植物油脂中苯并(a)芘的测定-高效液(完整版)实用资料

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植物油脂中苯并（a）芘的测定-高效液相色谱法本方法参考国标方法：动植物油脂苯并（a）芘的测定反相高效液相色谱法，GBT22509-2021；该国标源自ISO15302:2007，MOD方法。植物油脂中苯并(a)芘的测定-高效液（完整版）实用资料(可以直接使用，可编辑完整版实用资料，欢迎下载）相关技术差异为：对仪器设备作了改动；氧化铝柱采用天津博纳艾杰尔科技的商品氧化铝固相萃取柱；将洗脱溶剂改为采用重蒸后的石油醚；待测液定容体积改为300µL，采用仪器自动进样，进样量为20µL；采用外标法定量计算。方法内容：1．适用范围本方法适用于动植物油脂中苯并（a）芘的检测。本方法的最低检出限为0.3-0.5µg/Kg，该最低检出限为对应所使用的仪器的检出限，因此仪器荧光检测器的灵敏度对应检出限。2．方法原理样品经石油醚溶解，通过商品氧化铝固相萃取柱（活度为Ⅳ级，粒径大小为100-200目）吸附脂肪酸等，用石油醚洗脱苯并（a）芘，采用反相高效液相色谱法分离，荧光检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，采用峰面积外标法定量。3．试剂与材料3.1色谱纯正己烷；石油醚，每升加4g氢氧化钾重蒸；3.2氧化铝固相萃取柱：100-200目，brockmann活度Ⅳ级，在室温下避光保存，天津博纳艾杰尔科技；3.3苯并（a）芘标准储备液：称取10mg标准品于10ml容量瓶中，用正己烷定容，配制的标准储备液浓度为1000mg/L；3.4标准工作液：用正己烷稀释标准储备液，稀释的浓度为10µg/L。4．仪器和设备4.1旋转蒸发仪，大于150ml的圆底旋蒸瓶或鸡心瓶，勿用平底旋蒸瓶；4.2氮吹仪；4.3涡旋混合器；QL-866江苏海门产；4.42ml色谱瓶；4.5250µL色谱瓶玻璃内插管；4.6高效液相色谱仪，配自动进样器，荧光检测器。5．样品前处理5.1样品净化称取约0.300g的油样，用5ml石油醚溶解涡旋混合器上充分混匀。首先采用约30ml石油醚将氧化铝柱预先活化，活化的程度：按氧化铝柱末端正己烷自然滴下约5ml，滴出的过程要不断添加石油醚，千万注意不能让正己烷低于柱子的上筛板，这样会使空气进入柱子导致结果不准确！将5ml滴出的石油醚去除。将溶解好的油样添加到预活化好的氧化铝柱子中开始上样，不断添加石油醚约80ml用150ml的旋蒸瓶接收，直到80ml的石油醚完全自然滴出。上述过程不允许加压或抽真空加快流速，只能让其自然洗脱。将收集的洗脱液在45℃水浴中旋转蒸发至干；用10ml的石油醚分三次淋洗旋蒸瓶，合并10ml的石油醚到氮吹管中，用氮气吹干，如果还有油存在而导致无法吹干，则说明氧化铝柱不合格，需要进行二次净化；添加300µL的正己烷到氮吹管中，用涡旋混合器充分混匀；氮吹过程避免气流过大溅出；涡旋过程避免正己烷蒸发。将上述300µL的正己烷转移至色谱瓶内插管中，进样分析。5.2色谱条件色谱柱：SB-C18，250mm×4.6mm×5.0µm；或多环芳烃专用柱：PAH250mm×4.6mm×5.0µm；流动相为乙腈：水88%：12%；流速为1.0ml/min；进样量为20µL；荧光检测器：发射波长406nm，激发波长384nm。5.3标准曲线绘制将标准工作液稀释到浓度分别为：0.5，1.0，2.0，3.5，5.0，7.5，10.0µg/L，根据峰面积建立标准曲线。根据实际油样可以将标准曲线延伸到50µg/L。6.样品分析将5.1的样品进样分析，采用外标法定量。7．测试结果的表示苯并（a）芘含量按下式计算：mVcw×=其中：w为样品中苯并（a）芘含量，单位为µg/Kg；c为从标准曲线得到的待测液中苯并（a）芘的浓度，单位为µg/L；V为待测液体积，单位为µL，本方法为300µL；m为称取的样品质量，单位为g，本方法要求不能超过0.3100g；8．采用本方法的所得到的图谱图10.5µg/L苯并（a）芘的标准样品的色谱图图3空白实验色谱图图4实际样品的加标回收率实验色谱图离子色谱法同时测定脱硫液中SO32-、SO42-、SCN-和S2O32-王海波，李仁勇，梁立娜戴安中国应用研究中心，北京100085，wanghaibo@dionex摘要：介绍了离子色谱法同时检测含有磺化酞菁钴催化剂的脱硫液中亚硫酸根，硫酸根，硫氰根和硫代硫酸根的方法。