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文档简介
临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查第1页临床常见免疫学检验血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)测定血清补体测定细胞免疫检测感染免疫检测本身免疫检验肝炎病毒标志物检测肿瘤标志物检测临床常用免疫学检查第2页血清免疫球蛋白分类Ig通常是指含有抗体活性和(或)抗体样结构球蛋白。应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。IgG:含量最多或最主要Ig(75%),唯一能够经过胎盘Ig。主要由脾脏和淋巴结中浆细胞合成与分泌。IgA:约占10%,SIgA在局部免疫中起主要作用。主要由肠系淋巴组织中浆细胞产生。临床常用免疫学检查第3页血清免疫球蛋白IgM:分子量最大,由5个IgM单体经过J链连接。是最早出现Ig,是抗原刺激后最早出现抗体,其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高500~1000倍。测定方法:单向免疫扩散法(RID)或免疫比浊法。临床常用免疫学检查第4页血清免疫球蛋白
测定参考值参考值:
IgG:7.6~16.6g/L
(RID法)IgA:710~3350mg/LIgM:0.48~2.12g/L
临床常用免疫学检查第5页.临床意义免疫球蛋白增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和一些本身免疫性疾病,如SLE、类风湿关节炎等。单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。
临床常用免疫学检查第6页
免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺点病、取得性免疫缺点病、联合免疫缺点病及长久使用免疫抑制剂病人。血清IgD测定免疫扩散法:0~62mg/L
已发觉有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗“O”抗体等均属IgD,但活性甚低。
临床常用免疫学检查第7页
血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层浆细胞分泌,为亲细胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上FceR结合,产生I型变态反应。
ELASA:0.1~0.9mg/L
临床意义:
1.I型变态反应
2.IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等
3.慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。临床常用免疫学检查第8页
是一个单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生IgG分子或片段,普通不含有抗体活性。参考值:蛋白电泳法,免疫电泳法:阴性意义:1.多发性骨髓瘤(MM),占35%~65%,其中IgG型占60%左右;IgA型占20%左右;轻链型占15%左右;IgD、IgE型罕见。2.巨球蛋白血症。3.重链病(HCDs)。4.半分子病。5.恶性淋巴瘤。6.良性M蛋白血症。血清M蛋白测定
(Mprotein,monoclonalimmunoglobulins)临床常用免疫学检查第9页血清补体测定补体是含有酶活性一个不耐热球蛋白,分3组:9种补体成份(C1~C9);B、D、P、H、I因子;补体调整蛋白,如C1抑制物、C4结合蛋白、促衰变因子等。总补体溶血活性(CH50)测定参考值试管法:50000~100000U/L
意义:增高见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。降低见于急性肾小球肾炎、本身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。临床常用免疫学检查第10页
血清补体测定血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典激活路径与旁路激活路径中发挥主要作用。
参考值:免疫比浊法0.85~1.70g/L
增高作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。降低补体合成能力降低;合成原料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。临床常用免疫学检查第11页
