奶牛酮病的发病机制及防治

奶牛酮病的发病机制及防治

奶牛酮病是指奶牛磺酸酶、酮血症、酮尿症和酮乳症的总称。通常发生在产后2.6周。这是分娩奶牛的常见疾病。高产奶牛是酮病的易发群体,临床酮病的发病率一般占产后母牛的2%~20%,亚临床酮病的发病率一般占产后母牛的10%~30%。1血糖浓度低、产奶量下降奶牛酮病主要是由体内碳水化合物和脂类代谢紊乱引起的一种全身性功能失调的代谢疾病,其特征是血液、尿、乳中酮体含量增高,血糖浓度下降,消化机能紊乱,体重减轻,产奶量下降,间有神经症状。酮病根据发生原因,可分为原发性酮病和继发性酮病,前者是因能量代谢紊乱,体内酮体生成增多;后者是因其他疾病,如真胃移位、创伤性网胃炎、子宫炎、乳房炎等引起食欲下降、血糖浓度降低,导致代谢紊乱,酮体产生增多。根据有无明显症状可将奶牛酮病分为临床酮病和亚临床酮病。2乳液型的病牛和土牛临床酮病诊断可根据一些明显症状进行判断,如通常在产犊后几天至几星期出现,包括食欲减退,便秘,粪便上覆有黏液,精神沉郁,凝视,迅速消瘦,产奶量降低。乳汁易形成泡沫,类似初乳状。严重者在排出的乳、呼出气体和尿液中有酮体气味,加热更明显。病牛呈拱背姿势,表示轻度腹痛。大多数病牛嗜睡,少数病牛可发生狂噪,表现为转圈,摇摆,无目的地吼叫,向前冲撞。这些症状间断地多次发生,每次持续1h,然后间隔8~12h重又出现。尿呈淡黄色,水样,易形成泡沫。亚临床酮病虽无明显的临床症状,但由于会引起母牛泌乳量下降,乳质量降低,体重减轻,生殖系统疾病和其他疾病发病率增高,而造成严重的经济损失。3检测方法3.1水杨醛比色法酮粉法可以快速定性检测血液、尿液和乳汁中有无酮体,对乙酰乙酸和丙酮的灵敏度分别为80mg/L和1000mg/L,对β-羟丁酸不反应,测试时采用亚硝基铁氰化钠1g、无水碳酸钠20g和硫酸铵20g(李光辉,1986)研磨成粉末取1小匙,放入凹瓷板,加新鲜尿样或奶样3~4滴,以浸湿粉末为适度,1~2min后观察颜色变化。根据颜色变化做出判断:无变色反应为阴性(-);变色反应不明显为可疑(±);浅紫红色为弱阳性(+);紫红色为强阳性(++);深紫色或暗紫红色为最强阳性(+++,++++)。水杨醛比色法可对酮体进行定量检测,张生福等(1992)利用水杨醛比色法(1979)对酮粉法测定奶牛尿液、乳汁中酮体作出评价,还根据资料报道和相关试验测定结果,拟定尿酮在1.205mmol/L以下、乳酮在1.722mmol/L以下为酮体正常值;尿、乳酮体值均达到1.722mmol/L以上时判断为隐性酮病牛;尿酮在1.205~1.722mmol/L之间或乳酮在1.722mmol/L以上,属可疑隐性酮病牛。临床诊断中酮粉法和水杨醛比色法通常配合使用(夏成等,2003)。3.2试剂及其主要试剂当前用于奶牛酮病诊断的试纸条主要有五类:Ketolac,又称Hoechst(Germany)、Ketostix试剂条(Canada)、Bioketone粉剂(Canada)、KetocheckTM粉剂(Joseph,MO)和Utrecht粉剂(TheNetherlands)。Ketolac主要用于奶牛乳中或血中β-羟丁酸(BHBA)的检测,后四类主要用于乳中或尿中乙酰乙酸含量的检测。试剂条诊断方法具有简便快捷的好处。3.3酶法测定血清中-羟丁酸浓度酶法原理是根据β-羟丁酸脱氢酶催化β-羟丁酸与氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)反应,生成乙酰乙酸和还原型辅酶Ⅰ(NADH)(Willanson,1962),NADH在340nm波长下有吸收峰,因此酶法测定的是血清中β-羟丁酸浓度(杨乃发等,1994)。于永光(1999)用酶法测定β-羟丁酸试剂盒,对实验标本进行检测,结果表明,该试剂盒线性达5.0mmol/L,回收率大于96.23%,批内变异系数3.62%,批间变异系数4.38%。