脱硫液样品经超纯水稀释和RP柱固相萃取去除掉其中含有的酞菁钴后可直接进样检测，亚硫酸根，硫酸根，硫氰根和硫代硫酸根在亲水性碳酸盐体系色谱柱IonPacAS22上可以得到快速有效分离。这四种含硫阴离子在0.5-100mg/L范围内具有良好的线性，方法检出限在0.1到0.2mg/L之间。离子色谱法同时测定脱硫液中亚硫酸根，硫酸根，硫氰根和硫代硫酸根，简便快捷、灵敏度高、方法可靠。关键词离子色谱法，脱硫液，亚硫酸根，硫酸根，硫氰根，硫代硫酸根一、引言硫醇主要分布在石化产品的低沸点馏分中，硫醇的存在不仅会使油品产生恶臭还会使油品的安定性变差，因此必须设法脱除。目前的各种脱除工艺都是以酞菁钴类为催化剂，将硫醇转变为硫的其它形态从而达到脱臭的目的[1]。在脱硫液中硫的常见形态有亚硫酸根、硫酸根、硫代硫酸根、硫氰根等。离子色谱法的优势在于，这四种离子均可采用离子色谱法分析，但难点在于如何能够同时分析。硫代硫酸根和硫氰根均属于易极化离子，常规碳酸盐体系的亲水性一般较差，往往需要加入有机改性剂才能保证其在常规离子交换柱上较快分离[2]。或者通过使用柱长较短的色谱柱[3]以减小分析时间，但同时往往造成分离度变差。且硫氰根在碳酸盐体系往往具有更强的保留性能，若要完成此物质的分析则可能需要很长时间。选择强亲水性IonPacAS22色谱柱，无需使用有机溶剂改性，通过淋洗条件优化可较快完成分析，文中主要介绍了AS22色谱柱同时检测脱硫液中含硫阴离子的方法。二、实验部分2.1仪器和试剂ICS-1100型离子色谱仪（Dionex，美国），Chromeleon6.80色谱工作站，AS50自动进样器；Nanopure超纯水机(ThermoScientificBarnstead，美国)；0.22μm微孔尼龙膜（天津富集）:///Product.asp?action=search&dq=1860&proClass=0&textitle=色谱工作站2.2测定条件分析柱：IonPacAS22分离柱(4mm×250mm)和IonPacAG22保护柱(4mm×50mm)；淋洗液：1mmol/L碳酸钠+36mmol/L碳酸氢钠，等度淋洗；流速：1.5mL/min；柱箱温度：30℃；进样体积：25μL；ASRS3004mm抑制器，自循环模式，抑制器电流142mA。2.3样品前处理取1mL脱硫液，用超纯水稀释到100mL。取稀释后液体1mL，用超纯水定容到50mL，摇匀后备用。将稀释后样品通过0.22μm尼龙膜和OnGuardIIRP柱，弃去初始3mL样品后收集2mL样品待测。三、结果与讨论3.1标准曲线和方法检出限亚硫酸根，硫酸根，硫氰根和硫代硫酸根这四种含硫阴离子在0.5-100mg/L范围内均具有良好的线性，线性相关系数（R2）在为0.9994到0.9999之间。由于使用淋洗液总体的离子强度较大，导致背景电导和噪音比常规条件要高。根据三倍信噪比可计算出亚硫酸根，硫酸根，硫氰根和硫代硫酸根这四种阴离子中硫酸根的检出限为0.1mg/L，而其余三种的检出限基本都在0.2mg/L。由于脱硫液中含硫阴离子含量较高，因而此灵敏度完全可以满足检测需求。3.2样品测试常规碳酸盐体系的亲水性一般较差，若要完成全部分离往往需要一小时以上，或者需采用有机溶剂改性。选择强亲水性AS22色谱柱则能保证分析时间，也无需使用有毒有害的有机溶剂，使用优化后的淋洗条件可在20min内完成一次分析，亚硫酸根和硫酸根的分离度可达到1.5以上。该脱硫液样品中使用了酞菁钴染料催化剂，样品溶液具有明显的墨绿色，若不经过合适的前处理步骤而进样则可能对色谱柱造成伤害。试验中比较了常见去除色素的前处理小柱，发现RP柱虽然相比较于石墨化炭黑柱去除容量稍低，但单次处理样品量足以完成分析。其更大的优势在于其被使用后可用甲醇将保留在色谱柱上的酞菁钴洗出从而可被重复使用，大大降低样品测试成本。样品的测定结果见表1，可见此脱硫样品中主要含有硫酸根、硫代硫酸根和硫氰根这三种离子。样品的加标回收率均在95%以上，说明样品前处理步骤对测定结果不存在影响，方法可靠。参考文献[1].于航，李旭辉，夏道宏，等，天然气化工，2007，3：73‐77[2].黄丽，杨敏，莫曦明等.中国卫生检验杂志，2006，4：413‐415[3].丁明玉，赵纪萍，李旗，分析试验室，2002，21（2）：21‐23液液萃取－气相色谱法测定水中有机氯的方法研究许桂苹,蒋建宏,白海强,欧小辉,吕保玉*,廖平德(广西壮族自治区环境监测中心站,广西南宁530022摘要[目的]建立液液萃取–气相色谱法定量分析水中有机氯的方法。