：LD50、急遗性毒靠性级快别；酬中毒洗体征脊、出偏现体逃征时止间、桃死亡魔前征屡兆、污死亡雾时间纤和剂班量组杠间分馒布、纵存活时动物厌的体羊重变让化和叙恢复具情况尘、死握亡动爪物的柜病理播变化急性晶毒性浑分级71举围例文献唐：曹虽静祥,治洪,余淑跑懿,等.硼硒狭联合豆对大馅鼠的喷急性役毒性挂和亚隆慢性记毒性乘研究.卫生沫研究,坑20误02陵,3尿1(扶4)污:2匀97忍-2皱99方.中国挥预防沫医学侨科学豪院环比境卫贪生与晚卫生牺工程嗽研究灶所72前言单独妥的硒恨、单心独的催硼均走有抗迅氟作味用，仁有研况究表种明硼驶硒联笋合作肆用使冬氟中肚毒大馒鼠的楼康复症效果璃较好默。因福此，哗我们需在硼带硒抗称氟药摆效实曾验研下究的亿基础锣上，冻为了略解硼株硒联刺合毒飞性作慈用，臭为现创场人驼群应芝用硼鞭硒联否合防嫁治氟传中毒引提供巩试验资依据粘，我帅们就欠硼硒刷联合嚷对大抱鼠的弹急性馒毒性棕及亚倾慢性贿毒性迎进行固试验岩研究举办例73主要死试剂挨：四于硼酸籍钠、锦亚硒支酸钠急性登毒性纤试验故：参怎照霍恩拌氏（Ho健rn）法涨，选及用80只成际年大虹鼠，屑雌、妇雄各乐半，墓平均霸体重22取0g，随机骄分为8组。受茶试物亡用蒸掠馏水必溶解究，动页物禁食16小时，经远口灌轿胃一宫次染般毒，薯观察两周内动料物的狱死亡缴数，盛查表两计算LD50举础例材料滥与方忆法74四硼谱酸钠四与亚耳硒酸吩钠联惧合对细大鼠窜的急疼性毒楚性实舰验：班根据臭亚硒恋酸钠亮和四重硼酸臣钠的限半数狠致死踩量，心将受租试物滴按比论例混陷合并猪用蒸玻馏水封溶解召，40只，随机元分为4组。应枯用预讯测与捞实测LD50的对枕比法浊评价蚂两种辽毒物谁之间展的联晌合作鸽用性敢质举惨例材料折与方卡法75急性价毒性货试验然：急性顾硒中截毒动葡物在液服药5m饶in后出者现急翁性硒绵中毒抗症状球，最各初表允现为贝呕吐臭、腹时泻，血然后废呼吸由困难针，四耀肢痉巴挛，套直至膀死亡桥。急隙性硼朵中毒挎动物拜在服喊药60厦mi欧n后出秒现急写性中冷毒症老状，加表现额为不抽好动比、腹缝泻、瓦口鼻楚出血重，甚刘至惊牌厥死涉亡举届例结意果76举脏例结步果77联合蛮作用捎评价兵结果结挡果78LD50：四厚硼酸关钠对已雌、锋雄性缸大鼠14精70岁mg矛/k拔g。亚功硒酸腰钠对档雄性楼大鼠14芦.7喉0m振g/旋kg，对稻雌性速大鼠6.睡81感mg别/k影g。联厉合对狮大鼠谣的急姓性毒纪性，袍雄性棚大鼠漆为17膜27堂.1钢0m软g/智kg，雌索性大烛鼠17叨17认.9支4m讲g/宿kg讨卸论79我国渣工业疑毒物室急性里毒性排分级佩标准逼评价克：本起实验众四硼摔酸钠弱与亚复硒酸抢钠混廊合毒莫物属付于低尾毒类龙物质赶。该艘毒物导的值声可为取亚慢恋性毒殖性实瓶验提拨供染京毒剂筋量水资平的誓设计慈依据讨河论80第二使节斜蓄积碗毒性阿作用81蓄积伟作用(a烤cc知um掩ul晨at仙io抬n)婚:当化慈学毒祸物反箭复多倦次给店动物断染毒贤、化医学毒坟物进递入机羊体的吃速度(或总椅量)超过慎代谢到转化责的速纯度和惭排泄努的速蓝度(或总冬量)时，饥化学缸毒物膀或其毛代谢中产物刑就有吴可能缝在机很体内祖逐渐高增加仓并贮册留。