血清补体测定血清C4测定:由肝脏、吞噬细胞合成,参加补体经典激活路径。参考值:单向免疫扩散法:0.197+/-0.109/L。临床意义基础与C3相同,降低还见于多发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性C4缺乏症等。临床常用免疫学检查第12页血清补体测定补体C1q测定参考值:0.179±0.04g/L临床意义:与C3相同,降低还见于活动性混合性结缔组织病、重度营养不良、肾病综合征、重度联合免疫缺点病等。B因子测定-C3激活剂前体临床常用免疫学检查第13页细胞免疫检验淋巴细胞表面标志物检测㈠T淋巴细胞表面标志物检测:E玫瑰花形成试验、免疫荧光法(IFA)、荧光激活细胞分类法(FACS)、免疫金银法以及免疫酶染色法等。E玫瑰花形成试验SRBC+CD2参考值Et64.4%±6.7%免疫荧光法临床常用免疫学检查第14页T淋巴细胞表面标志物检测意义可用于T淋巴细胞计数,T淋巴细胞亚群分类以及判断T淋巴细胞活化程度。CD3
分子表示于全部成熟T淋巴细胞表面,是总T淋巴细胞主要标志,CD3+常见于甲状腺功效亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。CD3+主要见于免疫缺点病,如AIDS、先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺点病等。亦可见于恶性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。临床常用免疫学检查第15页T细胞分化抗原测定白细胞分化抗原(clusterdifferentiation,CD)CD3代表总T淋巴细胞,CD4是辅助、诱导T细胞标志,CD8是抑制、杀伤性T细胞标志。应用单抗和荧光标识二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD百分率。参考值:免疫荧光法(IFA):CD3为63.1%±10.8%;CD4
为42.8%±9.5%;CD819.6%±5.9%;CD4/CD8为(2.2±0.7)/1。流式细胞术:CD3
61%~85%;CD428%~58%;CD819%~48%;CD4/CD80.9~2.0/1。临床常用免疫学检查第16页T细胞分化抗原测定临床意义CD3CD4+T细胞下降常见于一些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等;升高见于类风湿性关节炎活动期。CD8+T细胞下降
常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合征、重症肌无力、DM(II型)以及膜型肾小球肾炎等;升高见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢性乙肝。CD4+/CD8+比值下降,常见于AIDS、瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。也见于个别感染性疾病如传染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等;增高见于类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。临床常用免疫学检查第17页淋巴细胞功效检测T细胞转化试验形态学法:T细胞转化率60.1%±7.6%3H-TdR掺入法:培养淋巴细胞用液体闪乐烁仪测量,统计每分钟脉冲数(cpm)。SI(刺激指数)=PHA刺激管cpm均值/对照管cpm均值SI>2为有意义,<2为淋巴细胞转化率降低。临床常用免疫学检查第18页T细胞转化试验临床意义判断机体细胞免疫功效水平,降低常见于细胞免疫缺点或细胞免疫功效低下者,如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬化等。增高常见于Down综合征。预计疾病疗效与预后临床常用免疫学检查第19页B淋巴细胞表面标志物检测
表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等表面受体:B细胞抗原受体(BCR)、细胞因子受体(CKR)、补体受体(CR)与Fc受体等。B细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B细胞特征性表面标志。将荧光标识抗不一样类型Ig单克隆抗体进行检测,可将B细胞分为SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。临床常用免疫学检查第20页B淋巴细胞表面标志物检测
