《医学细胞生物学》实验教学大纲（供四年制本科生物工程专业使用）

PAGE《医学细胞生物学》实验教学大纲（供四年制本科生物工程专业使用）Ⅰ前言医学细胞生物学是一门实验操作性极强的学科，实验教学不仅是此门课程教学工作的重要组成部分，也直接关系到学生的动手能力、综合素质。通过实验课的学习，加深理解，培养兴趣，验证理论，从而使学生学到的知识更为巩固。通过亲自动手操作，使学生在基本操作技能方面获得较全面的训练和提高；培养学生认真观察、积极思考、善于分析问题和解决问题的能力；培养诚实记录的科学品德，严肃认真的科学态度和求实创新的科学精神。本大纲适用于四年制本科生物工程专业使用，将大纲使用中有关问题说明如下：一为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解，教学内容与教学要求对应，并统一标示（核心内容及知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示），便于学生学习重点知识。二教师在保证教学大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，坚守重点内容和介绍一般内容。三总教学参考学时为20学时。四教材：《医学细胞生物学实验指导》，遵义医学院生物学教研室自编。Ⅱ正文实验一兔红细胞膜通透性的实验观察一教学目的训练学生自己动手，观察血细胞在各种液体环境（各种等渗溶液）中是否发生融血现象，据此判断细胞膜允许什么物质透过，不允许什么物质透过，以此理解细胞膜对不同性质和不同大小分子量的物质的通透性；启发学生根据教师提供的药品、试剂自行设计实验，以提高对本课程的学习兴趣和实验动手能力。二教学要求1掌握细胞膜对不同性质和不同大小分子量物质的通透性；掌握相关的操作技能，重点掌握显微镜的使用。2熟悉相关概念及本次实验的原理和方法；能自行设计相关的实验方法。3了解设计相关实验的原则。三教学内容1显微镜的使用2实验原理3实验步骤4根据教师提供的药品、试剂，自行设计实验，写出实验方案。实验二细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示细胞内DNA和RNA的显示一教学目的通过训练学生自己动手处死动物、制作血涂片、染色、洗涤、晾干、镜检等常规细胞生物学操作，培养学生的基本操作能力，理解细胞化学法的基本原理，掌握酸性蛋白和碱性蛋白、DNA和RNA在细胞中的分布情况。二教学要求（一）掌握酸性蛋白和碱性蛋白在细胞内的分布情况（二）掌握DNA和RNA在细胞内的分布情况（三）了解酸性蛋白和碱性蛋白显色反应的一般原理和方法（四）了解DNA和RNA显色反应的一般原理和方法三教学内容（一）细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示实验原理实验步骤：1取材和涂片：处死动物的规范操作方法2固定方法3三氯醋酸处理方法及意义4浸染的规范操作方法（二）细胞内DNA和RNA的显示：实验原理实验步骤：1取材和固定方法2染色的规范操作方法3冲洗方法4镜检方法实验三活细胞与死细胞的区别-小鼠活精子与死精子的鉴别细胞核的分离与鉴定一教学目的通过本次实验使学生掌握实验的基本技能,训练学生自己动手处死和解剖实验动物小鼠，制备精子悬液，染色、镜检观察，判断精子死活状态，掌握活细胞与死细胞的鉴别方法；学习分级离心技术，掌握细胞核的分离过程及鉴定方法，学会使用离心机和匀浆器、对细胞化学方法和分级离心技术的综合应用有进一步的认识。二教学要求（一）掌握小鼠的处死和解剖方法、活细胞与死细胞的鉴别方法、分离细胞核的原理，掌握离心机和匀浆器的使用方法（二）熟悉细胞核的鉴定方法（三）了解细胞核的分离过程三教学内容（一）活细胞与死细胞的区别-小鼠活精子与死精子的鉴别实验原理实验步骤：1小鼠的抓取和颈椎脱臼法处死，解剖。2精子悬液制备、染色、镜检观察。（二）细胞核的分离与鉴定实验原理实验步骤：1处死动物2取肝脏组织、洗涤3匀浆的规范操作方法4离心5染色6洗涤7镜检实验四动物染色体标本的制备与观察线粒体的活体染色与观察一教学目的通过本次实验使学生掌握实验的基本技能，掌握动物骨髓细胞染色体标本的制备技术，了解小白鼠染色体的形态特征及数目；掌握线粒体的活体染色技术，了解线粒体在细胞内的分布。二教学要求（一）掌握动物骨髓细胞染色体标本的制备技术（二）掌握线粒体的活体染色技术（三）了解小白鼠染色体的形态特征及数目（四）了解秋水仙素处理的意义（五）了解线粒体在细胞内的分布三教学内容（一）实验原理（二）实验步骤1了解秋水仙素处理的意义2取股骨的正确方法3收集骨髓细胞的正确方法和低渗处理的方法4固定和离心5制备骨髓细胞悬液的方法6滴片的方法7染色8镜检：正确判断１个细胞的染色体数目的方法、认识其形态（三）线粒体的活体染色与观察：实验原理实验步骤：1滴染的规范操作方法2口腔黏膜上皮细胞活体取材方法3制片镜检实验五细胞融合一教学目的通过本次实验使学生掌握实验的基本技能。掌握细胞融合的概念、融合细胞的识别及细胞融合率的计算；了解聚乙二醇（PEG）诱导体外细胞融合的基本原理。二教学要求（一）掌握细胞融合的概念、融合细胞的识别及细胞融合率的计算（二）了解聚乙二醇（PEG）诱导体外细胞融合的基本原理及应用领域三教学内容（一）细胞融合：实验原理实验步骤：1制备鸡红细胞储备液210％鸡红细胞悬液的制备方法3红细胞的洗涤与沉淀4PEG诱导细胞融合的方法5终止PEG的作用6收集细胞7滴片、染色8镜检、计数基本技能：1正确使用显微镜2培养学生在光学显微镜下区分细胞与非细胞的能力，认识不同种类细胞的形态结构特征3要求学生明白什么情况下才能看到细胞和细胞结构4正确处死动物的方法5正确的解剖和取材方法6正确的制片方法7线粒体活体取材和染色的方法8规范的离心机、组织匀浆使用方法Ⅲ教学组织与方法一实施机构：由珠海校区生物工程系生物化学与细胞生物学教研室执行。二组织内容：组织进行教案讲义审核、听理论课、实验教学观摩、试讲、集体教学备课、教学方法研究、教学手段改进等。三教学方法：1．实验教学：采用启发式、讨论式等教学方式，辅助传统教学手段。2．教学地点：实验教学在行政楼103,105实验室完成，实验教学的指导教师由生物化学与分子细胞生物学教研室承担。3．辅导形式：课堂提问、答疑、讨论、小结、批改试验报告、试验报告讲评等形式结合。四考核办法：实验课成绩实习形成性评价：包括出勤、纪律卫生、课题表现、实验操作考核、问题讨论及实验报告成绩。Ⅳ教学时数分配表实验内容教学时数实验类型实验一兔红细胞膜通透