逢化学事毒物父容易裙蓄积钟的组桶织和恩器官演称为滥储存抚库(d丝式ep旨ot振)。机趴体常坑见的捕储存奏库有溜血浆菠蛋白赏、脂鱼肪组型织、捡肝脏材、肾尊脏、冠骨骼政等。82■蓄积滤作用奴是发寸生慢筹性中封毒的岗物质唱基础■一种探外源陡化学毫物有终无蓄勿积作求用是厚评定恳该化磁学物咽是否核可能封引起迎潜在侦慢性慈中毒宴的论沉据之饿一，务也是炸制定项卫生绍限量隔标准桶时安塞全系聪数的珍一种寺依据83➢物质仆蓄积(径ma拦te纤ri砍al石a占cc阵um起ul装at泄io败n损)：实验疏动物仗反复林多次讽接触丹化学显物后和，用京化学瓶分析凭方法灵能够鉴测得追机体位内存翅在该掘化学天物或贵其代陕谢产浪物➢功能(损伤)蓄积(华fu计nc谁ti包on露al差a棒cc验um前ul回at产io恩n)：有的技化学害物在泪长期决接触怪后，博机体盘内虽退不能留测出汗其原样型或消代谢提产物如，却感出现忽了慢砍性毒导性作铲用84功能虫蓄积哭可能渠是❑由于债贮存疑体内斜的化孟学物追或其眯代谢煮产物扒的数末量极厌微，枣不能咸检出季物质倒的蓄态积❑或者仁是由碎于每凝次机皆体接斧触化虫学物较之后能所悦引起笼的损屯害累纽奉积所为致85蓄积快系数(a穿cc洽um盈ul性at堆io咳n貌co衔ef深fi既ci春en锁t)是多非次染秒毒使昌半数递动物睡出现女效应(或死博亡)的累渠积剂肃量[E推D50(n锋)]与一声次染胃毒使远半数重动物浇出现幻玉相同曲效应(或死下亡)的剂胃量[E歉D50(1杠)]的比狱值，曲即：ED50(n约)LD50(n侮)K=某­­抵­­脱­­或­­径­­联­­睛­­或K=杜­疏­­桃­­渗­­懂­­损­­录­­绩­­夺­ED50(1扫)LD50(1闹)861第三脏节仿短期赞、亚朱慢性散、慢朽性毒楼性作歪用87一、咐短期仔重复泥剂量箩毒性短期鼠重复结剂量焦毒性扣：实疯验动怒物或符人连里续暴刘露外鲜源化墓学物14屠~3兔0天所巩产生双的中慨毒效洋应。短期援重复缎剂量克毒性欲试验呆具有绸预备匪和筛研选的镇性质摸，尤炒其是28天短亚期毒昌性试仁验，燥基本茄成为济一种蛾初步君估计删长期轧暴露毫可能尊引起台毒效邪应的阴经济币实用凤的短怪期重宰复毒健性试坐验。88二、馒亚慢鸣性毒颗性作劈燕用89亚慢丸性毒银性(s烦ub逆ch亲ro环ni百cto捧xi筐ci乐ty看)是指棍人或付实验僻动物怀连续查接触确较长哪时间雨、较怨大剂招量的垂化学渡毒物序所产派生的董中毒甘效应是。接触螺时间通常鼓指介掌于单蕉次染滔毒和10沟%动物胀寿命只的范愁围，冠通常战为1～6个月终。较大允剂量是相模对低卖剂量半而言担，没沾有明枕确的厉剂量肥范围虎下限哈，上熟限一握般小睬于急砍性LD50。（一妥）疫基本朗概念901.研究去受试摧物亚康慢性累毒性兼剂量插－反互应（吵效应团）关方系，沈确定恳未观抬察到蹦有害饺作用蚀的剂偿量（NO乒AE设L）和其落观察施到有闪害作由用的裁最低晶剂量探（LO码AE易L），提出园安全按限量抓参考列值。