土壤中有效磷含量的测定

序号实验使用仪器名称数量备注1可见分光光度计1实验使用样品名称数量备注1红山土壤7.5g序号实验使用药品名称用量备注198%浓硫酸溶液200ml2抗坏血酸0.5g3钼酸盐0.3g4酒石酸锑钾0.350g5磷酸二氢钾0.2197g6抗坏血酸溶液14ml7钼酸盐溶液28ml8碳酸氢钠0.5molL-1序号实验使用玻璃器皿等易耗品名称数量备注1500ml烧杯12250ml烧杯2380ml烧杯14棕色试剂瓶251000ml容量瓶1650ml容量瓶87100ml容量瓶1815ml移液管1910ml移液管1105ml移液管1111ml移液管112比色管813锥形瓶614滤纸315漏斗3土壤中有效磷的测定（0.5molL-iNaHCO3浸提一钼锑抗比色法）1实验目的及说明土壤中有效磷的含量，随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等条件的不同而异。通过土壤有效磷的测定，有助于了解近期内土壤供应磷的情况，为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据。土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定。浸提剂是否适用，必须通过田间试验来验证。浸提剂的种类很多，近20年各国渐趋于使用少数几种浸提剂，以利于测定结果的比较和交流。我国目前使用最广学的浸提剂是0.5mol/L-1NaHCO3溶液（Olsen法），测定结果与作物反应有良好的相关性［注1］，适用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土。此外还使用0.03molL-1NH4F-0.025molL-1HCl溶液（BrayI法）为浸提剂，适用于酸性土壤和中性土壤。同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异，即使用同一浸提剂，而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响。所以有效磷含量只是一个相对的指标。只有用同一方法，在严格控制的相同条件下，测得的结果才有相对比较的意义。在报告有效磷测定的结果时，必须同时说明所使用的测定方法。2方法原理石灰性土壤中磷主要以Ca-P（磷酸钙盐）的形态存在。中性土壤Ca-P、Al-P（磷酸铝盐）、Fe-P（磷酸铁盐）都占有一定的比例。0.5molL-1NaHCO3、（pH8.5）可以抑制Ca2+的活笥，使某些活性更大的与Ca结合的P浸提出来；同时，也可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出。浸出液中磷的浓度很低，须用灵敏的钼蓝比色法测定，其原理详见土壤全磷的测定章节。当土样含有机质较多时，会使浸出液颜色变深而影响吸光度，或在显色出现浑浊而干扰测定，此时可在浸提排荡后过滤前，向土壤悬液中加入活性碳脱色，或在分光光度计800nm波长处测定以消除干扰。在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸反应，生成磷钼杂多酸，被还原剂抗坏血酸还原，则变成蓝色的络合物，通常即称磷钼蓝。3试剂本方法所用试剂除另有说明外均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。1+1硫酸(H2SO4)。10%抗坏血酸100g/L溶液：溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中，并稀释至100mL。该溶液贮于棕色的试剂瓶中，在约4°C可稳定几周,。如颜色变黄，则弃去重配。钼锑抗试剂：溶解10.0g钼酸铵(NH4)6Mo7O24・4H2O于300mL约60C水中，冷却。然后将稀H2SO4溶液倒入钼酸铵溶液中，搅匀，再加入100mL0.3%(m/v)酒石酸锑钾(K(SbO)C4H4O7・1/2H2O)溶液。最后用水稀释至2升，盛于棕色瓶中，此为钼锑贮备液。临用前(当天)称取0.50g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中，此为钼锑抗试剂，再室温下有效期为24h，再2〜8C冰箱中可贮存7天。磷标准贮备溶液：将优级纯磷酸二氢钾(KH2PO4)于110干燥2h，在干燥器中放冷。称取0.2197g溶于水，移入1000mL容量瓶中。