参考值:免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标志细胞百分数表示)SmIg+细胞总数:均值21%(16%~28%)SmIgG+细胞:均值7.1%(4%~13%)SmIgM+细胞:均值8.9%(7%~13%)SmIgA+细胞:均值2.2%(1%~4%)SmIgD+细胞:均值6.2%(5%~8%)SmIgE+细胞:均值0.9%(0%~1.5%)临床常用免疫学检查第21页B淋巴细胞表面标志物检测
临床意义SmIg+细胞增高
:常与B细胞恶性增殖相关,主要见于慢淋、毛细胞白血病以及巨球蛋白血症等。SmIg+细胞减低:主要与体液免疫缺点相关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严重联合免疫缺点病等。临床常用免疫学检查第22页B淋巴细胞表面标志物检测B细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22测定参考值:FACS:CD19+细胞11.74%±3.73%临床意义CD19为全部B细胞共有表面标志,增高见于B细胞系统恶性种瘤,减低见于体液免疫缺点病。临床常用免疫学检查第23页NK细胞活性测定NK细胞能直接杀伤效应细胞,含有抗肿瘤、抗感染和和免疫调整等功效,亦参加移植物排斥反应、本身免疫病和超敏反应发生。LDH释放法
参考值
细胞毒指数:27.5%~52.5%51Cr释放法参考值NK细胞活性(自然杀伤率):47.6%~76.8%临床常用免疫学检查第24页NK细胞活性测定临床意义活性升高常见于病毒感染早期,Down综合征,接收器官移植、骨髓移植患者等及免疫增强剂治疗患者。活性降低常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺点病,AIDS和免疫抑制剂治疗者等。肿瘤疗效观察及预后评价免疫调整功效
NK细胞可释放INF-γ、INF-β和GM-CSF等细胞因子。临床常用免疫学检查第25页乙型肝炎病毒血清标识物检测HBeAg,Anti-HBe或抗HbeHBeAg,Anti-HBc或抗Hbc
测定方法:ELASA,RIAHBsAg,Anti-HBs或抗HBs临床常用免疫学检查第26页乙型肝炎病毒血清标识物检测HBsAg(+)表示肝中有HBV见于:乙型肝炎潜伏期和急性期。慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化,肝癌。慢性HBsAg携带者。
Anti-HBs或抗HBs:中和抗体临床常用免疫学检查第27页乙型肝炎病毒血清标识物检测HBeAg:有乙型肝炎,是病毒复制活跃,传染性强指标;连续阳性易转变为慢性肝炎;HBeAg+和HBsAg+可垂直传输。Anti-HBe或抗Hbe:出现于急性感染恢复期,连续时间较长。意味着HBV个别被去除或抑制,复制降低,传染性降低。临床常用免疫学检查第28页
乙型肝炎病毒血清标识物Anti-HBc或抗HBc:反应肝细胞受到HBV侵害一个指标,主要包含IgM、IgG、IgA。抗HBcIgM阳性是最早出现特异性抗体,是诊疗急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃指标,并提醒病人血液有强传染性。也见于慢性活动性肝炎。抗HBcIgG其阳性滴度高,表明患有乙型肝炎,指正在感染;低滴度为既往感染指标,体内时间长。临床常用免疫学检查第29页乙型肝炎病毒血清标识物HBV-DNA定性和定量测定:当前定量测定范围为102~108
拷贝/ml。与血清免疫学结果综合评价HBsAg和Anti-HBsHBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc5项标志物改变和联合检测临床意义临床常用免疫学检查第30页丙型肝炎病毒标志物检测抗-HCV(ELISA)抗-HCVIgM阳性常见于急性HCV感染,是诊疗丙肝早期敏感指标;是HCV活动指标,是判断HCV传染性指标。
抗-HCVIgGHCV-RNA测定测定方法逆转录巢式PCR法,荧光定量PCR法(第三代试剂抗原包含C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易发生变异,抗-HCV阳转时间差异较大)临床常用免疫学检查第31页血清抗链球菌溶血素“O”测定参考值:乳胶凝集法(LAT):<500U
意义:增高常见于A组溶血链球菌感染相关疾病,如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。ASO在A组溶血链球菌感染后1周开始升高,4~6周达高峰,可连续几个月或几年。假阳性与假阴性临床常用免疫学检查第32页伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定肥达(Widal)反应参考值O凝集价<1:80伤寒H凝集价<1:160副伤寒A、B、C凝集价<1:80伤寒、副伤寒沙门菌抗体IgM测定参考值ELASA法:阴性或滴度<1:20。临床常用免疫学检查第33页伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定临床意义O升高,H正常H正常,O升高O升高,H升高O升高,A、B、C任何一项升高临床常用免疫学检查第34页