（二兆）亚过慢性猎毒性国试验政的目恒的912.观察谦受试樱物亚厕慢性喉毒性叠效应戏谱、因毒作用特客点和骑毒作帮用靶恰器官欲。3.观察伏受试盗物亚衡慢性倍毒性猪作用是的可思逆性滔。4.为慢候性毒搏理试紧验的侄剂量金设计糟和观璃察指焦标选酬择提婆供依眠据。（二矿）亚著慢性伴毒性匠试验撕的目括的925.为在船其他距试验咱（急碗性、笼亚急饼性、芦其他倘动物厌种属陆的亚欲慢性胳试验腰等）木中发抗现的手或未港发现荣的毒菠作用微提供每新的弦信息洞，比减较不路同动捉物物打种毒唉效应夫的差炒异，还为受洒试物茅毒性莲机制逗研究期和将允研究量结果怀外推梅到人锁提供鸦依据夺。（二并）亚零慢性沾毒性岭试验咽的目尘的93（三袜）亚村慢性马毒性惨试验漠方法酸的要锤点1.实验爱动物垦的选足择（1）种鉴属和纽奉品系（2）性食别、于年龄额和动膀物数（3）微涉生物怀学寄砍生虫断学等沃级和盒饲养司环境94啮齿凝类和认非啮把齿类字：大同鼠、伤犬和判猴经皮门毒性脖试验唤，可韵用兔俘或豚拉鼠。大鼠灿常用Wi谜st淘ar和Sp冲ra彩gu庸e厉–Da驼wl翼ey。犬多阴选用Be乐ag咱le犬。（1）种姑属和躁品系95雌雄晨各半顷。选择袍离乳翻不久景的动纷物，恨大鼠6-琴8周龄炊（体鸭重80飞-1茶00纽奉g）同组器动物冤体重崖相差纪不应凭超过夏平均防体重的10尸%，组软间平着均体必重不毅超过5%大鼠办、小挤鼠每袭组不饿少于20只，运犬、毕猴每组尸不少丝式于6只（2）性蹈别、猫年龄抖和动钞物数96亚慢蔬性毒肺性试害验周蛾期较费长，衡观察饲指标管较多额，实舍验动针物的钞质量永、喂锄饲条绑件和绣试验促环境毕明显带影响效受试租物的豪毒性冲反应牌。实验窝动物红分四厌级：税普通零级、脊清洁窑级、雷无特皮定病套原体半级（SP察F级）挪、无脸菌级嘴。（3）微摸生物奏学寄程生虫持学等峰级和浙饲养者环境97使用逼清洁祖级及笼以上村等级时大小叉鼠，聋饲养瞒在屏勾障环引境内岁进行隐试验碑。保持俭符合慕规范泽的温粪度、侄日温夜差、模湿度帝、换转气次魄数、清气流和速度净、压融强梯术度、殊落下恋菌数茫、空涨气洁帆净度争、氨爽浓度漏、噪尿声和袜照度艘。（3）微料生物搞学寄匙生虫拒学等史级和妈饲养甩环境98环境送严格朴控制垂人员以、物哲品和胃环境弓空气晒的进置出。合理聚营养疼的饲净料，寒洁净原的饮构水，崭清洁热无污缺染的巨垫料幅和笼薯具。不同葬项目饥的试靠验应咬分室价进行孕。人工逃控制瘦昼夜倾交替霞。（3）微赴生物贵学寄晌生虫辟学等曾级和锈饲养眠环境992.染毒垒方式尽量眉选择狗和人忧类接钟触途幕径相循似的检方式虾；与预砍期进窃行的严慢性途毒作魔用研文究的冷接触市途径相纹一致膀。以经膏口、朴经呼衡吸道云和经社皮染际毒为说多。染毒通频率粱通常哨每日窄一次足，连狭续给侵予，蛙如试验典期为3个月效以上张，可遣每周6次。10答0（1）经兵口染捡毒途白径：灌胃苹法、经喂饲揭法、狮胶囊缠法。建刑议灌筑胃法品，特佛别是贴要求滚染毒晚量准泻确性踩高。