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文档简介

单元八工业菌种扩大培养技术

项目二种子质量的控制一、影响种子质量的因素及控制培养基培养条件种龄接种量1.培养基营养成分适合种子培养的需要选择有利于孢子发芽和菌体生长的培养基；营养上要易于被菌体直接吸收和利用；营养成分要适当丰富和完全，氮源和维生素含量要高营养成分要尽可能与发酵培养基相近。2.培养条件（1）温度（2）通气量在种子罐中培养的种子除保证供给易被利用的培养基外，有足够的通气量可以提高种子质量。3.种龄种龄：是指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。通常种龄是以处于生命力旺盛的对数生长期，菌体量还未达到最大值时的培养时间较为合适。不同菌种或同一菌种工艺条件不同，种龄是不一样的，一般需经过多种实验来确定。4.接种量接种量：接入的种子液体积和接种后整个发酵液体积的比例。二、种子质量的控制措施必须保证生产菌种的稳定性提供种子培养的适宜环境条件，保证无杂菌侵入四.种子质量的控制措施1.

菌种稳定性的检查少量菌种--无菌生理盐水--递增稀释--平板划线培养。挑出形态整齐，孢子丰满的菌落进行摇瓶试验，测定其生产能力。

2.无菌检查种子液平板划线、斜面培养用肉眼观察是否有异常菌落、异常现象及镜检是否有杂菌。三、种子质量标准1.细胞或菌体单细胞：菌体健壮、菌形一致、均匀整齐有的还要求有一定的排列或形态2.生化指标

种子液的糖、氮、磷的含量和pH变化。3.产物生成量在抗生素发酵中，产物生成量是考察种子质量的重要指标，因为种子液中产物生成量的多少间接反映种子的生产能力和成熟程度。4.酶活力种子液中某种酶的活力，与目的产物的产量有一定的关联。四、种子异常分析

菌种生长速度，过快或过慢菌丝结团菌丝粘壁种子扩大培养举例例一、谷氨酸生产的种子制备斜面菌种→一级种子培养→二级种子培养→发酵1、斜面(AS1.299)培养基：蛋白胨1%，牛肉膏1%，氯化钠0.5

琼脂2%，pH7.0-7.2培养基特点：有利于菌体的生长，原料比较精细培养条件：32℃，生长18-24小时生长斜面要求：生长良好，所使用斜面连续传代不超过3次2.一级种子（摇瓶）培养条件：于1000ml三角瓶中，装液200-250ml,32℃培养12小时。培养基：葡萄糖2%，尿素0.5%，玉米浆2.5%，

K2HPO40.1%培养基特点：有利于菌体的生长，所使用的原料已经基本接近于发酵培养基3.二级种子(种子罐)培养条件：在种子罐中培养（容积为发酵罐的1%），

32℃培养7-10个小时培养基：和一级种子相似，其中葡萄糖用水解糖代替，浓度为2.5%培养基的特点：长菌体，更接近于发酵培养基种子的

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