酶法检测已经广泛用于人类糖尿病诊断,对于奶牛酮病诊断,存在一定的缺陷,如采血相对采乳和采尿较麻烦,采血易使奶牛产生应激反应,影响奶产量。3.4铁氰化钾的电化学传感器传统的测定尿或血中酮体含量的方法大多是采用光学方法测定乙酰乙酸或丙酮的浓度。浙江大学生物传感器国家专业实验室研制了一种可用于定量检测β-羟丁酸的电化学生物传感器(马念章,李光等,2005)。将羟丁酸脱氢酶(HBDH)、辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)等固定于丝网印刷碳电极上,以铁氰化钾为电子传递剂,采用电流法对β-羟丁酸的浓度进行测定,并对铁氰化钾浓度、NAD浓度、溶液pH值及温度等影响因素进行优化。实验结果表明,用该传感器测定血清β-羟丁酸的浓度,快速准确、重复性好,而且线性范围可达到30~550mg/L,用血量只需2μL。3.5对酮病的检测当前对气体进行定量检测的方法有气相色谱-红外光谱联用技术。高产奶牛发生酮病时,除乳中、尿中、血中的酮体含量会明显上升外,呼出的气体中酮体含量也会发生变化,因此对奶牛呼出气体中酮体含量进行测定也能实现对酮病的诊断。Elliott-Martin等(1997)利用气相色谱与红外光谱联用技术对气体样品进行检测,结果显示气体检测诊断结果与血液检测诊断结果相吻合。试验中存在的最大问题是采集样品受多种不稳定因素影响,如牛群健康、泌乳周期及个体变化等。4治疗4.1西医4.1.1不同树种的药物疗效50%葡萄糖注射液500mL,静脉注射。葡萄糖疗法不仅适用于临床型酮病,而且对亚临床酮病的疗效也很好。静脉注射葡萄糖,由于作用时间短而需重复注射,为了避免重复注射,可应用丙二醇或甘油,每天2次,每次250g,连用2d后,改为每天1次,每次250g,连用2d。若事先注射葡萄糖液疗效更好。内服蜂蜜或葡萄糖,同时服用丙酸钠也具有一定的疗效。4.1.2月2次家庭2次用25%木糖醇静脉注射(15~30min),每日1次,连用3d。木糖醇的注射速度以0.3g/h/kgBW以下为好。缓慢注射的目的也是为了延长胰岛素分泌机能持续时间。4.1.3u/l输注di法患牛的胰岛素分泌机能严重低下,用葡萄糖、木糖醇法无效果时,可用葡萄糖胰岛素(GI)法。标准胰岛素0.1U/kg静脉注射,同时用25%葡萄糖500mL静脉注射(45min以上)。用这种方法可以维持血液中胰岛素高浓度。在葡萄糖法或木糖醇法连用3d没有治愈时,改用此疗法,有90%的患病牛可以治愈。4.1.4硫酸法据向湘春等(1999)报道,用0.15%高锰酸钾液灌服对酮体阳性牛转阴效果良好,可达86.42%。4.1.5糖原异生培养液促肾上腺皮质激素(ACTH)200~600IU,肌肉注射,每天1次。此法简便易行,不需要同时应用葡萄糖,单独应用即能促进糖原异生。但此过程中要消耗奶牛体内的其它组织,所以只可用于体质较好的病牛,此法疗效也很好。4.2植物基性养老剂、茯苓、植物基以补气健脾、活血补血为治则。方用加味香砂八珍汤:苍术80g,党参、当归、赤芍、九地、砂仁各60g,茯苓、木香、白术、甘草各50g,川芎40g,神曲100g,共为末,开水冲调。候温日服1剂。方中以四君子汤补气健脾,四物汤活血补血,木香、砂仁、苍术温中和胃,神曲健胃消食,甘草调和诸药,共奏补气健脾、补血和血、消食健胃之效。5给药、饲料、日粮依据奶牛不同生理阶段和生产性能对各种营养物质的需求配合日粮,精粗比合理搭配是控制酮病发生的关键。因此,日粮应按照饲养标准的需要合理供给,产前应饲喂能量较高的饲料,并在分娩后进一步提高饲料中的能量水平,限制富含蛋白质和脂肪类饲料的给予量。一般情况下,产前l0d开始,饲料中加喂丙酸钠,每日110g连续饲喂4~5周,不仅可减少酮病的发病率,而且有提高产奶量的效果。产奶前期能量饲料增加量每天以0.5~1.0kg为限,日喂精料最高限量一般不要超过15kg;日产奶