[方法]通过萃取溶剂的选择、水样的配制、萃取间隔时间的选择等单因素试验,优化水样中有机氯的萃取条件。[结果]液液萃取的最佳试验条件为:以正己烷ʒ石油醚=60ʒ30(V/V作萃取溶剂,不加有机改性剂,连续萃取3次,合并萃取液并浓缩至1ml。该方法回收率在85%105%,最小检出浓度为0．0．075μg/L,相对标准偏差为0．9%6．5%,与固相萃取效果相当。[结论]液液萃取–气相色谱法定量分析水中有机氯具有快速、灵敏、准确、简单、回收率高等优点,能够满足残留检测的要求。关键词液液萃取;气相色谱;有机氯农药;水中图分类号S482．3文献标识码A文章编号0517－6611(202114－08564－03AnalyticalMethodforOrganochlorinePesticidesinWaterbyLLE-GCXUGui-pingetal(GuangxiEnvironmentMonitoringCentralStation,Nanning,Gugngxi530022Abstract[Objective]TheaimwastoestablishamethodforthedeterminationoforganchlorinepesticidesindrinkingwaterbyLiquid-Liquidextraction(LLE,gaschromatography．[Method]TheinspectionconditionswasoptimizedthroughthesinglefactorexperimentsoftheselectionofLLEsolvent,preparationofwatersamplesandextractiontimeinterval．[Result]TheoptimalconditionsofLLEwereshowedasfollowing:takingn-hexaneʒpetroleumether=60ʒ30(V/Vassolvent,withoutorganicmodifier,extraction3timescontinuously,mixingtheextractionliquidandenrichingitto1ml．Therecoveriesofeverycompoundsextractedbyinthismethodwas85%－105%,theminimaldetectionconcentrationwasbetween0．02－0．075μg/L,therelativestandarddeviationrangedfrom0．9%to6．5%．TheeffectofLLEwasalmostthesameasSPE．[Conclu-sion]TheanalyticalmethodfororganochlorinepesticidesinwaterbyLLE-GCgottheadvantageofrapid,sensitive,accurate,simple,highrecoveryrate．Itsatisfiedtherequirementofresiduetesting．KeywordsLiquid-LiquidExtraction;Gaschromatographyspectrometry;OrganchlorinePesticides;Water基金项目广西科技基础条件平台建设项目(桂创建-080501D。作者简介许桂苹(1975－,女,广西北海人,硕士,工程师,从事环境监测和科研工作,E-mail:529695191@qq．com。*通讯作者,工程师,硕士,从事环境监测工作,E-mail:lvbaoyu1017@163．com。收稿日期2021-02-14有机氯农药是一种广谱、高效、价廉的杀虫剂,因其在水中的溶解度小、化学性质稳定、半衰期长,在环境中持久存在,并可通过生物链蓄积,而成为环境中不可忽视的重要污染物之一,在世界各国公布的优先控制污染物黑名单中都列有该类化合物[1]。我国在地表水环境质量标准GB3838—2002中规定集中式生活饮用水源地有机氯应作特定分析项目进行监测[2]。目前测定有机氯化合物主要采用气相色谱法,前处理技术常采用液液萃取[3－4],经过多年实践运用,液液萃取技术已被证明是一种经典适用的分析方法。至今虽有少量文献报道饮用水中有机氯液液萃取条件的优化,但对液液萃取每个步骤所遇到的细节问题,未见文献报道。