加(1+1)硫酸5mL，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0瞄磷(以P计)。本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。磷酸盐标准使用溶液:吸取10.0mL的磷酸盐贮备液于250mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含2.00瞄磷。临时时现配。0.5molL-1NaHCO3(pH8.5)浸提剂：42.0gNaHCO3溶于约800ml水中，稀释至1L，用浓NaOH调节至pH8.5(用pH计测定)，贮于聚乙稀瓶或玻璃瓶中，用塞塞紧。该溶液久置因失去CO2而使pH升高，所以如贮存期超过20天，在使用前必须检查并校准pH值。4仪器实验室常用仪器设备和下列仪器50mL比色管50mL容量瓶1mL、5mL、10mL、15mL、25mL移液管150mL锥形瓶(5)分光光度计注：所有玻璃器皿均应用盐酸或硝酸浸泡5操作步骤⑴标准曲线的绘制取8个50mL比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、1.50、2.50、5.00、10.00、15.00、20.00mL、25.00mL，加0.5molL-iNaHCO3(pH8.5)溶液定容至50mL。该标准系列溶液中磷的浓度依次为0、0.15、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mgL-iP。显色：吸取该标准系列溶液各10.00mL于容量瓶中，分别加入5.00mL钼锑抗显色剂，慢慢摇动，使CO2逸出。再加入10.00mL水，充分摇匀，逐尽CO2。在室温高于15°C处静置30min。测量：用1cm光径比色杯在660〜770nm波长(或红色滤光片)处测读吸光度，以空白溶液(10.00ml0.5molL-1NaHCO3溶液代替土壤滤出液)为参比，调节分光光度计的零点，测量吸光度。减去空白试验的吸光度，并从标准曲线上查出含磷量。然后以上述标准系列溶液的磷浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制校准曲线，或计算两个变量的直线回归方程。标准曲线(图1)图1水中总P测定标准曲线⑵样品测定称取风干土样(1mm)2.50g置于干燥的150mL锥形瓶中，加入25±1C的蒸馏水125mL，于往复振荡机上振荡30±1min，立即用无磷干滤纸过滤倒干燥的150mL锥形瓶中。在浸提土样的当天，吸取滤出液10.00mL同上处理显色，测度吸光度。6计算（1）测得吸光度为0.023,查得m=0.7121曜磷酸盐（P,mg/L）TmT气021T0.0142mg/L式中：m一由标准曲线查得的磷量（四g）V——水样体积（mL）（2）测得吸光度为0.096，查得m=2.9721曜磷酸盐（P，mg/L）TVt29021T0.0594mg/L（3）测得吸光度为0.216，查得m=6.6873四g磷酸盐（P，mg/L）TVT6.；073T0.1337mg/L⑷平均值：XT0.014拓0.0；94G0.1337T0.0691mg/L（5） 偏差:d1T气XT0.01420.0691T0.0549d2Tx2XT0.05960.0691T0.0095d3Tx3XT0.13370.0691T0.0646|0.0549G0.0095G|0.0646|（6） 相对平均偏差：dT 3 ・100%T62.23%x 0.06917实验小结本次试验共进行了三天：第一天，制备样品溶液；第二天，进行试验；第三天，填写实验报告。在第二天上午绘制标准曲线时，第一次由于静止时间过长，测定结果不理想，随后严格执行操作要求进行了第二次试验，得到理想结果；下午的样品测定实验，对中水进行了3个平行样测定，测定结果相对平均偏差为62.23%，远大于2%，实验结果误差较大较大。我的误差分析如下：（1）配制药品：①称量误差，样品称量时操作的规范性、结果的精确度都会影响测定结果；②溶质溶解后未经冷却就将溶液转移至容量瓶；③配置好的样品保存不当，被污染。(2)实验操作：①没有严格按照仪器清洗原则洗涤仪器，仪器被污染；②量取液体溶液时，没有平视；③在移取待测液时，未对气泡进行处理；④滴定管滴液时，管口没有悬垂与容量瓶口正上方，沿瓶壁流下的溶液造成滴定误差；⑤在系列标准溶液配制时浓度不标准；⑥静置时间过长。仪器使用：①比色皿使用后未用稀硝酸或铭酸洗液浸泡，未除去吸附的钼蓝有色物；②未放蒸馏水参比溶液；③未将波长调制700nm；分光光度计的操作不规范［1］。8实验心得通过本次试验，我认识到：要想获