自动生化分析技术-课件

第四章

自动生化分析技术自动生化分析技术是指机械化的仪器设备模仿代替手工操作，即把生化分析过程中的加样、加试剂、混合、保温反应、检测、结果计算、数据处理和打印报告，以及实验后的清洗等步骤自动化的分析检测技术。特点灵敏准确快速节约标准化

自20世纪50年代，第一台生动生化分析仪问世→管道式自动生化分析仪第一节自动生化分析仪的类型根据仪器自动化程度

全自动化半自动化

半自动分析仪：分析过程中的部分操作需手工进行，而其他部分操作可由仪器自动完成。分析速度慢，适用于样品数量少、检验项目少的小型医院。

全自动分析仪：指从加样至打印结果的全过程，均由仪器程序控制自动完成。适用于样品数量多、检测项目多、而且复杂的综合性大医院的临床生化检验室应用。自动生化分析仪分类根据仪器结构和原理连续流动式（管道式）

离心式

分立式

干片式

连续流动式：各个样品与试剂在同一管道内连续流动时完成反应、显色、比色、检测过程，样品间以气泡、缓冲液或试剂空白相分隔。

分立式：各个样品与试剂在各自反应杯内完成反应、显色、比色、检测过程。

离心式：在离心力的作用下，各待测样品几乎同时与试剂混合、反应、检测，属于同步分析。

干片式：将测定一个项目所需的试剂固定在固相载体上，加上定量血清后，干片的背面即产生颜色反应，用反射光度计检测便可进行定量分析。根据仪器的测定速度小型自动生化分析仪中型自动生化分析仪

大型自动生化分析仪

超大型自动生化分析仪

根据开放程度封闭系统开放系统属光学分析仪器，检测原理基于物质对光的选择性吸收，一般工作波长340nm800nm，属紫外-可见分光光度法。自动生化分析仪的工作原理一、半自动生化分析仪结构特点与设计原理

特点：体积小，结构简单，灵活性大，价格便宜；一般不受试剂、方法的限制。工作原理：连续流动式分析，其流动管道中的特定位置有一微型比色杯称为流动比色杯，无不同比色杯之间的吸光度差异。注意事项：1.由于检测所加试剂及样品量都很少，要特别注意取样和加试剂的准确性；2.使用过程中，严禁吸入强酸试剂；3.每次使用完毕，必须用蒸馏水冲洗比色杯和管道；4.做酶动力学检测时，要特别注意起始的吸光度值，如果很低应考虑底物耗尽

5.如反复多次吸入蒸馏水后，不能调整零点或吸光度不稳，应使用清洁液浸泡比色池后再用水清洗；6.仪器若长时间不使用，应在一个月内至少通电一次。二、全自动生化分析仪一、分立式分析仪目前临床实验室所用的大部分分析仪都属于分立式，具有结构简单、检测速度快等优点。日立7180型分析仪

吸样加入第一试剂

搅拌

保温

测试杯空白

清洗反应杯

数据处理

打印结果

比色分析加入第二试剂

搅拌

保温全自动生化分析仪工作流程图

分立式自动生化分析仪的结构包括：样品盘（架）、取样装置、试剂室（瓶）、取液装置、反应盘、混匀装置、温控装置、光学监测系统、清洗系统和计算机控制系统等。试剂盘2试剂盘1试剂针2试剂针1样品针样品盘反应盘搅拌器清洗装置1.样品盘或样品架

样品盘：放置一定数量的样品，通过样品盘的转动来控制不同样品的进样。

样品架：由步进马达控制移动，以样品架上的条形码或底部编码孔识别样品架及样品位置号。传送条带状样品架圆盘状样品架2.取样装置：由注射器、传动泵、加样臂和样品探针等组成，能定量吸取样品并加入到反应杯中。取样容量：一般2μl-35μl交叉污染：在吸取不同样品时可产生携带交叉污染防止措施：对样品针内外壁进行水冲洗3.试剂室：存储试剂，大多数试剂室具有冷藏装置，条形码检测系统。（1）试剂转盘式：放置一定形状试剂瓶，数量不等，试剂盘转动可使某个试剂瓶到达特定的试剂吸取位置。①③试剂②④条码阅读器（2）试剂架形式：放置大容量任意形状的试剂瓶，由每个试剂瓶内引出一条试剂管路及其喷嘴，不同试剂间无交叉污染4.取液装置：用于定量吸取试剂加入反应杯。取试剂量：一般为20-380μl交叉污染：吸取不同试剂时可产生携带交叉污染防止措施：对样品针内外壁进行水冲洗特殊功能：液面感应防碰撞装置预热试剂5.反应盘：由100只或更多的反应杯围成一圈组成，有的分析仪具有两圈反应杯

反应盘作恒速圆周运动，转动到某些特定位置时短暂停止，在反应杯中加入样品、试剂或进行搅拌混匀反应杯：是样品与试剂进行化学反应的场所

由透光性好的硬质玻璃或石英玻璃制成6.混匀装置：反应杯里的样品与试剂需要混匀（1）混匀方式：搅拌混匀：用搅拌棒，多数超声混匀：可杜绝携带污染，极大程度较少泡沫产生防交叉污染：水洗7.恒温装置：反应杯需浸浴在恒温环境中，一般固定在37℃，温度波动不能大于±0.1℃。温浴方式：（1）空气浴恒温：升温速度快，不稳定，受环境温度影响大。（2）水浴循环恒温式：温度稳定，需加防腐剂保持水洁净，并要定期更换循环水。（3）恒温液循环间接加热式：兼具空气和水浴的优点，用一种无污染、惰性的不蒸发液体，用很小缝隙的空气把比色杯与恒温液隔开。8.清洗系统（1）样品针、试剂针和搅拌棒的随时清洗在用于下一个样品、试剂或反应杯前需清洗一次，多数为去离子水冲洗（2）反应杯的随时清洗多数全自动生化分析仪具有反应杯清洗装置一个反应杯内的化学反应和吸光度检测结束后该反应杯就被冲洗系统及时冲洗冲洗过程：吸液针吸去废液→排液针注入清洗液1（碱性）→吸去废液→水洗并吸干→注入清洗液2（酸性）→吸去废液→水洗并吸干→擦干→吸光度检查自动生化分析仪.wmv二、连续流动式分析仪

测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应，均在同一管道中经流动过程完成，又称管道式分析仪。单通道管道式自动分析仪结构示意图

第二节自动生化分析仪的参数设置

仪器的参数就是仪器工作的指令，参数的正确设置和合理使用是仪器正常工作的前提条件。

封闭式生化分析仪的参数及开放式生化分析仪的有些参数由厂家提供无需设定。开放式生化分析仪的部分参数，应在使用前根据各自实验室及各自使用仪器不同，正确设置。（一）基本参数设置1.试验名称：指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。2.方法类型：

常用的方法一点终点法、两点终点法、固定时间法、连续监测法等。根据被测物质的检测方法原理选择其中相应的分析方法。3.反应温度：自动生化分析仪通常设有25℃、30℃、37℃三种温度，为了使反应的温度与体内温度一致，一般选用37℃。4.测定波长：①单波长：当测定体系中只有一种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收峰无重叠时，可用单波长检测。②自动生化分析仪常用双波长或多波长。主波长：被测物质反应产物最大吸收峰作为主波长次波长：干扰物主波长的吸收与次波长