笔者就液液萃取过程可影响水中有机氯回收率的几个细节问题作了研究,建立提高液液萃取水中有机氯农药测定回收率的方法,具有一定的研究价值和应用前景,同时与固相萃取作对比,通过对实际样品的检测分析证明该方法是一种准确性好、精密度高、检测限低、方便实用的测试方法。1材料与方法1．1标样及试剂8种有机氯标准储备液,美国Supelco公司;甲醇、石油醚、正己烷均为农残级,美国TM公司;无水硫酸钠、氯化钠为分析纯,用前在600ħ下烘4h,冷却后装入密封的玻璃瓶中存放;盐酸和氢氧化钠为优级纯;纯净水,未检出目标物。1．2主要仪器及分析测试条件Agilent6890N气相色谱仪配微电子捕获检测器(μECD和自动进样器,美国安捷伦公司;TurboVapII型氮气浓缩装置,美国Caliper公司;色谱柱HP-5MS石英毛细管柱(30．0mˑ0．25mmˑ0．25μm;高纯氮气(99．999%。进样口温度:250ħ;进样1．0μl,不分流进样;柱温:80ħ(1min,30ħ/min升温至180ħ(0min,5ħ/min升温至220ħ(4min,2ħ/min升温至250ħ(0min,最后290ħ(2min烘烤柱子;恒流1．0ml/min;μECD:300ħ。1．3试验分析步骤1．3．1玻璃器皿的清洗。试验中所用玻璃器皿均先用洗涤剂清洗,自来水冲洗干净,再用铬酸洗液(重铬酸钾ʒ浓硫酸=1ʒ20浸泡过夜,第2天取出后依次用自来水冲洗干净,纯净水润洗3遍,再用乙醇润洗3遍,最后用正己烷润洗,晾干待用。1．3．2样品的前处理[5]。取200ml水样于500ml的分液漏斗中,用6mol/L氢氧化钠调节溶液的pH为7,加入约10g的NaCl,溶解后再准确加入替代品标准液1ml,向水样中加入15ml的混合溶剂(正己烷ʒ石油醚=2ʒ1,剧烈震荡萃取5min,然后静止分层,分离水相,重复萃取3次,合并3次萃取液,然后用无水硫酸钠干燥萃取液后,在4045ħ水浴中氮吹浓缩至1ml,进样1μl分析。2结果与分析2．1液液萃取条件的优化2．1．1萃取溶剂的选择。考虑到溶剂之间的相溶性和溶剂的毒性,选择正己烷和石油醚不同配比作萃取溶剂。对相同体积和相同浓度(2075μg/L的有机氯模拟水样进行液液萃取,通过对其回收率进行比较,发现这几种萃取溶剂得到的回收率均在75%以上,均能满足痕量残留物萃取的要求。其中正己烷/石油醚溶剂(60ʒ30,V/V效果最好,每种化合物的回收率均在90%以上,正己烷的回收率其次。同时又因石油醚价格低廉,来源方便,两者混合做萃取溶剂不仅大大提责任编辑高晓余责任校对李岩安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri．Sci．2021,39(14:8564－8566高回收率,还可降低成本,故选正己烷/石油醚溶剂(60ʒ30,V/V做萃取溶剂,结果如表1所示。表1不同配比的萃取溶剂对有机氯回收率的影响(n=3Table1Effectofthedifferentratioofextractionsolventontherecov-eriesoforganochlorine(n=3化合物Compounds正己烷n-hexane100%正己烷ʒ石油醚(V/Vn-hexane:petroleumether60ʒ3050ʒ5030ʒ60石油醚Petroleumether100%α-六六六83．490．787．585．981．5γ-六六六88．293．292．489．682．1β-六六六90．894．985．187．578．6δ-六六六92．595．493．286．982．84,4'-DDE92．299．190．488．885．92,4'-DDT93．310184．385．278．34,4'-DDD89．192．589．381．476．64,4'-DDT88．691．484．983．581．52．1．2有机改进剂的加入对有机氯回收率的影响。向200ml加有50μl有机氯中间液的模拟水样(浓度为2075μg/L中加入0、10ml甲醇,以正己烷/石油醚溶剂(60ʒ30,V/V为萃取溶剂做液液萃取的回收率试验比对,结果如图1所示。添加甲醇的有机氯化合物回收率较低,而未添加甲醇的回收率明显增加。这可能是由于在液液萃取过程中,添加甲醇的水样与萃取溶剂对目标物会形成相互竞争,甲醇溶解少量目标物,随着甲醇水样的丢弃造成回收率的降低。故用图1水样中甲醇的添加对有机氯回收率的影响Fig．1Effectofusingmethanolinwaterontherecoveriesofor-ganochlorine液液萃取作前处理试验时,水样中勿加甲醇。2．1．