药用植物组培技术之一配制母液

植物组织培养：在无菌和人为控制外因条件下，将离体器官、组织、细胞、胚胎或原生质体培养在人工配制培养基上，使其脱分化产生愈伤组织，进而分化出器官并长成完整植株方法。药用植物组培技术之一配制母液第1页药用植物组培技术之一配制母液第2页药用植物组培技术之一配制母液第3页试验一培养基母液制作试验目标：（一）掌握培养基化学组成；掌握MS培养基配方组成；（二）熟练掌握惯用培养基母液制备方法。药用植物组培技术之一配制母液第4页试验原理水分无机物质有机物质植物生长调整物质固相支持物培养基提供植物生长所需营养成份，满足植物正常生长发育需要。主要包含药用植物组培技术之一配制母液第5页大量元素所需浓度大于0.5mmol/L大量元素包含N,P,S,Ca,K,Mg。培养基中加入量最多是N，普通以硝酸盐或氨盐。1.无机化合物微量元素植物所需微量元素有Fe、Cu、Zn、B、Mn、AlMoCo药用植物组培技术之一配制母液第6页2.有机化合物

有机物质主要指维生素类物质、糖类物质。a、维生素类物质维生素类物质在酶系统中有催化功效。

硫胺素（VB1）与愈伤组织产生和生活力相关，是全部植物组织培养早期需要维生素。盐酸吡哆醇（VB6）促进根生长。烟酸（VB3，又称维生素PP）促进胚发育。泛酸钙（VB5）、生物素（VH）、钴胺素（VB12）、叶酸（VBc），Vc等。

药用植物组培技术之一配制母液第7页b、糖类

糖在培养基作用：

1）、为细胞提供合成新物质碳骨架

2）、为细胞呼吸代谢提供底物和能量

3）、维持渗透压

蔗糖是广泛应用一个碳源，普通浓度1-5%。

葡萄糖和麦芽糖也是惯用碳源。

药用植物组培技术之一配制母液第8页C.天然有机物

一些天然有机物如椰乳、番茄提取物、酵母提取物、马铃薯煮汁也惯用于植物组织培养，并表现出了良好促进作用。

药用植物组培技术之一配制母液第9页无机元素和有机营养组成培养基仅确保培养物生存与最低生理活动，只有加入植物生长调整物质，才能诱导细胞分裂、脱分化和再分化。植物生长调整剂是外源调整植物生长发育物质。植物激素是在植物体内合成，对植物生长发育有显著调整作用微量有机物。

主要是生长素和细胞分裂素，有时用GA3，ABA。3、植物生长调整物质药用植物组培技术之一配制母液第10页生长素类：诱导细胞分裂和根分化

1）吲哚类：IAA（吲哚乙酸）、IBA（吲哚丁酸）、IPA（吲哚丙酸）

2）萘酸类：NAA（萘乙酸）

3）苯氧羧酸类：2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、2,4,5-T（2,4,5-三氯苯氧乙酸）、2,4,5-TP（2,4,5-三氯苯氧丙酸）等。

其中IBA和NAA广泛用于生根，并能与细胞分裂素互作促进芽增殖。2.4-D对于愈伤组织诱导和生长有效。药用植物组培技术之一配制母液第11页A：NAA0mg/L，芽（少），根（无）

B：NAA0.1mg/L，芽（少），根（无），愈伤组织（少许）

C：NAA5.0mg/L，芽（少），根（多），愈伤组织（一定量)ABC药用植物组培技术之一配制母液第12页b.细胞分裂素是一类腺嘌呤衍生物。主要有激动素（6-糠基氨基嘌呤KT）、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）和玉米素（ZT）等。其中最惯用是6—BA。功效：1、促进细胞分裂和分化2、诱导芽分化3、促进侧芽萌发和生长4、抑制衰老药用植物组培技术之一配制母液第13页ABA：6-BA(0mg/L)，芽（降低），根（增多）愈伤组织（一定量）

B：6-BA(0.1mg/L)，芽（适量），根（适量）愈伤组织（一定量）

药用植物组培技术之一配制母液第14页怎样控制植物细胞分化分裂素/生长素百分比是控制芽和根形成一个主要条件百分比高时——产生芽,百分比低时——产生根药用植物组培技术之一配制母液第15页c.赤霉素（GA3）

1、诱导茎细胞伸长，对矮生型植物恢复成高生型尤其有效，对根无效

2、对生长素和细胞分裂素活性有增效作用

注：不耐热，应采取过滤灭菌加入

d.脱落酸（ABA）

生理作用：

1、抑制蛋白质合成

2、抵消和抑制生长素、细胞分裂素、GA作用

3、诱导休眠、促进衰老和脱落

药用植物组培技术之一配制母液第16页（4）固化剂和悬浮剂

a、固化剂

琼脂、琼脂糖（用于原生质体、细胞培养及一些作物花药培养）

琼脂用量普通在4-10g/L。

琼脂以颜色浅、透明度好、洁净为上品。

b、悬浮剂

Ficoll（聚蔗糖）

药用植物组培技术之一配制母液第17页（三）、培养基配制试验课上讲

1.贮备液（母液）配制

为何要配制母液？

1）、方便

2）、准确（有些成份量太小）

以MS培养基配制为例，包含大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、生长调整物质母液。药用植物组培技术之一配制母液第18页药用植物组培技术之一配制母液第19页药用植物组培技术之一配制