防犬采膊用胶包囊法吓或灌龟胃法卧。长速期灌梢胃给徐药需斤熟练奏的技劳术和勉非常耗认真离负责之的工旋作态焰度，荐出现竹失误携，均饲应如姻实记志录，锈以利扬试验党结果季的准翁确评毕价。10夏1（2）经奥呼吸绢道染截毒的籍时间2-沃6h泳/d，设春计需藏要可渐缩短孔或延违长。产工业陪毒物克可缩坏短至1h，环转境污陷染物横可延辩长至8h（3）一蚁些特尿殊染锣毒途浑径的绑亚慢棒性毒明性试底验，万受目娱前技犯术条村件的贯限制宽较难姻进行已，常借不能表确保苦给药摄量的仿准确觉。如转长期妖反复杰的直素肠用释药、毕眼睛丈用药意等，袭期待从研制软出完枕善的喊专用定装置齐。10烟2（4）随亭着注公射剂骂型的默新药吐增多坡，需姨经常踪蝶进行扮注射毅染毒彼长期脑毒性叠试验断。犬嫩静脉池注射筹比较故易行芒、常工用。通大鼠励连续撞反复觉长期毒的静摔脉注武射十构分困笑难，皆有熟个练的随技术萍人员债，也而难以动进行纯的。军可用汽其他旅注射忍途径剑代替念，如塔腹腔怨注射滑。尽槽管大瞧鼠有汉较强农的抗山感染超能力猜，但狼长期子反复这腹腔务注射演仍应恼注意苏无菌广操作抢。10列3（5）在尾进行夫亚慢毅性毒徒性试映验时喂，最妥好应矩结合底进行苹毒代惰动力违学血袄药浓斯度的两监测僵。为章了维牙持实锁验动师物体目液中毯有一惊个准歉确的择血药堂浓度计水平苗，保拆持受谨试物鬼生物骑学效愚应每闲日相湾似性域，亚松慢性拌毒性品试验纳每日错染毒帆的时肢间应掌保持慕一致抛。在每廉日上膝午进惰行，辞给药补后喂盖食。10逐43.剂量源选择溜和分肤组设3个剂压量组济和1个阴纹性（介溶剂云）对宫照组蛋。高剂外量组办应能淘引起联明显盼的毒蜂性或驳少量枯动物啄的死膜亡（违少于10却%）。低剂铜量组抗应无购中毒征反应偷，相仓当于酒未观性察到艳有害秘作用识剂量执（NO际AE技L）。10朵53.剂量住选择炉和分惩组高低喊剂量赖组间叛设置1个中躲剂量坝组，烘比较存理想胁的中血剂量铜组约限相当佩于观多察到车有害该作用队的最柏低剂竖量（LO净AE砖L）。高、蜘中、坛低剂许量组交距以3-廊10倍为回宜，翁不少涉于2倍。对于这药物驻，大丧鼠可左用人扯临床轰拟用辨剂量帆的10、30和10添0倍，基非啮治齿类步可用5、15、50倍。10呀63.剂量慎选择腥和分慎组在实灾际工担作中佛，由努于受印试物竿多样断性和录试验艘中多询种因峰素的孙变化博，亚互慢性朴毒性笋试验增的剂焦量设脏计和处确定由是很学不容至易的寒，需迈要具柿有丰刷富的题毒理区学经拥验。10奋74.观察销指标对经旧外源识化学娇物染鬼毒后许的实艰验动辉物进锅行全恼面、腾系统街、深君入的厨观察予检测炕是亚显慢性轰毒性熔试验题必做基的工壁作，王检查豆的时石间包抢括染膛毒前晓、试画验过望程中牛、染伸毒结凉束时垮和染绒毒结济束后衣的恢岂复期逝做检毛查。岗检查翅的项瓣目包湿括一哀般性霞指标深、实膝验室据指标律、系百统尸馅解和禽病理规组织输学检饲查、尺其他劝特殊咬指标灶检查劫。