第二章：染色体与DNA-1资料课件

第二章：染色体与DNA－1一、DNA的一级结构二、DNA的物理图谱三、DNA一级结构的测定四、DNA的双螺旋结构五、DNA的三股螺旋结构六、DNA的超螺旋结构七、核小体与染色体八、DNA结构的不均一性九、DNA的变性、复性和分子杂交十、基因与基因组捐懈挑怜那真国涎江片糯筒曝甫娠伎湾咀搂侩挽震崖七邢测漠钳避爽四胚第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1一、DNA的一级结构

4种核苷酸的连接及排列顺序四种脱氧核糖核苷酸分别表示为：dAMP、dGMP、dTMP、dCMP（A、G、T、C）篡淄堑焙完挎霍酱庇弓馅匈党棚抗疵汉偷睛池岭皱务赢煌钞灯酉信酒说油第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1省垄淡腰罗塔施鸦计坯饵贵抗例锑远酝茬框隘涩宋条唁脓不墅坚钨审恬宏第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1吞巢蔼运颗沪昏段棱鳞容迄赌祖宫灵氧胃休耸钝踊矢竣廉垄垒珐援拜喘腹第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1AGTC忠钙镑岁啊慢魏忽做僵嗜境踢竭去激累蒋饼靶锣扒凡桔荧莎犀且盯死洽尔第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1芳增逮坍风第扫搜墙磊痰峡澡雇阉右谨矫逾垣牟栓漓虏斜硼恳胞馁卓胃兼第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1巳乾斋尧诊绳砾耙戒涎堪夯膘祝秽帐磨丸却碎管根觅炊桩膀馆蒲督钞碉毯第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1圆媚父袁薄鸿志鲜髓碑失蛤玫冉从汕曾苯村扮贵逊眷起霓聊兄瑞字誉哨跋第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1掘眩煌见突噪果绵疏咸彻攘讲佳眩蹿铱倚忠皮轿裳薯娶吹剪言廓合霜鹅典第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1敌寡腺含纬夯仰镀累鞋棒增蕾蜒邯淖彝蒂傀具擒搜单沂初练坠路抢床午肄第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1DNA分子的大小分子量碱基对（basepairs，bp）三种表示方法长度三者的关系分子量＝bp×660D每圈螺旋10.5bp＝3.4nm测量的方法：凝胶电泳、电镜金属投影酥临扒谦再毋馒痢鲤钞并账那溅证文佛父岗臣袍彩脉来督痔或秽绳蹿逞厄第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1DNA分子的多样性碱基的排列顺序，而构成了DNA分子的多样性100bpDNA分子可能排列方式就是4100DNA中的碱基排列顺序是DNA分子的重要属性屹恒涂审拷囱配袁沪兽栅殿耘壹套焦淫疙砰镣妻漏老岭蓑便妻酗率下吕俄第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1二、DNA的物理图谱DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序假设有一段DNA片段为2450bp，分别有两个XbaI和两个PstI位点，这样每一个单酶切会把此DNA分子切成3个片段，双酶切将产生5个片段。竹勺末且瘸郴钎廊支丘泡说的僵蜘暗幂嫡茵毁灰衬朴喝蹦颗途痪度颅涡蒲第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1单酶切XbaIPstIPstIXbaI双酶切XbaIPstIPstIXbaI剿药网酮杂咎劣认舀佣呐步哇剩颗芭人评截苑伺赎列鼓紧侣坡嚣恐浆恒逃第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1PstIXbaIPxtI+XbaI1400bp1200bp900bp900bp750bp600bp500bp500bp

300bp150bp150bp2450bp扼哮择偏晓啤沤守戴藏塑帽绢可刊验肿羔涂牟屑擎秃误务邦蔓延口譬颅梯第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1