3萃取时间间隔对有机氯回收率的影响。在水样液液萃取过程中,每次振荡萃取时间相同,但若萃取3次之间时间间隔不同,目标物的回收率也有所不同。此试验选用每次萃取后时间间隔0、5、10、20、30min作比对,其他条件均相同,各种有机氯化合物回收率如图2所示。在其他条件均相同情况下,萃取时间间隔对回收率也有影响。相隔0min的回收率最高,在90%以上;随着间隔时间的延长,回收率有所下降。这可能是由于萃取溶剂都是易挥发性有机物,随着在空气中暴露时间的增长,挥发量增大,造成目标物回收率的下降。故在液液萃取时,应连续做完1个水样的3次萃取之后再做下一个水样。图2萃取时间间隔对有机氯化合物回收率的影响Fig．2Effectoftheintervalextractiontimeontherecoveriesoforganochlorinecompounds2．2测定方法的线性范围、精密度和检出限在优化的试验条件下,即以正已烷ʒ石油醚=60ʒ30(V/V作萃取溶剂,不添加甲醇,连续萃取3次,合并萃取液并浓度缩至1ml,以峰面积对浓度作工作曲线,向200ml纯水中加一定体积的有机氯标准溶液中间液,使水中有机氯标准溶液为4．0μg/L,平行测定7次。方法的线性范围、检出限(S/N=3、精密度如表2所示。2．3测定方法的加标回收测定取高、中、低3种浓度的加标水样各200ml,在“2．2”所述优化试验条件下,分别进行精密度和回收率试验(平行测定5次,结果显示该方法有较好的精密度和较高的回收率(表3。表2液液萃取气相色谱法测定水中有机氯的线性范围、检出限和精密度Table2Thelinearrange,detectionlimitandprecisionoforganochlorineinwaterdetectedwithliquid-liquidextraction-gaschromatographymethod化合物Compounds线性范围∥μg/LLinearityrange回归方程Regressionequation相关系数rCorrelationcoefficientRSD∥%检出限∥μg/LDetectionlimitα-六六六0．324．00Y=173．250X－11．5260．99992．10．01γ-六六六0．8010．00Y=109．310X－4．8220．99871．80．02β-六六六0．486．00Y=115．080X－1．4670．99915．40．01δ-六六六0．486．00Y=102．320X－17．3140．99993．60．014,4'-DDE0．648．00Y=118．250X－13．5420．99992．70．022,4'-DDT0．8010．00Y=50．267X－8．3570．99921．50．024,4'-DDD0．8010．00Y=71．156X－31．1350．99923．50．024,4'-DDT1．2015．00Y=22．735X－23．3080．99854．10．05565839卷14期许桂苹等液液萃取－气相色谱法测定水中有机氯的方法研究表3不同有机氯加标浓度经液液萃取后的精密度和回收率(n=5Table3Theprecisionandrecoveryofthedifferentorganochlorineconcentrationaddedwatersamplebyliquid－liquidextraction(n=5化合物Compounds低浓度加标水样Lowconcentrationaddedwatersample加标浓度∥μg/LAddedconc-entration回收率∥%RecoveryrateRSD%中浓度加标水样Mediumconcentrationaddedwatersample加标浓度μg/LAddedconc-entration回收率∥%RecoveryrateRSD%高浓度加标水样Highconcentrationaddedwatersample加标浓度μg/LAddedconc-entration回收率∥%RecoveryrateRSD%α-六六六10．083．42．350．094．42．0100．098．70．7γ-六六六25．086．93．8125．093．23．1250．0103．02．8β-六六六15．083．55．475．095．84．1150．099．93．1δ-六六六15．085．74．375．094．52．2150．096．41．54,4'-DDE20．088．33．8100．095．