血清C-反应蛋白(CRP)测定C-反应蛋白是一个由肝脏合成,能与肺炎双球菌C多糖体起反应急性时相反应蛋白,含有激活补体,促进吞噬和免疫调理作用。参考值:<8.2mg/L(免疫比浊法)意义组织损伤,如大手术,严重创伤,烧伤,心肌梗死等,发病后数小时快速增高,病情好转后又快速下降。又复升高提醒继发感染或深部静脉血栓形成。风湿热活动期,可达200mg/L以上。细菌性感染常显著升高,病毒性感染升高不显著或轻度升高。恶性肿瘤,器官移植后排斥反应,妊娠等可见显著升高可在发病后数小时快速增高,病情好转后又快速下降至正常。临床常用免疫学检查第35页肾综合征出血热病毒抗体检测参考值IFA,ELASA:阴性特异性IgM-感染后2~3天检出,7~10天达高峰。特异性IgG感染后两周出现,可连续多年。临床常用免疫学检查第36页艾滋病血清学检验检测抗HIV(I型或II型)是AIDS诊疗一个主要指标。抗原为HIV感染T细胞株病毒抗原(HLA-DR抗原污染可出现假阳性)。方法:初筛试验ELASA,乳胶凝集法,免疫印迹法,斑点免疫渗透法。确认试验可选取蛋白印迹试验(WB),
PCR法检验HIV病毒DNA。HIV抗原检测P24抗原(病毒衣壳蛋白,具群特异性)。
HIV核酸检测DNA-PCR;RNA-PCR临床常用免疫学检查第37页
梅毒血清学检验是由梅毒螺旋体梅毒亚种所致一个性传输疾病。梅毒螺旋体抗体检测:非密螺旋体抗原试验和密螺旋体抗原试验,前者为筛选试验和治疗效果监测,后者为确诊诊疗。暗视野显微镜检验梅毒螺旋体PCR检测临床常用免疫学检查第38页甲胎蛋白(AFP)测定参考值
CLIA,RIA,ELASA:血清<25μg/L临床意义原发性肝癌显著升高,AFP>300μg/L病毒性肝炎、肝硬化患者不一样程度AFP升高但常<300μg/L。生殖腺胚胎性肿瘤血清AFP升高妊娠小扁豆凝集素(LCA)结合型AFP≥25%提醒原发性肝癌。临床常用免疫学检查第39页本身抗体检验本身免疫性疾病(AID)AID-器官特异性和非器官特异性(抗原为细胞核或胞浆成份)及中间型。抗核抗体(ANA):是以细胞核成份为靶抗原本身抗体总称。间接免疫荧光检验有四种荧光图谱:均质型(抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体);周围型(抗dsDNA抗体);斑点型或颗粒型(抗U1-RNP、抗Sm、抗Scl-70、抗SS-B/La、抗SS-A/Ro等);核仁型(核糖体、U3-RNP、RNA聚合酶)。临床常用免疫学检查第40页本身抗体检验抗核抗体(ANA)检验:抗各种细胞核成份(脱氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取核抗原-ENA和RNA等)。参考值:IFA法阴性,血清滴度>1:40为阳性见于SLE(80%~100%)、MCTD(100%)、原发性胆汁性肝硬化95%~100%)、DM(30%~50%)、RA等。临床常用免疫学检查第41页本身抗体检验抗DNA抗体分为:抗ds-DNA、抗ss-DNA、抗z-DNA
抗z-DNA对SLE有特异性,检出率在90%以上。抗dsDNA抗体测定临床意义见于SLE活动期,阳性率70%~90%。特异性教高(95%)敏感性较低-诊疗与治疗监控。另外参加SLE发病机制。抗Sm抗体测定:为SLE所特有,疾病特异度达99%,且能反应疾病活动程度,灵敏度较低,平均为20%。与CNS、肾病、肺纤维化及心膜炎有一定关系。临床常用免疫学检查第42页本身抗体检验抗组蛋白抗体(AHA)测定临床意义:50%~70%SLE及95%以上药品诱导性狼疮可出现,主要靶抗原为H2A-H2B–DNA复合物,与SLE活动相关。抗核糖核蛋白(RNP)抗体测定临床意义:抗U1-RNP抗体主要与MCTD相关,在30%~40%SLE病人中可检测到,并常与Sm抗体相伴出现。常与以下临床表现相关,肾脏较少累及、雷诺现象、手肿胀、食管运动不良等。临床常用免疫学检查第43页本身抗体检验抗SS-A/Ro抗体测定干燥综合征有三种不一样本身抗体:SSA、SSB、SSC(RANA),前二者仅见于原发性干燥综合征,后者见于伴类风湿性关节炎继发性干燥综合征。SS-A/Ro抗体见于干燥综合征(SjS)(灵敏度88%~96%),RA(3%~10%),SLE(24%~60%)。其它疾病:亚急性皮肤性狼疮(70%~90%),新生儿狼疮(>90%),补体C2/C4缺乏症(90%)。临床常用免疫学检查
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