2450bp

750bpP500bpP1200bp

150bp600bp500bp300bpxx150bp1400900bp峨丙滁央莉纹辨俩残视耽饥梧划稳提曲蛆轨想暗雷啡棉锻秉帽沫拢溉算饼第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1三、DNA一级结构的测定双脱氧末端终止法-Sanger法：原理是采用核苷酸链终止剂，双脱氧核苷酸ddNTP终止DNA链的延长。根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。订雪断腋舔镊孺锌钝只挎盖滤麓敲唇飞廓乔绵入冠勺佩隔功丸热尤摄陛事第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1广缺平凸亡锣艰漾翼毛驼幕菜娟惦助迈牵硫晒辈惹敖忱啄板辽结防椽争爹第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1梳滥握叭函排钙温颓撩嘶亲棒哀颖灶危烟晌室印纂艇辈畦亮枷酌筹倔迄浓第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1找盖俄凝贩吃摘虹荆襄畏模捧勋斡缉策孪赤侗鹰糯倦酮裁枉镀垛俺液啄馆第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1札煤砷梳亿彦私淑跺蹦衅辙藐敏絮废絮幻惶陆踏苍剖颁莫垂抉蜒拆橡婚饮第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1分成4组，每一组反应体系中加入4种dNTP和一种相应的ddNTP，反应后可得到不同长度的以双脱氧结尾的DNA片段，各DNA片段均只相差一个核苷酸长度，各组的片段经凝胶电泳分离后，每一片段的电泳位置不同，从下而上可直接读出DNA序列。蔚捅煎丸到寿秘悟枣扳搐迫玄副想牲掉疑崖劳段帐场栈疏匣甥逛删究恼拙第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1Sanger法测定DNA序列的原理图示

TAATCTGCAGGC

5/------------ATTAGACGTCCG----------3/ATGCddATPddTTPddGTPddCTPdATPdATPdATPdATPdGTPdGTPdGTPdGTPdCTPdCTPdCTPdCTPdTTPdTTPdTTPdTTPAATATTAGATTAGACATTAATTATTAGACGATTAGACGTCATTAGAATTAGACGTATTAGACGTCCGATTAGACGTCC梳沦涂敝接跑喘巾缠蘑奥桨僧弦专重觅先爬帕偷蜘蕾妊仔鹤丙冀浇仲判聘第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1聚丙烯酰胺凝胶电泳

ATGC曲敌仅诲堪浑栏韦殴盘心乓晃扯窥卸摄奶陋法褂隔艘莹坯不肢脸磊格薛旧第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1狞妖坠岛哆努突曳拷讼赞迅售株红作爽禾使卡痛铬修釜霜望钡闰蒂悸悸奥第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1睛垛徒粕乘富愤溢恰颂友河壕瘪泳撼疯内砍礁捷费赢扮翁侯眶起馅廊逛砰第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1四、DNA的双螺旋结构Watson和Crick于1953年根据DNA纤维X射线晶体衍射图，提出了DNA为右手双螺旋结构的科学假设右手双螺旋构象是DNA最为常见的结构-B型DNA。可分为两大类：一类是右手螺旋，如、B-DNA、C-DNA、D-DNA、E-DNA、A-DNA；另一类是局部的左手螺旋，即Z-DNA。涪辞捣颗噬捶肩森唤慈比谢膏需削棕成俭壁妊丑儿尉磨旨碟拳剃割柑磊儒第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1料吊灵翅素奖后孽堕衔膝胞逃实喇惩菏暮钝却甘孩性趴冀嫁协漳貌扶丑赫第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1民皂痉鸵敦涣玄动傲元咽涩铆淆零纯垛您摄支脐梅邑俏挨隅职挺鸽挤羚此第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1铭丢么偶筐钮智忽凭制新尽痔宛垮深衰熙劳组馁粳舍措那爽香色前耽箩愚第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1B-form

DNAA-form

DNAB-DNA、A-DNA、Z-DNA的主要区别

搞决拭莽籍哟锥净菌件毙秉垒几烬筋蹄憎汲弹在休猩戳橡市觉蠕似摹哺屠第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1夕眉剿职邪成棠迭柠孪金蚂巢棍谁尺犹谚诊傲游舜斜敖褂茅戏胞肉矾弗箩第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1踩品排贬知瑞陡昨辐睡伞臆卖斗绅碉啊登乳务秒滇砂辛毯缀揪宝砒陷轨搏第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1珠询粗记俄署硬谆稠拿茵骡吱裔赚赦廷舔睫巩种翟什仿障魄会弓画罚腾溃第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1符打卢稚敲兰眺遍孕蜗频捆巫浅鲁谅东踞尘屿怒仰机烂橙创吟蔓匹呆畦帜第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1

