除草剂生物测定

第三章除草剂生物测定第一节除草剂的生物测定评估第二节除草剂的常用生物测定方法第三节除草剂的生物测定技术应用第一节除草剂生物测定的评估一除草剂评估的复杂性同一药剂对植物器官的非专一性不同药剂对植物器官的同一性不同剂量对植物作用效应不一样第一节除草剂的生物测定评估二除草剂生物测定的评估标准1种子萌发以试验植物的种子是否萌发作为评定除草剂活性的指标。黄瓜、高梁及燕麦均为种子萌发试验的常用植物材料。2植株反应2.1植株的局部反应主要选取反应特征比较明显的植株部位，如根长、茎长是否受到了明显的抑抑制。第一节除草剂的生物测定评估1种子萌发2植株反应

2.1植株的局部反应2.2整株植物的反应植株是否完全死亡，如未死亡则取植株的地上部或地下部的量取长度、或称取整株植物的鲜重或干重等。如果条件能作到相对一致，用鲜重表示较干重表示更能说明问题。第一节除草剂的生物测定评估二除草剂生物测定的评估标准1种子萌发2植株反应

3生理、生化反应根据植物进行光合作用时有CO2吸收和O2释放，可作为生物测定时的评价指标，尤其是在进行作用机制的研究时，更为准确。

如：利用测氧仪可观察的莎朴隆和朴草净对多变鱼腥藻的影响，通过观察每小时每mg叶绿素放出的毫摩尔氧量来评估光合活性的大小（umolO2/mg.h）第一节除草剂的生物测定评估二除草剂生物测定的评估标准1种子萌发2植株反应

3生理、生化反应4反应等级无论观察的是植株什么类型的反应，都可以用反应等级进行评估。具体的级别标准，则要根据试验目的拟定。

如对具生长抑制作用的除草剂实行反应等级评价时，就可以采用6级标准制：0级：同对照；1级：抑制生长25%以下；2级：抑制生长50%以下；3级：抑制生长75%以下；4级：抑制生长75%以上；5级：全部死亡；第三章除草剂生物测定第一节除草剂的生物测定评估第二节除草剂常用生物测定方法

一实验室测定二温室测定三田间测定第二节除草剂常用生物测定方法一实验室测定1种子萌发法10稗草胚轴法2小杯法11番茄水培法3高梁法12燕麦法4萝卜子叶法13浮萍法5黄瓜幼苗法14玉米法6黄瓜子叶园片法15园叶片漂浮法7小球藻法16再生苗测重法8小麦根长法17叶鞘滴注法9去胚乳小麦幼苗法一实验室测定1种子萌发法1.1（BTB法）溴麝香草酚蓝法

BTB为一种酸性呈黄色、中性（7.1）呈绿色、碱性呈蓝色的批示剂。种子发芽时会因呼吸作用而使CO2溶于水而生成H2CO3，而H2CO3又会进一步离解成H+

和HCO3-，使种子周围的环境pH下降，如果除草剂具有抑制呼吸的作用，那么，通过对BTB的颜色变化即可判断种子是否为活的。1种子萌发法1.1（BTB法）溴麝香草酚蓝法1.2(TTC法)氯化三苯四氮唑法

TTC能渗透进入种胚的活细胞内，并作为受体被脱氢辅酶（NADH2或NADPH2）上的氢还原，本来无色的TTC会变为红色的三苯基甲酯（TTF）。

NNC6H5NNHC6H5C6H5CC6H5CNN+C6H5

NNC6H5

TTC（无色）TTF(红色)1种子萌发法

2小杯法

以小杯作为测试工具，杯底放一园形滤纸片，加入一定量的除草剂溶液，再将稗草、油菜、水稻、小麦等敏感植物，盖上盖在生长箱内培养4-7d，其间要补足蒸馏水以减少蒸发。待症状明显时测量根长或鲜重。1种子萌发法2小杯法3高梁法

以高梁种子为试材，选取规格一致的磨口培养皿，装入洗净的黄沙、刮平使之与皿边相齐，每皿漫漫加入一定量的除草剂药液，以全皿黄沙正好浸透为宜，再将刚刚萌发出现幼根的高梁种子排列于沙表面（胚芽向上，幼根朝下），盖紧皿盖并将培养皿斜靠使之与平面成15℃角，以使根沿着皿盖生长。培养皿置于暗室（28±2℃）36-42h后取出，测量高梁幼根的长度。1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法本法测定具触杀性的除草剂较为合适。取红萝卜子种子洗净播种在垫有两层滤纸的培养皿内，暗室培养24-30h，从幼苗上切下子叶，再放入盛有以0.2M磷酸缓冲液配制的不同浓度除草剂药液的培养皿内，加盖后置于25±1℃

的恒温培养室内，辅以3000勒克斯的日光灯连续照光3天，然后按不同处理提取叶绿素A、B，与标准叶绿素A、B相比较求出抑制叶绿素含量50%的除草剂浓度。1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法5黄瓜幼苗法

精选黄瓜种子，直接放入含有待测除草剂药液的培养皿中，以蒸馏水为CK，放入26℃恒温暗室中培养96h，移出暗室测黄瓜幼苗的初生根和地上部长度。（适于丁酰胺类、2.4-滴、咪唑啉酮和磺酰脲类等除草剂活性）1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法5黄瓜幼苗法6黄瓜子叶园片法

此法用于测定光合作用抑制剂的活性较适宜。非光合作用抑制剂不敏感。以10微摩尔的克芜踪为对照，测定黄瓜子叶园片的电介质泄漏量（导电系数）来计算除草剂的活性。1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法5黄瓜幼苗法6黄瓜子叶园片法7小球藻法此法也是以测叶绿素含量来计算具光合作用和呼吸作用抑制特性的除草剂活性。小球藻易于进行室内人工培养，操作简便，测定周期短，比较灵敏、精确。1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法5黄瓜幼苗法6黄瓜子叶园片法7小球藻法8小麦根长法在培养皿内铺满一层小玻璃球，移入一定量的除草剂药液，放入露白的小麦种子，在20-25℃培养箱中培养5-7d，测量根长。1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法5黄瓜幼苗法6黄瓜子叶园片法7小球藻法工8小麦根长法9去胚乳小麦幼苗法

将饱满均匀的小麦种子浸泡2h，铺在放有湿滤纸的瓷盘中，于20

℃左右的恒温箱中催芽，待芽长2-3cm时，选高度一致的幼苗，轻轻取出，不要伤根，摘除胚乳，在清水中漂洗后，放入烧杯中，加入待测除草剂的不同浓度溶液，于21-26℃下培养7d，测株高、称鲜重。如将去胚乳小麦种在含有系列浓度的除草剂土壤中，可测定土壤中的除草剂含量、移动性及残效期。1种子萌发法2小杯法3高梁法4萝卜子叶法5黄瓜幼苗法6黄瓜子叶园片法7小球藻法工8小麦根长法9去胚乳小麦幼苗法

10稗草胚轴法此法适于测定氯乙酰胺类除草剂如甲草胺等。在烧杯中加入不同浓度的除草剂溶液，放入发芽整齐的稗草种子，再在种子同围撒些石英砂以防幼苗浮起，在28-30℃的恒温箱中培养，4天后测稗草胚轴长度。11番茄水栽法12燕麦法13浮萍法14玉米法15园叶片漂浮法16再生苗测重法17叶鞘滴注法取代脲类如绿麦隆；三氮苯类如阿特拉津；浮萍法、园叶片漂浮法均是对光合作用抑制剂的快速测定方法；玉米法测定嗪草