上海交通大学微生物实验课件实验四培养基的使用特点和微生物接种方法2

上海交通大学微生物实验课件实验四培养基的使用特点和微生物接种方法演示文稿当前第1页\共有23页\编于星期四\15点（优选）上海交通大学微生物实验课件实验四培养基的使用特点和微生物接种方法当前第2页\共有23页\编于星期四\15点微生物培养Culture：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体混合培养物：含有多种微生物的培养物；纯培养物：只有一种微生物的培养物；Pureculture通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果纯培养技术是进行微生物学研究的基础！当前第3页\共有23页\编于星期四\15点一、用固体培养基分离纯培养培养基：液体培养基；固体培养基；1.5%-2.5%半固体培养基；0.2%-0.75%琼脂当前第4页\共有23页\编于星期四\15点一、用固体培养基分离纯培养菌落（colony）：

单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体众多菌落连成一片菌苔（lawn）当前第5页\共有23页\编于星期四\15点无菌操作：火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行当前第6页\共有23页\编于星期四\15点

不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征（形状、颜色等），可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据当前第7页\共有23页\编于星期四\15点菌落的描述：形态、表面和边缘特征当前第8页\共有23页\编于星期四\15点当前第9页\共有23页\编于星期四\15点同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落当前第10页\共有23页\编于星期四\15点一、用固体培养基分离纯培养使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法：1、稀释倒平板法2、涂布平板法3、平板划线法4、厌氧微生物的分离当前第11页\共有23页\编于星期四\15点当前第12页\共有23页\编于星期四\15点一、用固体培养基分离纯培养1、稀释倒平板法2、涂布平板法操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好！使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！当前第13页\共有23页\编于星期四\15点利用L棒进行涂布当前第14页\共有23页\编于星期四\15点3、平板划线法当前第15页\共有23页\编于星期四\15点3、平板划线法当前第16页\共有23页\编于星期四\15点二、选择培养分离

抑制大多数其它微生物的生长；

使待分离的微生物生长更快；对微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物

生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。当前第17页\共有23页\编于星期四\15点三、选择培养分离1.利用选择平板进行直接分离待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制

高温下培养：分离嗜热细菌；

培养基中不含N：分离固氮菌；

培养基加抗生素：分离抗性菌；当前第18页\共有23页\编于星期四\15点1.利用选择平板进行直接分离

颜色反应：分离特定的菌株；

牛奶平板：分离蛋白酶产生菌；待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物当前第19页\共有23页\编于星期四\15点常用的选择培养基沙门菌常用的培养基：亚硫酸铋琼脂平板(BS):含有煌绿、柠檬酸铋铵、亚硫酸钠、硫酸亚铁，具有强选择性，分离沙门氏菌HE（Heetoen)：柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、硫代硫酸钠、麝香草酚蓝和复红，分离肠道致病菌当前第20页\共有23页\编于星期四\15点麦康凯培养基乳糖、胆盐，弱选择性，中性红,分离肠道致病菌中性红指示剂pH感应范围6.8（红色）到8.0（黄色）分解乳糖产酸，菌落颜色呈红色沙门氏菌、志贺氏菌不分解乳糖，菌落颜色与培养基相同胆盐有助于沙门氏菌的生长，抑制其他细菌大肠杆菌？沙门氏菌？常用的选择培养基当前第21页\共有23页\编于星期四\15点克氏双糖铁蛋白胨；牛肉膏；酵母膏；乳糖；葡萄糖；氯化钠；柠檬酸铁铵；硫代硫酸钠；琼脂；酚红为指示剂，黄色为产酸，红色为产碱观察克氏双糖接种后斜面、底层产酸、产气、产H2S的情况，大肠杆菌斜面？沙门氏菌斜面？当前第22页\共有23页\编于星期四\15点接种划线菌种：大肠杆菌、沙门菌、