糖尿病抗体三项课件

糖尿病自身抗体的检测糖尿病自身抗体的检测1概述1型糖尿病：自身免疫系统错误地攻击和损伤胰岛β细胞，使胰岛素的合成和分泌减少或完全缺乏的自身免疫性疾病2型糖尿病：以胰岛素抵抗为主伴胰岛素分泌不足特发型糖尿病和妊娠糖尿病概述21、抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD)2、抗胰岛细胞抗体(ICA)3、抗胰岛素IgG抗体(IAA)意义：自身免疫性糖尿病的诊断依据，I-DM的协助诊断、预报和高危人群的预防。1、抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD)3抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD)1.检测原理（ELISA）微孔板上包被纯化GAD抗原，与患者血清标本中的GAD特异IgG抗体发生反应，形成GAD-抗体复合物，从微孔中洗掉过量的或未结合的血清蛋白，然后加入酶标抗体，与之前形成的GAD-抗体复合物结合，洗掉过量的未反应的酶偶联物，加上底物显色，用酶标仪比色，颜色的强弱代表了患者标本中GAD抗体的浓度。抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD)1.检测原理（ELISA）42.检验结果的判定以3个标准品（浓度分别为0.4U/ml,1.1U/ml,1.9U/ml）的浓度和测定的OD值作标准曲线，通过此曲线把患者标本的OD值转化为浓度。2.检验结果的判定53.结果解释样本GAD值判定如下：GAD值

结果<1.00阴性>1.05阳性1.00-1.05临界值3.结果解释6阳性结果说明患者体内有GAD抗体。阴性结果说明患者血样中不含或低至测不到GAD抗体的水平。临界值时，样本应当重测，如重测阴性，则结果为阴性；如重测阳性，则结果为阳性；如仍为临界值，则应当重新抽血测定。注意：尽管高浓度GAD可以产生高的OD值，但本方法只是半定量测试。阳性结果说明患者体内有GAD抗体。74.检测方法的局限性本实验室每次测定过程中带一个标准品，浓度是1.1U/ml，测定结果随时间推移会降低，可能会对患者结果有一定影响。纯手工操作，会有差异（加样、洗板等）。底物液暴光4.检测方法的局限性8抗胰岛细胞抗体(ICA)1.检测原理（ELISA）微孔板上包被纯化胰岛细胞抗原，与患者血清标本中的抗体发生反应，形成复合物，从微孔中洗掉过量的或未结合的血清蛋白，然后加入特异的酶标抗体，与之前形成的复合物结合，洗掉过量的未反应的酶偶联物，加上底物显色，用酶标仪比色，颜色的强弱与标本中的ICA浓度成正比。抗胰岛细胞抗体(ICA)1.检测原理（ELISA）92.检验结果的判定每次实验必须将阳性质控、阴性质控、参考质控和未知样本同时测定，以保证结果的有效性。比率值：样本OD值S除以参考质控OD值R2.检验结果的判定103.结果解释ICA比率值

结果<0.95阴性>1.05阳性0.95-1.05不确定（临界）3.结果解释11样本比率值<0.95，表示低水平ICA抗体样本比率值>1.05，表示高水平ICA抗体比率值在0.95-1.05之间被认为不确定，建议重新测定注意:作为有效的实验，N<0.95,P>1.05

高低度的ICA可以产生高的OD值，但是本方法只是定性试验。样本比率值<0.95，表示低水平ICA抗体124.检测方法的局限性随时间推移，参考质控的值也会有变化纯手工操作，会有差异（加样、洗板等）。底物液暴光4.检测方法的局限性13抗胰岛素IgG抗体(IAA)IAA除了微孔中包被的物质（人胰岛素）与ICA不同，其他（检验原理、结果判读与解释、影响因素等）都与ICA相同。抗胰岛素IgG抗体(IAA)IAA除了微孔中包被的物质（人胰14临床应用IAA在50%的1型糖尿病患者血清中可检出，它不是糖尿病的特异性抗体，在胰岛素自身免疫综合征,甲状腺疾病也可出现，甚至有些正常人也是阳性。

单纯IAA阳性对发展为1型糖尿病的预测价值是较低的，单纯的IAA阳性不能作为1型糖尿病的标志，仅表明有发展为糖尿病的自身免疫倾向。临床应用IAA在50%的1型糖尿病患者血清中可检出，它15临床应用ICA对所有的胰岛细胞均起直接作用，在70%-90%的1型糖尿病患者血清中可检出，正常人仅0.5%可出现。在新诊断出1型糖尿病的患者中阳性率为65%～85%，随着病程延长，阳性率逐渐降低，诊断后2～5年阳性率降至20%。ICA阳性患者随病程进展可变成ICA阴性，这种阴性提示已经出现胰岛细胞功能的衰竭。

临床应用ICA对所有的胰岛细胞均起直接作用，在70%16临床应用若患者IAA和ICA同时阳性，其发展为1型糖尿病的风险比单独存在任何一种抗体的个体显著增高。临床应用若患者IAA和ICA同时阳性，其发展为1型糖17临床应用GAD可作为1型糖尿病预测的指标，在初发1型糖尿病患者中，GAD的检出率很高，一般为60%～80%，最多的可达95%，而2型糖尿病和正常人中的检出率很低(1%～2%)临床应用GAD可作为1型糖尿病预测的指标，在初发18临床应用

GAD在患者出现1型糖尿病临床表现前数年甚至十余年即可出现，是最早出现的自身抗体。目前认为GAD是破坏胰岛细胞，引起1型糖尿病的关键抗原，并且极可能是1型糖尿病自身免疫的始动靶抗原。临床应用GAD在患者出现1型糖尿病临床表现前数年19临床应用

GAD、ICA和IAA三种抗体是1型糖尿病自然病程中β细胞功能损伤的一个预测指标，也是1型糖尿病与2型糖尿病相鉴别的重要免疫学标志，对糖尿病分型和指导治疗有重要意义。临床应用GAD、ICA和IAA三种抗体是1型糖尿病自20临床应用大量研究表明,一旦检出GAD,大多伴有ICA、IAA阳性。单独ICA、IAA检测阳性率低于GAD,若三者联合检测,可大大提高1型糖尿病的检出率,对于筛选高危人群可获得很高的满意度。国内外多篇统计资料显示：3种自身抗体联合检测的敏感性、阳性预报率和符合率均显著高于单项或双项测定，避免漏诊。临床应用21小结