n,n-二氧-2-甲基喹恶啉的显色

n,n-二氧-2-甲基喹恶啉的显色

二氮氧二甲酯是一种研究较早的具有抗菌活性的药物。n、n-2-硝基溶胶不仅具有抗菌活性，而且是生产其他溶胶剂的重要手段。用它可生产相应的醇、醛、羧酸及醛和羧酸的衍生物。这一系列产品具有低毒副作用和不同的杀菌作用,现以广泛用作兽用杀菌药物和动物生长促进剂。但有关这些物质定量分析方法的研究未见报道。作者根据N,N′-二氧-2-甲基喹恶啉水溶液可与氢氧化钠溶液或亚硫酸氢钠溶液/浓硫酸反应生成有色化合物的性质,建立了可测定该物质的分光光度法。1实验部分1.1氧-2-甲基喹恶啉722分光光度计(上海第三分析仪器厂);恒温水浴箱。N,N′-二氧-2-甲基喹恶啉(自己合成,甲醇中重结晶,高效液相色谱法检测纯度为99.9%);氢氧化钠溶液(20%),亚硫酸氢钠溶液(20%),浓硫酸(适当稀释为90%左右)。以上试剂均为分析纯,水为蒸馏水。1.2n,n-二氧-2-甲基喹恶啉标准品的制备1.2.1N,N′-二氧-2-甲基喹啉的标准溶液吸光度的测定(氢氧化钠显色法)称取N,N′-二氧-2-甲基喹恶啉1.000g溶于约50mL蒸馏水,然后转入100mL容量瓶,蒸馏水定容。移取此溶液10mL于另一个100mL容量瓶并定容,此溶液浓度为1.00mg/mL。取8个25mL容量瓶,依次加入0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、4.0、5.0mL稀释的标准溶液和约8mL蒸馏水,摇匀。加入10mL20%的氢氧化钠溶液,摇匀,蒸馏水定容,70～80℃恒温水浴放置2h,以等浓度氢氧化钠溶液为空白,1cm比色皿,387nm波长处测量吸光度。重复三次,取其吸光度平均值作定量分析。1.2.2N,N′-二氧-2-甲基喹恶啉的标准溶液吸光度的测定(亚硫酸氢钠/浓硫酸显色法)取8个10mL容量瓶,每个容量瓶中依次用移液管加入浓度为1.00mg/mL的标准溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、7.0mL、加蒸馏水至总体积为7mL,再加2.0mL亚硫酸氢钠溶液,摇匀。移取1.0mL90%的浓硫酸加入容量瓶中,不振荡,室温显色30min后以试剂空白对照,1cm比色皿,410nm波长处测其吸光度。平行实验三次,取其平均值作定量分析。2结果与讨论2.1浓度0.2000.40010-dmg/ml所得实验数据用最小二乘法分别处理得两个回归方程:A1=0.00883c+0.0145,r=0.990;在4.00～200×10-3mg/mL浓度范围符合比耳定律;A2=0.000774c-0.002,r=0.999;在10.0～700×10-3mg/mL浓度范围符合比耳定律。2.2显色条件2.2.1低浓度与碱作用的反应用氢氧化钠显色的可能机理是喹恶啉环上的α-甲基氢原子酸性比吡啶α-甲基氢原子酸性强,在碱性溶液中存在如下平衡:低浓度待测物在浓碱介质中,平衡向右移动使反应能够进行完全。用亚硫酸氢钠显色的可能机理是将喹恶啉还原成类似于羟胺的结构:对多种喹恶啉化合物的实验结果表明,喹恶啉环上2-或3-位侧链具有α-氢原子的化合物有此反应,且不可逆;其它衍生物没有显示这种性质,如喹恶啉甲醛及其席夫碱均不显蓝色。2.2.2硫酸浓度的影响用氢氧化钠显色法,氢氧化钠浓度为1～6mol/L时最佳,且浓度越大显色时间越短,吸光度的波动性也越大,选用2～3mol/L浓度;用亚硫酸氢钠/浓硫酸显色,因硫酸和亚硫酸氢钠反应释放出二氧化硫,任一试剂过量都会导致吸光度不稳定。在显色液中,亚硫酸氢钠的含量为0.03～0.05g/mL,硫酸浓度约在1.5～2.0mol/L为宜。此范围内,酸度变化对吸光度没有影响,但是加入的硫酸浓度不得低于90%,否则吸光度不稳定。2.2.3亚硫酸氢钠/浓硫酸显色时间的确定用氢氧化钠显色,温度越高色度越深,显色越快,吸光度波动性也越大。适宜温度为70～80℃。在此温度下50min显色完全,显色液在室温时24h内吸光度稳定;用亚硫酸氢钠/浓硫酸显色,高于室温容易逸出二氧化硫,达不到显色效果。室温下30min可以充分显色。显色后低浓度显色液吸光度稳定,浓度高于2.00×10-4g/mL时,在放置过程中吸光度会偏离比耳定律。2.2.4比耳定律亚硫酸氢钠/浓硫酸显色法用氢氧化钠显色,在4.00～200×10-3mg/mL浓度范围内服从比耳定律;用亚硫酸氢钠/浓硫酸显色,在10.0～700×10-3mg/mL浓度范围内服从比耳定律。从两组实验数据可知,氢氧化钠显色法适应于较低浓度溶液的分析,亚硫酸氢钠/浓硫酸显色法适用于较高浓度溶液的分析。2.3空白豆浆提取液显色剂的确定称取纯净的51.3mg甲基喹恶啉粉末与10g豆粕混合均匀,80mL蒸馏水作提取溶剂,索氏提取器提取10min,提取液冷至室温后转入100mL容量瓶,蒸馏水定容,以空白豆粕提取液加显色剂对照,分别按1.2.1法和1.2.2法进行分析。1.2.1法分析结果换算得N,N′-二氧-2-甲基喹恶啉49.8mg,回收率97.08%;1.2.2法分析结果换算得N,N′-二氧-2-甲基喹恶啉49.3mg,回收率96.1%。3分光光度分析N,N′-二氧-2-甲基