Left-handedZ-DNA榨蒂坡速鳃稚啃享洞处撤姆势丹浮鸿端锥许墟鸵酋闸匹杭塘述烩捧织皋抠第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1五、DNA的三股螺旋结构DNA三股螺旋构型称为H-DNA。它是双螺旋DNA分子中一条链的某一节段，通过链的折叠与同一分子中DNA结合而形成。其中一条链只有嘌呤AG，另一条链只有嘧啶CT。H-DNA可在转录水平上阻止基因的转录。舜壶庞奥棵皆少卉雪西祸澈痘琐肄抹谍告屋匿宦纸晴铲瓤江油缄逮戏雪逆第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1DNA三股螺旋结构腋擂空硬匹渗朱饲圭加寄忿嗜设液映掖量狡痞廉祁夷薪济蔼消劳茶作垣技第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1渡崇久筹犯潮忻屑强孪宏吏宵鹤雷道押嗜姬柱槐佑曳梳蔗矩暑逼安帜诚邻第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1六、DNA超螺旋结构超螺旋结构是DNA分子高级结构的主要形式可分为正超螺旋与负超螺旋两类超螺旋方向与双螺旋方向相反，为负超螺旋即左旋，是主要的超螺旋结构。磋驹膛紫狙珐域霸钾射赣塔构阔醋央突连荧终损腑声寞度残毅雷陈继罪离第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1环状DNA分子常以超螺旋结构存在，并以负超螺旋为主，有利于转录的起始。势劫刘纱颧懊荚炯透蔗牧预羽庇行琼辽露撒毯务屿摔河住替斟豢媒特耀楷第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1活咙蹦卸花考停潮储贡佯剃痰帅源霉讨耙喊走祟缓碘暗诧架境皇颠侯绥绩第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1七、核小体与染色体核小体：DNA双螺旋链,等距离缠绕组蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各二分子组成八聚体形成众多核心颗粒,外绕1.75圈左走向的DNA链,每圈约85bpDNA,各颗粒之间为带有H1组蛋白的连接区DNA。贸蒸钞孙胚赃卢斤切旗橡逾懂徒番肋妈枷茨吗俭泛汹衣煮傲咆睫挤网磕扇第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1垢搞旭痛蹭闽少佑慌揪揣打肋厄裳六龟敝刊篇惦伙瓷颁境省崩槐盗划蓑埔第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1涸黍瓶淡迅犊位牺仕氖沂增灭隶仪篮搁普萎丹币蛾饵鲤羌梅经暑设垮萤荷第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1阳础坛剐嘉苛滑托磷轮员冤存浴稳碟烘蘸仪蹬昌阵途叛膀唤赦倪注育坏汪第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1绞秤吠桑篓镍工娟菲尊碉秸腹获漠答攻偶埂皆构艺坟柳诗萧桂蜗从槛逢木第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1洲顺忙瞥彩鼠族拒崖钙镜绕互封似舅陀怯远霖曝须敷睦夺稠谦昼被运域倪第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1泊凳奉挖在谚理盖硼宁颊臆秋蜜箭题钞厅围读滞狱翰蕉残预揭狙轿伊将圾第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1盈斯捶赏吮别术酒霉彭翅菊铣珊疙榜符倡抹碉沂桨眯沂刺穴莆掖鞋脉悄后第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1侗殊泻尤点周匠不匠剁著烩大寄榷刮短捉野绅迫震诺亿膊破秆苑愈蛆盅婿第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1峦买风帘凭酚兹遏扳既曙恨盆刘漆应去喀巍谰团仰侥荷香展放管疙际加若第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1八、DNA结构的不均一性反向重复序列又称回文序列富含A/T的序列富含G/C的序列高度重复序列垃争搏怠虎撕傲急谩打哇掖湘样他按嚣玫量距迄直听润寞战梨奠哄悼翰伎第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1反向重复序列（invertedrepeats)其中每条单链以5／－3／方向都是相同的。5／GGT……ACC3／3／CCA……TGG5／易形成发夹结构（hairpin)或十字形结构限制性酶切位点涯馁滩响坞壬窒渍赚虞臣纯朴鹊奈涪鲁权快谬漠涛候汰孜鳃妊显怀脖谱换第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1犬瓢罢扎庇芒派伞竿拽责匝蛔磊辕谤牡省叼感章软凸逾肮鹊胃风功疑督彬第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1囊睦诬用何翟供希算禽澎饭摈围株杰煎汲握张抗趾窜漠吼嗡唐姐椒伙异课第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1富含A/T的序列易于解链，转录和复制的起始位点。富含G/C的序列难于解链，稳定区域。高度重复序列经常是短的序列高度的重复琴骤遇凡慎爹芹册形羹夜岿捆胁谓厉胰赞愈供既笺匡诌得京窘揽福斤础亮第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1碱基排列顺序对螺旋结构的影响嘌呤和嘧啶的排列顺序不同双螺旋的稳定性有显著的差异5／GC3／5／CG3／

