2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年真题集锦附带答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年真题集锦带答案（图片大小可自由调整）题型一二三四五六七总分得分第1卷一.参考题库(共30题)1.连接反应中，下列哪项物质是T4DNA连接酶所必须的辅助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP2.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori3.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制实现的。4.在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显_________色，为阳性克隆。5.cDNA合成第一链时所用的引物是A、PolyCB、PolyTC、发夹结构D、PolyA6.不同的限制性核酸内切酶都盐离子强度有不同的要求，一般按离子强度不同分为低盐、_________、高盐三类。7.某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？8.融合表达载体的中的GST也叫A、六聚组氨酸肽B、蛋白质AC、纤维素结合域D、谷胱甘肽S转移酶9.大肠杆菌DNA聚合酶有几种酶活性A、5种B、2种C、3种D、4种10.黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。11.在众多的植物转基因方法中，_________的方法应用最多。12.转录水平的鉴定是指_________。13._________成为国际国内人体健康战略的重中之重。14.下列哪一型限制性核酸内切酶占比例最大A、I型B、II型C、III型D、IV型15.多数II类限制酶反应最适PH是A、PH:2-4B、PH:4-6C、PH:6-8D、PH:7-1016.下列哪一种方法属于核酸分子杂交A、southernblotB、PCR扩增C、限制图谱分析法D、抗药性标志筛选17.利用限制性核酸内切酶降解基因组DNA，通常选择几个碱基识别序列的限制性核酸内切酶A、4B、5C、6D、718.II类限制酶反应中必须添加的阳离子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+19.下列含有内含子的生物是A、青霉B、放线菌C、蓝藻D、大肠杆菌20.用来鉴定DNA的技术是：A、Northern杂交B、Western杂交C、亲和层析D、Southern杂交21.基因工程的操作程序可简单地概括为A、载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B、分、切、接、转、筛C、将重组体导人宿主细胞，筛出含目的基因的阳性株D、将载体和目的基因接合成重组体22.根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针，可从DNA文库中筛选到相应的基因。23.II型限制酶识别位点一般长度为______个核苷酸对。24._________是自然界存在的植物基因工程的天然载体。25.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段。26.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。27.DNA片段之间的连接方式有哪些？28.基因工程最知名的也是饱受争议的应用之一是_____________。29.一种间歇的培养方式，除了进气、排气和补加酸碱调节pH外，在培养过程中与外界没有其他的物料交换。这种培养方式是A、补料分批培养B、连续培养C、透析培养D、分批培养30._________是指以精子为载体，通过动物受精过程将外源基因导入胚胎，产生转基因动物。第1卷参考答案一.参考题库1.正确答案:D2.正确答案:D3.正确答案:错误4.正确答案:白5.正确答案:B6.正确答案:中盐7.正确答案:盐离子浓度不对，温度不对，甘油浓度过高。8.正确答案:D9.正确答案:C10.正确答案:(1)载体易自身环化；(2)若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆；(3)难插入特定的基因；(4)再者就是大片段DNA的重组率较低，即使用碱性磷酸酶处理了载体，防止了载体的自身环化，载体也有成环的倾向；(5)用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难。11.正确答案:农杆菌介导12.正确答案:mRNA检测13.正确答案:转化医学14.正确答案:B15.正确答案:C16.正确答案:A17.正确答案:A18.正确答案:C19.正确答案:A20.正确答案:D21.正确答案:B22.正确答案:正确23.正确答案:2018/4/624.正确答案:Ti质粒25.正确答案:枯草杆菌蛋白酶26.正确答案:错误27.正确答案:具黏性末端的DNA片段之间的连接、具平末端DNA片段之间的连接、DNA片段末端修饰后进行连接、DNA片段加连杆（linker）后的连接。28.正确答案:转基因食品29.正确答案:D30.正确答案:精子载体法第2卷一.参考题库(共30题)1.常规PCR反应的循环次数一般为多少个周期A、40B、20C、30D、502.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。3.不是克隆质粒的是A、pSC101质粒B、pBR322质粒C、M13噬菌体颗粒D、pUCl84.什么是荧光定量PCR?5.何谓cDNA文库？6.用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。7.EcoRI切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要A、用CIP处理载体DNA防止自身环化B、进行琼脂糖凝胶电泳检测C、上述说法都正确D、用65℃处理5～10min使限制性内切核酸酶失活8._________让外源DNA沿着花粉管经过珠心进入尚未形成正常细胞壁的卵子、合子或早期胚胎细胞中，从而实现基因的转移。。9.klenow片段聚合酶具有哪些活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性10.Southern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体11.连接反应中，哪一种组分的作用是激活连接酶反应A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT12.下列用于Southern印迹转移的是：A、首先用限制性内切酶处理DNAB、酶切片段经琼脂糖电泳C、将DNA进行碱变性D、将DNA转移至硝酸纤维素膜E、硝酸纤维素膜经80℃真空干燥2-3小时13.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+114.能防止载体自连的酶是A、T4噬菌体DNA连接酶B、逆转录酶C、碱性磷酸酶D、末端脱氧核苷酸转移酶15.首例细胞基因治疗方案是对哪一种病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、重症联合免疫缺陷16.PCR技术是_________的缩写。17.限制性核酸内切酶和甲基化酶一起称为限制-修饰系统。18.常用载体质粒的本质是_________。19.______________也叫做依赖于RNA的DNA聚合酶或RNA指导的DNA聚合酶。20.任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。21.最早建立成功的转基因哺乳动物是_________。22.试述免疫共沉淀技术的原理？23.AIDS是由哪种病毒引起的全身性传染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV24.接合质粒25.最早被研制成功的两个基因工程激素药物是______________和生长激素。26.基因工程中常用的DNA聚合酶有哪些？27.cDNA文库的特点是什么？28.关于cDNA的最正确的说法是A、同mRNA互补的单链DNAB、同mRNA互补的双链DNAC、以mRNA为模板合成的双链DNAD、以上都正确

