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文档简介
色谱柱的结构及操作任务二一、色谱柱的结构1.色谱柱材料玻璃、有机玻璃、金属和高分子塑料2.色谱柱的尺寸特性色谱柱的高度与其内径的比值,一般要求是10~30二、典型的色谱柱常见的色谱柱有玻璃柱、夹套柱、反转柱等。自动液相色谱制备仪高效液相工作流程高效液相色谱仪三、色谱分离工艺流程1.工艺流程
料液和洗脱剂经过滤后用恒流泵从色谱柱底部输入,流动相流过固定相,从柱顶部流出,组分留在固定相中,经洗脱剂洗脱后,洗脱液从柱顶部流出。料液、洗脱液的流量可根据转子流量计的读数进行调节,洗脱过程的起始和终了通过检出仪读数确定。2.色谱柱的操作
色谱柱的操作可分为装柱、上样、洗脱和再生四个环节。其中,进行再生操作时,需要按固定相的组成情况采用相应的再生方法。不同固定相的再生方法可查阅相关文献资料。色谱分离法任务一一、色谱分离法1.色谱分离原理
利用各组分物理化学性质的差异,使各组分在固定相和流动相中的分布程度有差别,导致各组分移动速度不同而被分离的过程,称为色谱分离法,又叫层析分离法。2.色谱分离固定相
由固体颗粒组成的系统称为固定相,固定相不流动;由气体或液体组成的系统称为流动相,流动相可以流动。将固定相装在一个容器中,使流动相流过固定相的同时就可将杂质分离。3.色谱分离流动相
气体流动相多数情况下采用氮气作载体,样品液则通过高温汽化成复杂混合气体随载气流动。液体流动相分为水相和有机相两大类。水相即是水溶液作流动相,有机相则是用有机溶剂作流动相。二、色谱分离法分类1.按流动相状态流动相是气体的叫气相色谱,是液体的叫液相色谱。2.按作用原理划分(1)吸附色谱(2)分配色谱(3)离子交换色谱(4)凝胶色谱(5)亲和色谱3.按流动相流速划分
(1)低压色谱:采用低压输送泵输送流动相,流动相压力小于0.3MPa,在色谱柱中流速缓慢。低压色谱主要用于常规药品的分离纯化。(2)高效液相色谱:采用柱塞式往复泵输送流动相,流动相压力高达
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