10僵8亚慢陷性和对慢性色毒性迁试验咽检测湾各种苗毒性锅终点奔的流飞程图亚慢剖性、楼慢性毒性景试验过程娇中外观生长抢和发墨育行为秀功能毒性宪体征生物成体液最终秃体重脏器纽奉湿重脏/体比活杀雷解剖器官/组织大体伞尸解固定/染色显微优镜检浓查血液弊学血清-化学-生化德学尿分辅析生物泛学标烦志酶内源鹊性成炕分胆汁尿10抓91指外董观体牵征和推行为钟活动零，粪融便性肤状、情食量缘瑞及体冠重变炼化等竞，能城综合透反映宵毒物今对机晨体的谁毒作能用，帜是敏辱感的败综合越毒效概应指键标。佩在试段验过省程中掌，应景详细炮记录欧，仔众细分屡析，集可以辱从中美发现震一些挡化学呆毒物爱的毒晋性特延征。（1）一埋般性梁指标11热0观察专实验采动物包出现舒的外票观体拼征和春行为旨改变雁，记缩慧录各誉症状链出现翁的时仰间和躲先后那次序壁，包占括食通欲、绘活动把、被饰毛、弃分泌炮物、叙排泄耻物、努呼吸谱等，委尤其途要留隔意动负物被临毛的赠光洁召度与破色泽民、眼生分泌膀物、克呼吸槽、神季态、洪行为闸等。有助毯于分仗析化要学毒盏物损物害机忌体的演部位拢及程狼度。①外客观体朽征、析行为典活动11唐1是一驴个敏悄感、够客观狡的指刻标，廊反映捉了受旬试物作对实榨验动靠物的际生长状发育离及一喷般状疑态的全影响阁。如果资受试帮组动脏物体车重增侍长比傲对照符组低10遗%，提已示是致由受丈试物用引起凉的毒块效应如果傲各剂乳量组爹体重爹增长秤改变轰有剂标量-反应兆关系解，肯例定是育一种父毒性蝴效应套。每周痕称重这一次晓，3个月馅后每2周称氏重一鞋次。②动监物体齐重11古2每月菠观察钢并记日录动构物的竭饲料纳消耗皇量，余计算异食物窝利用突率，承即动醋物每焦食入10该0g饲料称所增唯长的夹体重萄克数迷（g体重/1炒00拢g饲料抖）。贝比较旬各染渐毒组代与对晶照组苦动物椅的食份物利术用率惑，有尚助于卫了解睛化学胸物的箭毒性是效应鹊，尤麻其将抛体重蜓指标宗和食派物利磨用率踩结合扬起来备分析辞。③食铸物利屿用率11铁3食物远利用告率如果校受试友物影蛋响食胳欲，胀则每渴日进薄食量同减少参，体平重增格长会扰受影芹响，柏但食面物利京用率贡不一促定改忠变；言如果谋受试递物干健扰了猎食物递的吸行收或术代谢骡，虽俩然不翁一定吊影响仍食欲奔，但色体重帜增长槽却减羊慢，指因而赛食物敌利用滥率也愿会有葡所改产变。11雕4通常档包括器血、未尿常艘规和馆血液衰生化访指标碍检测止。目的慢是发御现受贺试物美所致苹器官夹损伤货和功喉能紊狗乱，败体内恭生化刷转化童和排总泄的凝重要寒器官不肝和删胃的掘功能米是检暴查重卷点，泳血液省是另禽一个柳重要狐的靶绒器官由。（2）实写验室叮检查11皱5①血货液学互检查螺：红细万胞计狮数、腰血红朗蛋白次含量君、白半细胞凉计数烂及分繁类、垃血小耗板计改数、醒凝血灿时间变等。②尿竖液检户查:外观狮、pH值、餐蛋白速、糖搁、潜辜血和匪沉淀嚷物镜悟检等耻，可送提供挎与毒兰物有娇关的桐靶器僵官毒铸性和副中间保代谢往产物堂的信淡息。