食品中成分的测定-蜂王浆中王浆酸的测定（食品检测技术课件）_第1页
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文档简介

原理01试剂及试剂配制02仪器03试验步骤04目录页计算05试样经乙醇处理，溶出10-HDA（10羟基-2-癸烯酸、王浆酸）并沉淀蛋白质，加入内标物后用乙醇定容，经离心或放置过夜，直接取上清液，过滤后进高效液相色谱仪，经色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性定量。1原理甲醇；无水乙醇；内标物：对羟基苯甲酸甲酯；10-HDA标准品；2.1试剂2.2试剂的配制2.2.110-HDA标准溶液：取含量99.0%以上，用浓硫酸的减压干燥器干燥24h后的10-HDA标准品约25.00mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入25mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每mL含10-HDA约1mg。2.2试剂的配制2.2.2内标溶液的配制:取已干燥过的对羟基苯甲酸甲酯325mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入500mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含内标物0.65mg。2.2试剂的配制2.2.3流动相配制：甲醇+0.03mol/L盐酸+水=55+10+35对流动相的组成溶液甲醇、0.03mol/L盐酸和水进行过滤，过滤后的溶液装入储液瓶中进行超声脱气，脱气后放入高效液相色谱仪对应的通道中。3仪器1高效液相色谱仪：配有紫外检测器；2色谱柱：填充无定形硅胶C18键合相，5μm或10μm；3超声波清洗仪；4旋涡混匀器；5分析天平：感量0.0001g。4.1试样处理试样解冻至室温后用玻璃棒搅匀，取约0.5g样品，置于已称定的50mL容量瓶中，精密称定，加0.03mol/L盐酸1mL和水2mL，置旋涡混匀器上混合使样品溶解，加入无水乙醇30mL，边加入边轻轻摇动，再精密加入内标溶液10mL，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，立即置超声波浴中超声15min，取出，在3000r/min离心10min后测定。4.2色谱条件测定波长：210nm；柱温度：35℃；流动相流速：1mL/min。4.3校正因子测定

精密吸取10-HDA标准溶液0.5，1，2，3，4，5mL至10mL容量瓶中。精密加入内标溶液2mL，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取此溶液2μL。注入色谱仪，用峰面积比值计算，应呈线性，求出校正因子F。F计算4.4试样测定吸取试样溶液4μL，注入色谱仪，按“内标法”定量。5计算公式X——蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸含量，%；F——校正因子；Ai——试样中被测组分峰面积；

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