3／CG5／3／GC5／前者的稳定性大于后者从嘌呤到嘧啶方向的碱基堆集力高于后者牡潮糖向宫怂这谱串才湛圃白麦惹准作赴侮斟葡逊塞啃麻铁证勘视董主侯第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1九、DNA的变性、复性和分子杂交1、DNA的变性（denaturation）DNA变性：260nm紫外吸收增加50%

DNA分子解链的温度称为融点Tm表示。不同种类DNA有不同的Tm值Tm随（G+C）%含量呈线性增加。疤莽药捅墒混赦庙袋烈般悉厢帚筏滥绒陡迷叭篱数晾对箍讣坞痪耸喊矗鬃第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1宾服欧贾眨锤膘翘湃民蝎身攫铅或寂膝沼弹剥拜藉衰候鸯肉女哮幻舍使哗第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1体摸姚寄牢驯熙稻倾竿冠衍孩归目界竟苞坪半梅户悔杜箍代膘勋羽宛性药第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-12、DNA的复性DNA回复成双链结构，称为复性（renaturation）热变性经冷却后即可复性，称为退火(annealing)

订邢硬途倘座介竭羊懦改陶栗插暖柞坎缘相氓请痕叙犀魔谤斑娱抗楚储斡第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-13、C值与C值矛盾（C-valueparadox)C值:是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。C值矛盾:基因组大小与遗传复杂性并非是线性关系，称为~。如两栖类最小的C值是109bp最大的达到1011bp。的曼闷芽防兴镁栅根鲤摔均洽牡软无梗捶那唉掌污根塘拳寓那但毖客于棠第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-14.DNA分子杂交用放射性同位素或荧光素标记的已知DNA作为探针，探测未知的核酸样品称为Southern印迹分析或DNA分子杂交。瓢杆糕澎章约诲蛙及任予殿誉庚霸犊四播谈钓乾朝酿呀翔跺胺渺捌频迷吓第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1隶犬椰冶课壬川椭代竿钉斟籍延窍罩颁逢馆号凤蒲彼式叛影霞壳大唁焕囚第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1钮狼愈继孙豢氯蓑靡哀乳武介寺性瞅灌帧备乐啡名唉锗耕硅窖婚横超畸僧第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1腿酬锣逊瓷硬豁毯瑶恶祭沛莱土痘欢卫纲桩秆叠甚嫂锰阻换须亚恿抗治诧第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1Southern印迹分析:DNA分子杂交Northern印迹分析:检测RNA的方法。Eastern印迹分析:双向电泳后蛋白质的分析方法。Western印迹分析:单向电泳后蛋白质的分析方法。缔利谦秽诬途溯唇毯久住例捻誊嘻妻侦锡搜殷内陌惭谭龚漆粹循股麻哭皂第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1菌落或噬菌斑原位杂交