29.构建重组子时中不需要A、基因载体B、DNA连接酶C、核酶D、限制酶30.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。第2卷参考答案一.参考题库1.正确答案:B2.正确答案:（1）独立复制；（2）有选择标记；（3）有独特的酶切位点；（4）能转化但不扩散。3.正确答案:C4.正确答案:是一种利用外参或者内参为标准，在PCR体系中加入荧光信号强度与DNA数目相关的荧光物质，并通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时变化检测来实现对起始模板定量及定性的分析工作。5.正确答案:指某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。6.正确答案:原因是：HindⅢ的切点在A基因内。7.正确答案:A8.正确答案:花粉管导入法9.正确答案:B,D10.正确答案:A11.正确答案:B12.正确答案:A,B,C,D,E13.正确答案:B14.正确答案:C15.正确答案:D16.正确答案:聚合酶链式反应17.正确答案:正确18.正确答案:DNA分子19.正确答案:逆转录酶20.正确答案:错误21.正确答案:转基因小鼠22.正确答案:以抗体和抗原之间的相互作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。23.正确答案:C24.正确答案:指含有nic/born基因，能自我转移的质粒。25.正确答案:胰岛素26.正确答案:大肠杆菌DNA聚合酶；Klenow大片段酶；T7DNA聚合酶；T4DNA聚合酶；修饰过的T7DNA聚合酶；逆转录酶；TaqDNA聚合酶。27.正确答案:基因特异性、器官特异性、代谢或发育特异性、不均匀性、各cDNA均可获得表达。28.正确答案:C29.正确答案:A30.正确答案:错误第3卷一.参考题库(共30题)1.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。2.Ptrp表示（）A、噬菌体启动子B、色氨酸启动子C、乳糖和色氨酸复合启动子D、乳糖启动子3.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？4.用载体制作转基因植物时，最常用的载体是下列哪种质粒。A、pBR322质粒B、pSCl01质粒C、农杆菌Ti质粒D、pUC质粒5.限制性核酸内切酶在基因工程中有何作用？6.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫做A、基因文库B、基因库C、基因组文库D、cDNA文库7.隐性质粒8.用于基因治疗的基因不需要满足A、外源基因能在靶细胞中长期稳定存留B、导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害C、基因需要大量表达才能改善症状D、外源基因可有效导入靶细胞9.克隆即无性繁殖的意思，通过克隆可以在无性的条件下获得遗传结构和表型完全相同的一群个体。10.写出分子克隆的载体应具备的条件？11.基因工程又叫A、分子克隆B、基因克隆C、遗传育种D、遗传工程E、重组DNA技术12.根据外源DNA片段的来源不同，可将基因文库分为：基因组DNA文库和cDNA文库。13.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃14.PCR反应中的复性温度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃15.基因工程诞生的三大理论基础是什么？16.有关基因工程的叙述正确的是A、限制性内切酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可以作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料17.cDNA合成中所涉及的三种工具酶：IT4-DNA连接酶IIKlenow聚合酶IIIS1核酸酶IVBal31核酸酶V逆转录酶A、I+II+IIIB、II+III+IVC、II+III+VD、III+IV+V18.对DNA变性描述正确的是：A、包括DNA双螺旋的解链B、可以由低温产生C、是可逆的D、是磷酸二酯键的断裂E、包括氢键的断裂19.诱导型启动子20.________________包括基因组文库和cDNA文库。21.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。22.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中不大恰当的是A、这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶B、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰C、不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统D、由作用于同一DNA序列的两种酶构成23.一般来说，完全切割质粒或病毒DNA，要比切割线状DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。24.按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类：严紧控制型质粒和_____________。25.说明SangerDNA测序法的原理。26.PCR反应中常用的酶是______。27.在长模板链的指导下，引物延伸合成长的DNA互补链时应选用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大肠杆菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶28.基因重组的载体必须具备下列哪些特点：A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制B、插入外源DNA后也不影响自身的复制C、易于进入受体细胞D、通过自身的酶系在受体细胞中复制E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定29.要对一双链的DNA分子进行3’端标记，可用A、DNA聚合酶IB、T4DNA聚合酶C、T7DNA聚合酶D、Klenow酶30.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于_______。第3卷参考答案一.参考题库1.正确答案:简并引物PCR2.正确答案:B3.正确答案:GATATC；AAATTT；因为它们是回文序列。4.正确答案:C5.正确答案:扮演了如裁缝的“剪刀”的角色，它使研究人员可以按照预期目标将核酸分子切割开来，获取所需要的核酸序列片段。6.正确答