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文档简介

HanksD-Hanks液配制,胰酶液的配制02月06日星期五10:36液是常见的平衡盐溶液之一。

-液则是无钙镁离子的液。

与细胞生长状态下的值、渗透压及无菌状态全都,且配方简洁,是组织培育基本用液,常用于配制培育基及其他用液,或洗细胞等,细胞在中可生存几个小时。

胰蛋白酶胰酸溶液是一种常用的细胞消化液,原代培育时用于处理组织块,使细胞分别下来。

传代时用胰蛋白酶使培育细胞离开所贴附的培育瓶表面,并分散成单个细胞。

胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,呈白色粉末状,易潮解,应在低温干燥处保存。

胰酶的活力常用一份胰酶解离酪蛋白的份数表示,常用胰酶活力为1:125或1:250。

本试验室一般用1:250公司生产。

胰蛋白酶对细胞的分别效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。

一般来说浓度大、温度高勿高于37℃、作用时间长,则对细胞分别力量大。

但超过肯定程度会损伤细胞,导致细胞传代后不能贴壁或死亡。

胰酶在、37℃时消化力量最强。

溶液中的2+、2+和血清会降低胰酶活力,所以配制胰酶时须用无2+、2+的-液。

当消化结束时,可加入少量血清或含血清的培育基以终止胰酶作用。

%%。

%%。

***材料:3000锥形瓶,25、50试剂瓶,500输液瓶,螺口盖,翻帽塞,试纸,。

***药品:,204,204,,酚红,03,胰蛋白酶干粉,%,2,-葡萄糖,620,04720,酚红%配法:称酚红2,置于研磨器中,%的3溶液溶解并研磨,%03溶液使最终体积为100。

瓶装保存,备用。

***仪器请参看仪器图库:抽滤泵1套,过滤器1套,高压灭菌锅,量筒,磁力搅拌器,研磨器。

一配制-液—3—5称取-试剂。

蒸馏水中,溶解后定容至11000。

,10磅10。

二—3—5称取试剂。

,需将2另溶解于100的蒸馏水中。

蒸溜水中,溶解后再与2溶液一起定容至1000。

,10高压灭菌。

三配制胰蛋白酶消化液,晾至室温,4℃保存备用。

夏天时研磨器应放在冰浴中,加入少量-液研磨1000次左右,调制成糊状。

再放入4℃预冷的适量-液中,4℃下磁力搅拌使完全溶解。

胰酶作用的最适值,%以帮助消化作用。

,-20℃冻存。

==============================================================================对一般细胞%胰酶胰蛋白酶,配方:100,步骤:1先配1001000:,122,,23加入中,低速搅拌〈4冰浴中,或者4℃过夜45仍在冰浴中6过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完:低速很重要,机械搅拌

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