11隆6血清安天门企冬氨循酸氨雾基转遣移酶(A逝ST杜)、丙画氨酸指氨基惧转移畅酶(A慕LT讽)、碱装性磷罩酸酶(A趣LP爪)、尿匀素氮(B表UN租0、总债量白(T励P)、白溪蛋白(A砖LB劝)、血刃糖(G闸LU战)、总膊胆红塌素(T乔-B锋IL区)、肌明酐(Cr零ea)、总侦胆固泻醇(T婶-C骄HO头)等。③血蹄液生酒化检尾查：11你7大鼠眼作试别验，趋不需笼在给粘药前锋作实赢验室早检查示。大动外物犬孩等试装验，环染毒夺前检农测1~士2次。恢复玻期试腹验，破在结丽束时晴作实耳验室州检查用，对英判断该受试嚼物作蚂用的烛可逆据性、认延迟蜻性有养重要仓意义剖。11原8不影启响实船验动肠物生扯理功驻能的粪最大电取血如量为涂其总瓜血量稳的10关%。总血皇量约读为50赤ml且/k穴g，0.违3k咐g的大邀鼠约监有15烂ml血液桨，一慨次取买血量柱不应停超过1.蒸5m醒l。11邪9试验慕结束化时活珍杀实滨验动拉物，止作系掉统解散剖，颜进行安详细耳的肉辰眼检暖查，冲测定旨脏器凤重量封并作焰组织熔病理斧学检豆查。道在试爆验中惑间死暑亡或内处于隔濒死尾状态境的动其物，识亦应皇作及借时的屑系统奶尸解旷和病更理学检检查披。（3）系哀统尸虹解和胁病理纸组织丛学检搂查12筑0脏器暑系数剪或称伤脏体吃比，指银某个加脏器俯的湿散重与唯单位妻体重卸的比驾值，亭通常搏是每10卸0g体重疼中某征脏器基所占畏的质定量，樱表示音为脏销器质辨量（g）/体重抵（10输0g）。赞适用信于实诉质性睁脏器辣，若堆某脏巩器的仍脏器巷系数即增大回或减享小，脆反映托该脏灿器的盆肿大翅或缩须小，姑如增辽生、色充血选、水驳肿、消萎缩钻等变俯化。①脏效器重柳量和陶脏器锄系数12于1目的是确刮定化泪学毒组物对喝机体升毒作鸽用的挪靶部侦位、珍损害元的性部质和届程度简，从惰病理淋学角伟度寻冈找化客学毒浑物与剂病理铺改变园的剂谷量效割应关齐系，池为了砌解化瘦学毒右物的忘毒效渣应及锦其机驴制提焦供依漠据。②病拾理学左检查12走2检查肝内容念：大体兰检查粮、常罢规病团理组柿织学绿检查六、酶血组织谨化学亏检查缴、免凳疫组别织化查学检即查、照细胞娱超微榆结构傍检查扎等，声分别尘从大开体、亡组织盐、细避胞、匀亚细秩胞甚饿至分样子水向平等少多个原方面躬发现奶化学麦毒物追的毒贺效应岁。②病温理学柱检查12壮3根据追受试僚物毒仿性资御料、锹试验库中的迹观察肌和受那试物绪的结面构等成线索仆增加税一些哄检查辜项目减。推测吹受试姓物可焰能对修心血栗管系私统有拳毒性带，进曲行心删电图读、血申压、椒眼底参检测教；对神缎经系贫统有庭影响撤，进盆行神椒经行见为、墓神经奸反射讯等检貌查；（4）其纲他指粉标的蜂检查12欲4对电糟解质堆、微例量元知素代禁谢有珠毒作呈用，推则检出测血琴钙、董血磷咏等含岔量；增加辛眼科唱、骨衡髓象铸检查粒等。增加已酶组赚织化骄学检矿查、辰免疫询组织乓化学袍检查稿和细社胞超邪微结例构检奴查等乱。（4）其惨他指艘标的翁检查12膀5为充抽分了下解受乐试物鸟的中队毒特截征，胆获得销尽可授能多论的揭必示毒斤性靶蔑器官玩和中略毒机视理的族线索启，亚缺慢性必毒性房诚试验炉应认桥真仔崇细的片选择粱观察弯指标鸦，如踩能有便特异激性指迈标更础好。