高中生物-动物细胞工程教学课件设计

提问：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养技术,植物体细胞杂交技术植物细胞的全能性基因工程和细胞工程分别是在什么水平的操作？分子水平；细胞水平及细胞器水平概述两个技术的过程？这些技术的理论基础？动物细胞工程1、动物细胞培养2、动物细胞核移植3、动物细胞融合4、单克隆抗体学习目标1、理解并描述动物细胞培养的原理、过程、及条件。2、理解并描述动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。如何救治烧伤病人的皮肤？思考？

救治烧伤病人的有效方法是取其自身皮肤进行自体移植(若用他人的皮肤呢?)但这对大面积烧伤者来说自身皮肤有限,有什么办法获取大量的自体皮肤吗?---将自身皮肤的细胞培养成皮肤!---这叫“动物细胞培养”.取该患者的皮肤进行细胞培养,获得人造皮肤后再移植（一）、概念是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。（二）、原理细胞分裂增殖一、动物细胞培养胰蛋白酶处理取出组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎单个细胞细胞悬液转入培养瓶内培养（贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。原代培养传代培养（10代--50）（三）、动物细胞培养的过程接触抑制贴壁生长

动物细胞生长特性传代培养（10代--50）原代培养（一般到10代）（第一死亡关）1、再次用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养2、10~50代的细胞，称为细胞株3、部分细胞的细胞核型可能发生改变，突破第二死亡关获得不死性，称为细胞系细胞核型:10代以内的保持正常。使用或冷冻保存的细胞通常为10代以内细胞株与细胞系：都是传代培养里的概念。10~50代为细胞株，50代以后为细胞系1）、无菌、无毒的环境（除了灭菌外，还要在培养液中添加一定量

，定期更换

。2）、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、

等。）3）、温度和PH：

度；PH为

。4）、气体环境：

和

（95%空气和5%CO2）抗生素培养液36.5O2CO2动物血清或血浆7.2-7.4（四）、动物细胞培养的条件练一练：课时作业75页，第1题二、动物体细胞核移植技术将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物（一）、概念细胞质细胞核早期胚胎C母绵羊子宫多莉羊分娩妊娠体细胞核移植技术过程核移植早期胚胎培养MⅡ中期卵母细胞Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞融合后的卵细胞胚胎移植（二）、过程问题1、该过程用到了哪些生物技术？2、该过程体现了什么原理？为什么用去核的卵母细胞作为受体细胞？3、克隆羊多莉性状像谁？完全像吗？性别是什么？核移植早期胚胎培养胚胎移植细胞核的全能性，卵母细胞的细胞质可以促进细胞全能性的表达B羊不完全母羊练一练：课时作业75页，第3题回扣目标1、理解并描述动物细胞培养的原理、过程、及条件。2、理解并描述动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。三、动物细胞融合1、原理：细胞膜的流动性2、融合方法：物理（离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）

生物（灭活病毒）3、应用：单克隆抗体制备杂交细胞灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经单一抗原免疫的小鼠提取第二次筛选能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择性培养基体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体问题1、杂交瘤细胞的特点？2、传统抗体的特点？单克隆抗体的特点？3、可否用已免疫的B淋巴细胞培养，获得单克隆抗体？既能无限增殖，又能产生抗体纯度低，特异性不强，灵敏度低特异强，灵敏度高不能，高度分化细胞，不能增殖【即时巩固1】科学家对鼠杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程，请据图回答：(1)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞，主要原因是_______________。(2)将________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞能产生该抗原的抗体。浆细胞不能无限增殖抗原(3)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有______________、_______________的特性。(4)]动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有________。(5)在动物细胞融合过程中，可用________处理离体组织细胞使之分散，其独特的诱导融合方法是使用________

(6)鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有____________的特点。(7)单克隆抗体制备过程中需经过

次筛选，最初筛选的目的是

。在体外大量繁殖产生特异性抗体

动物血清胰蛋白酶灭活的病毒特异强、灵敏度高2挑选杂交瘤细胞

【即时巩固2】

(宁夏理综)回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_______________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现__________的现象；但极少数细胞可以相互接触接触抑制单层(或一层)胰蛋白酶衰老甚至死亡连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_____。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是___________________________________________________________________。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。不死性降低减少由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色中(5)在细胞培养过程中，通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中________的活性降低，细胞________的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作______进行攻击。冷冻酶新陈代谢抗原1．近年来，我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA。G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原，它们刺激人体可诱导产生相应抗体和细胞免疫。人被带毒动物咬伤后，一旦感染，若不及时采取有效防治措施，可导致严重的中枢神经系统急性传染病，病死率高。人被咬伤后，病毒从伤口进入，先停留在伤口周围的神经背根神经节内，然后沿着传入神经传到脊髓，再上行到脑内，并在其中大量繁殖。机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗，已取得良好效果。请根据上述材料，回答下列问题：（1）特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中，应用的动物细胞工程的技术主要是________________________。（2）下图是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：动物细胞融合技术①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是_________细胞，该细胞能够产生_______。从小鼠内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射特定的物质是______________。②图中B过程是细胞融合，相比植物细胞融合过程，其特有的诱导方式是用_________处理。融合后的细胞有三种情况，需要用特定的____________进行筛选。B（或浆）

抗体抗原（或狂犬病病