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文档简介
第1页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序第2页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN第3页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN第4页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN编码区第5页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区编码区第6页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区第7页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游第8页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游第9页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游第10页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游开启子第11页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点开启子第12页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点开启子终止子第13页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点开启子终止子编码区非编码区第14页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点开启子终止子编码区非编码区编码蛋白质,连续不间断第15页补:原核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚酶结合位点开启子终止子编码区非编码区编码蛋白质,连续不间断不编码蛋白质,有调控作用第16页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序IMN第17页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序非编码区非编码区IMN第18页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区非编码区IMN第19页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区非编码区编码区上游与RNA聚合酶结合位点IMN第20页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区非编码区开启子编码区上游与RNA聚合酶结合位点IMN第21页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区非编码区开启子终止子编码区上游编码区下游与RNA聚合酶结合位点IMN第22页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区非编码区开启子终止子编码区上游编码区下游外显子与RNA聚合酶结合位点IMN第23页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区非编码区开启子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN第24页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区编码区非编码区非编码区开启子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN第25页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区外显子:能编码蛋白质序列内含子:不能编码蛋白质序列编码区非编码区非编码区开启子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN第26页补:真核细胞基因结构1.2基因工程基本操作程序编码区非编码区外显子:能编码蛋白质序列内含子:不能编码蛋白质序列不编码蛋白质,有调控作用编码区非编码区非编码区开启子终止子编码区上游编码区下游外显子内含子与RNA聚合酶结合位点IMN第27页1.2基因工程基本操作程序第28页一目标基因获取1.2基因工程基本操作程序IMN第29页一目标基因获取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目标基因:第30页一目标基因获取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目标基因:主要指是编码蛋白质结构基因;第31页一目标基因获取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目标基因:主要指是编码蛋白质结构基因;也能够是一些含有调控作用因子。第32页一目标基因获取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目标基因:主要指是编码蛋白质结构基因;也能够是一些含有调控作用因子。(二)获取目标基因惯用方法第33页一目标基因获取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目标基因:主要指是编码蛋白质结构基因;也能够是一些含有调控作用因子。(二)获取目标基因惯用方法从自然界已经有物种中分离用人工方法合成第34页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因第35页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)基因文库概念第36页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)基因文库概念第37页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)基因文库概念将含有某种生物不一样基因许多DNA片段,导入受体菌群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不一样基因,称为基因文库。第38页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)基因文库概念将含有某种生物不一样基因许多DNA片段,导入受体菌群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不一样基因,称为基因文库。(2)基因组文库和部分基因文库第39页一目标基因获取IMN第40页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(2)基因组文库和部分基因文库包含了一个生物全部基因基因文库叫做基因组文库。第41页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(2)基因组文库和部分基因文库包含了一个生物全部基因基因文库叫做基因组文库。包含了一个生物一部分基因基因文库叫做部分基因文库。第42页IMN(3)基因文库构建第43页IMN(3)基因文库构建①直接分离法第44页IMN(3)基因文库构建①直接分离法第45页IMN(3)基因文库构建①直接分离法基因组文库构建第46页IMN(3)基因文库构建②反转录法:第47页IMN(3)基因文库构建②反转录法:第48页IMN(3)基因文库构建②反转录法:mRNAcDNA(互补DNA)双链DNA反转录DNA聚合酶第49页IMN(3)基因文库构建②反转录法:mRNAcDNA(互补DNA)双链DNAcDNA文库构建反转录DNA聚合酶第50页IMN基因组DNA文库与cDNA文库比较第51页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(2)怎样从基因文库中得到所需要基因第52页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(2)怎样从基因文库中得到所需要基因依据:目标基因相关信息。第53页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(2)怎样从基因文库中得到所需要基因依据:目标基因相关信息。如:依据基因核苷酸序列基因功效基因在染色体上位置基因转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特征。第54页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因2.利用PCR技术扩增目标基因第55页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目标基因第56页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应是一项生物体外复制特定DNA片段核酸合成技术。经过此技术,可在短时间内获取大量目标基因。2.利用PCR技术扩增目标基因第57页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目标基因(2)原理:第58页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目标基因(2)原理:DNA双链复制第59页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目标基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:第60页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目标基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一段已知目标基因核苷酸序列第61页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应2.利用PCR技术扩增目标基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一段已知目标基因核苷酸序列(4)条件:第62页一目标基因获取IMN1.从基因文库中获取目标基因(1)PCR——聚合酶链式反应模板DNA;DNA引物(做开启子);四种脱氧核苷酸;DNA聚合酶等。2.利用PCR技术扩增目标基因(2)原理:DNA双链复制(3)前提:一段已知目标基因核苷酸序列(4)条件:第63页IMN利用PCR技术扩增第64页IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲第65页IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲第66页IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲变性第67页IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲变性退火第68页IMN(5)过程:变性、退火、延伸三步曲变性退火延伸第69页IMN(6)方式:以_____方式扩增,即_____(n为扩增循环次数)第70页IMN(6)方式:
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