（4）其启他指但标的赢检查12执6特异畜性指竿标（生物漠学标显志）袄是指特能反剖映毒杜物对嚷机体多毒作中用本奇质的般特征锹性指鲁标，面常与水其毒撒作用硬机制断有关吩。确骑定特钩异性捉指标狡的难勉度较运大。（4）其盏他指吓标的魄检查12声7在仔累细分燃析化捎学毒耗物的船急性图、亚恰急性柔毒性铅试验脾过程覆中动桥物中策毒表穿现的姿基础赤上，聋结合宅受试鹊物的纸化学识结构径和了煮解其袖特殊淡的化柔学基朵团找貌出线未索，允然后往设计是测试春项目酷和方助案。12享8三、然慢高性毒锡性作踏用慢性榜毒性(c争hr造on愤ic惧t初ox瓶ic烧it讨y)：指人忧和试震验动静物长茂期(甚至女终生)反复责接触兽低剂浩量化强学毒明物所梦产生孙的毒颗性效恢应。“长配期”，一丑般是想指2年。边大鼠劣相当锻于终兵生染田毒，此兔相横当于榴生命朗期的36丸%，犬隆为20软%，猴述为13疗%。12纠91.研究船慢性暮毒性骂剂量-反应糟（效驴应）快关系行。确撕定长馋期接冬触造伪成有员害作你用的段最低途剂量(L抚OA擦EL雷)或阈牌剂量拣和造酱成有碍害作船用的旦剂量(N饱OA着EL部)，为盈制定竭人类宏接触范时的加安全低限量患标准罢，如纹最高袜容许各浓度(M凉AC犁)和每供日容渔许摄鸦入量(A艳DI梦)以及销危险田度评奇价提广供毒昌理学节依据微。慢性较毒性贴试验枣目的13罚02.观察苏慢性暂毒性他效应情谱、首毒作弓用特点和泥毒作衡用靶属器官略。3.观察描慢性驱毒性虫作用颤的可牺逆性垮。4.为毒侄性机片制研茄究和怠将毒融性结睬果外推到乎人提樱供依租据。慢性欢毒性愈试验奖目的13蛇1慢性背毒性污试验隐方法然要点与亚精慢性矮相同拦。最凭好用吩纯系嗓动物术并将经同窝闸动物膊均匀惠分配毯到各哈组。啮齿忘类首动选大伯鼠，抛非啮妨齿类基为犬饲或猴散。每个犯剂量诸组的鄙动物阀数应像满足央试验颜结束煌时数坟据统去计学晶处理医的要更求，支如每但组大私鼠40乱~6斜0只，恼狗8~串10只，舰雌雄录各半喉。（一劈燕）实疗验动泰物的聋选择13羽2应选赔择年段龄较羡小的票动物煌，一段般选叙初断废奶的烦大鼠挡或小谋鼠，腾即小肿鼠出誓生后3周（椒体重灵约10键~1捕5g），死大鼠陕出生3~绍4周（朱体重汇约50石~7酱0g），杏狗4~咬6月龄敢。试验皆结束吗时每践个剂乌量组矿每性培别的翠啮齿道类动像物数枕不少刺于10只，祖非啮男齿类究不少忧于4只。（一填）实泼验动途物的叫选择13笑3工业墨毒物映染毒6个月揭或更轧长时攻间，挥环境爆毒物雾与食溜品则贵要求1年以债上或2年。多采喇用经酒口染罢毒。菌染毒5-告6d妇/w。根据送需要片可经福皮肤傍染毒匀和经敞呼吸野道染我毒，算长期晚呼吸凯道染雀毒需装有良浆好的弦专用脂动式势吸入厨染毒浅装置鄙。染惰毒时郊间工蜡业毒蕉物吸阿入4-过6h纠/d，环表境污告染物筛要求效≥8h绣/d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