血细胞的分类测定与应用

1试验目标⑴了解血细胞测定方法。⑵掌握血细胞正常值及应用意义。血细胞的分类测定与应用第1页2试验原理把用等渗电解质溶液（被称为稀释液，diluent）稀释细胞悬液倒入一个不导电容器中，将小孔管插到细胞悬液中。小孔管是电阻抗法细胞计数一个主要组成部分，其内侧充满了稀释液，并有一个内电极，外侧细胞悬液中有一个外电极。血细胞的分类测定与应用第2页检测期间，当电流以接通通后，位于小孔两侧电极产生稳定电流。稀释液经过小孔孔管壁上固有小孔（直径普通<100μm.厚度为75μm左右）向小孔内部流动。因为小孔这壁充满了含有专导性液体，其电子脉冲是稳定。假如供给电流I和阻抗Z是稳定，依据欧姆定时律经过小孔电压E也是不变（这时E=IZ）。当有一个细胞经过小孔时，因为细胞导电性质比稀释液要低，在电路中小孔感应区内电阻增加，于瞬间能上能下起了电压改变而出现一个脉冲信号，自然数为经过脉冲。电压增加改变程度取决于非传导细胞占据小孔感应区体积，即细胞体积越大，引发脉冲越，产生脉冲振幅越高，脉冲信号经过以下步骤，得出细胞计数结果。血细胞的分类测定与应用第3页⑴放大：必须经过电子放大器械，将微伏讯号放大为优级脉冲扭号。⑵甄别：经过微孔时各种微粒均可产生对应脉冲讯号，讯号电平（脉冲幅度）与微粒在小成正比。因除血细胞外，血中细胞外，血中细胞碎片、稀释液中杂质微粒均可产生假讯号，使计数结果偏高。所谓甄别就是利用甄别器依据阈值调整器提供参考电平，将低于参考电平假讯号去掉，以提升细胞计数准确性。⑶阈值：在一定范围内调整参考电平大小，使计数结果可能符合实际。⑷整形：经过放大和甄别后细胞脉冲讯号波形尚不一致必须经过整形器作用，修整为形伏一致标准平顶波后，才能触发电路。⑸计数：血细胞脉冲信号，经过放大、甄别、整形后，送入计数系统。各型血液分析仪器计数系统甄别方式不一样，经过各种方式得出计数结果。血细胞的分类测定与应用第4页图3-9电阻抗法血细胞计数原理血细胞的分类测定与应用第5页3试验器材与试剂⑴器材

BC-3000全自动血细胞分析仪；1.5ml离心管；采血针；吸液球；吸血管；移液枪⑵试剂血液细胞分析仪用溶血剂（V-28CFL无氰溶血剂）；肝素抗凝剂；生理盐水血细胞的分类测定与应用第6页4试验方法与步骤

利用BC-3000全自动三分类血细胞仪测定血细胞参数：红细胞数（RBC）、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）、平均血红蛋白含量（MCH）、平均血球体积（MCV）、平均血球血红蛋白含量（MCHC）、白细胞数（WBC）、淋巴细胞数（Lymph）、中间细胞数（Mid）、中性粒细胞（Gran）、血小板数（FLT）、血小板分布宽度（PDW）和平均血小板体积MPV(fl)。血细胞的分类测定与应用第7页⑴开机前准备:检验试剂是否足量，有没有浑浊变质，试剂管道有没有扭结，倒空废液瓶。⑵开机:按下机器后部开关键，约一分钟后出现计数界面。⑶本底检验:按“开始”键，机器计数本底。本底结果要求WBC≤0.3，RBC≤0.03，HGB≤1，PLT≤10⑴开机前准备

⑵开机

⑶本底检验血细胞的分类测定与应用第8页⑷测量①全血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“全血”。用EDTA二钾作抗凝剂取凝血标本（EDTA二钾用量为1.5-2.2mg/ml血）。混匀抗凝血，让采样针插入抗凝血。按“开始”键测量样本②末梢血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“预稀释”。按“稀释液”，按“开始”键，自采样针下取1.6ml稀释液。将毛细吸管采取20μl末梢血标本快速注入1.6ml稀释液杯中，制成稀释血样（注意针刺得要深，用不起毛纸巾拭去第一滴血）制好稀释血样要摇匀（用拇指及食指捏住杯上部，用腕部旋转约一分钟左右，注意不要猛烈震荡，不然有可能计数不准），放置5分钟后，再摇匀。将稀释血样放于采样针下，按“开始”键计数。⑷测量血细胞的分类测定与应用第9页⑸打印汇报单⑹关机天天测试完成一定要用E-Z液执行“关机”程序。等约一分钟后，屏幕提醒能够关闭电源后关掉主机电源。⑸打印汇报单

⑹关机血细胞的分类测定与应用第10页参数缩写单位正常值白细胞数目WBC109/L4.0≤WBC≤10.0红细胞数目RBC109/L3.50≤RBC≤5.50血红蛋白HGBg/L110≤HGB≤160血小板数目PLT109/L100≤PLT≤300淋巴细胞百分比Lymph%%20.0≤Lymph%≤40.0中间细胞百分比Mid%%3.0≤Mid%≤9.0中性粒细胞百分比Gran%%50.0≤Gran%≤70.0平均红细胞体积MCVFl82.0≤MCV≤95.0红细胞分布宽度变异系数RDW-CV%11.5≤RDW-CV≤14.5红细胞分布宽度标准差RDW-SDFl35.0≤RDW-SD≤56.0表3-19全自动血细胞检测仪检测指标表血细胞的分类测定与应用第11页参数缩写单位正常值平均血小板体积MPVFl7.0≤MPV≤11.0血小板分布宽度PDW15.0≤PDW≤17.0淋巴细胞数目Lymph#109/L0.8≤Lymph≤4.0中间细胞数目Mid#109/L0.1≤Mid≤0.9中性粒细胞数目Gran#109/L2.0≤Gran≤7.0红细胞压积HCT%37.0≤HCT≤50.0平均红细胞血红蛋白含量