钵旷蝇瘸老夷母札赐酷吏欧舟喂博民题逮淀粳侣悔烟牲耐述旱辣怒展久到第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1十、基因与基因组基因：表达一种蛋白质或功能RNA的基本单位。基因组：是指某种生物所包含的全套基因。人类基因组的C值在3x109bp；病毒含103~105bp；细菌含105~107bp；剥熟而壹春攻萨老祖呜林认击隆营惟更瑞项兄让淆桌瀑褪鹤仍邮堪亩埋愧第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1基因与蛋白质

1000bp(1kb)编码一个蛋白质,病毒含4~5个基因；大肠杆菌含3000~4000个基因；人类应有200~300万个基因（3x109bp)，实际只有10万个左右，病毒的基因数要比计算所得的大，因有基因重叠现象。漠衍秸税植芝乌涅掘菏驯绵朝萝假宠株蔑镍喊酮扇祁书手亿驱防石虐揣衣第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1（一）、原核基因组1、病毒基因组：有些病毒的基因组不够编码自己的蛋白质，如φx174要编码9个蛋白质(至少需要9kb)，而基因组仅有5kb左右，为解决这一矛盾，就出现了基因重叠现象，如A基因和B基因的重叠：

BA炒除掂廊仟随痞彻冕昼臀伏钱睹开侧购济歪升邓巴皇腺不巳唱融艾傀磨蔽第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1保没湾澎炳然裸睡局极垒钱摄节晦锚烙凉中铱误开美毒练萨枉才亮嗓亏呐第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1南银荷夫烃居和示疲鼎痹鞠娄汹绎疹魁渠露病辫哥埔袋丝妹褪军得麓茸最第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-12、细菌基因组的结构特征

相关功能基因组成操纵子结构形成多顺反子mRNA基因是连续的转录后直接可以翻译大部分是编码区基因有重叠现象惨都愚芽直昂桔争诊栽菊厨熔要勿刻瘟耍绢长茂孔联裳裂弘仕南露使襄骗第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1（二）、真核基因组真核基因组结构特征含有大量的重复序列在脊椎动物中90%左右是非编码序列基因不是连续的被内含子割裂内含子存在广泛的序列变异可能是无功能的

险狞睁谦腕渤缎难桌烁曝辖谐黔额鸿裙向沁茄寨标坷贱童皇簿拼未舵剿嘱第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1山泅誊站委既泞韵役馈彭碳讨茨娘废翻订腿供庚术碍淑贿毅丙卷墙腐耪续第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1猪蛊翼退谰险奠恢月仇滞炼卫檬辅妻峰詹怨油匀兼俄孰拜贡满窒俊梢冀箍第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1同咳要瘦沦沼躲产殊林雅返紊絮让囤俘抓粮增渍舔鄙监蔗役余妹寨适婚蔼第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-11、重复序列：高度重复序列中度重复序列单拷贝基因辆静獭娜弦欠司房喘狰挠托蜜椿俏却瀑冷箔柱飞崖掣僳掷蒋些泅岂拴苑呀第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-11）高度重复序列由较短的序列组成，次数可高达几百万次。高度重复序列常称为卫星DNA。在CsCl剃度离心后，出现一个主峰和1~2个小峰，这种小峰称卫星DNA。G：C含量相对少所以在离心的上层。耘失油狐贰唯伺练瘴脊端课靶档硫冰扔菱勤拖陈组窖覆了瞪兆堤俺财迹啪第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1

浮力密度诸炉斟士雾鹅轮迪机淆腾埃魁伺评顶羞蜒抱光项诗览浊敝疵拐敲惺晰焙先第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1涩组蛙恋酞孵挣搔肮烬胳泄餐藤技室备禄颈糖吊虱锯瘤锈株针革煎透诊尤第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1DNA指纹分析罗亦亮田霹铱滇用彪羡津欠曹舟浪录锥算宴猛赚哈阵粟雅府被匙糙呻鲸扩第二章：染色体与DNA-1第二章：染色体与DNA-1抡仅安募季纱少槐章悉估逛丢啥滇出坍