23．4200．098．11．22,4'-DDT25．086．15．3125．090．34．3250．097．71．44,4'-DDD25．091．56．3125．093．61．7250．098．50．74,4'-DDT37．592．76．0187．594．44．3375．0105．02．02．4液液萃取与固相萃取的比较取200ml纯水,加入有机氯农药标准溶液,使每种有机氯的添加浓度如表4所示,采用“2．2”所述优化条件进行液液萃取,按文献方法[6]进行固相萃取加标回收试验。表4液液萃取与固相萃取的有机氯回收率比较Table4OrganochlorinerecoveryratecomparisonofLLEandSPE化合物Compounds添加浓度∥μg/LAddedconcentrationLLE检出限∥μg/LDetectedlimitation回收率∥%RecoveryrateSPE检出限∥μg/LDetectedlimitation回收率∥%Recoveryrateα六六六γ-六六六500．05097．70．0298．8β-六六六300．03090．10．0293．2δ-六六六300．03091．50．0196．54,4'-DDE400．04093．80．0297．82,4'-DDT500．05092．40．03102．04,4'-DDD500．05094．50．0296．14,4'-DDT750．075101．20．04108由表4可知,LLE、SPE2种方法的检出限基本相当,均低于全国饮用水源地有机污染调查作业指导书规定的检出限值,也均低于我国地表水环境质量标准GB3838—2002中规定集中式地表水源地标准限值,方法灵敏度和准确度均可满足环境水样的分析要求。2．5水样中有机氯的测定结果在“2．2”所述优化的试验条件下,测定邕江水样中有机氯的含量及加标回收率,结果如表5所示。回收率较好,可满足实际需要。表5邕江水样中有机氯含量及加标回收率Table5Organochlorinecontentandaddedrecoveryrateofthesam-plesfromYongjiangriverμg/L化合物Compounds大桥冲Daqiao-chong水塘江Shuitan-gjiang朝阳溪Chaoy-angxi竹排冲Zhupai-chong加标回收率∥%Addedrec-overyrateα-六六六0．04ndndnd90．3γ-六六六ndndndnd94．8β-六六六0．03ndndnd88．1δ-六六六0．05ndndnd91．74,4'-DDEndndndnd87．42,4'-DDTndndndnd88．94,4'-DDDndndndnd96．04,4'-DDTndndndnd102．5注:“nd”为未检出Note:“nd”．Notdetected．3结论该研究对液液萃取条件包括萃取溶剂、基体水样添加有机改进剂、萃取间隔时间进行了优化,得出了最佳试验条件,即用正己烷/石油醚溶剂(60ʒ30,V/V作萃取溶剂,不加有机改性剂,连续萃取3次,合并萃取液,浓缩至1ml;在该优化条件下,检出限低于GB7492—87规定的检出限[6],各目标回收率均大于85%。同时,与固相萃取作比对,检出限和回收率基本相当,且有较高的准确度和精密度。最后分析了邕江实际水样,结果均令人满意。该方法快速、灵敏,适合于环境水样中痕量有机氯的快速分析,能够满足残留检测的要求。液液萃取虽用有机溶剂量较多,但可节省大量时间,且设备简单廉价,搬运、操作方便,在环境野外应急监测中,是优先考虑的前处理技术。参考文献[1]郑明麒．气相色谱－质谱法测定城市自来水中有机氯农药的残留[J]．化学工程与装备,2021(4:120－122．[2]国家环境总局．GB3838-2002．中华人民共和国地表水环境质量标准[S]．北京:中国环境科学出版社,2002．[3]中华人民共和国卫生部．GB/T5750．8-2006．生活饮用水标准检验方法有机物指标[S]．北京:中国标准出版社,2006．[4]水和废水监测分析方法编委会．水和废水监测分析方法[M]．4版．北京:中国环境科学出版社,2002．[5]EPA8081A．Organochlorinepesticidesbygaschromatography[S/OL]．www．caslab．com/EPA-Methods/PFDF/8081a．pdf．[6]杨丽莉,母应锋,胡恩宇,等．固相萃取-GC/MS法测定水中有机氯农药[J]．环境监测管理与技术,2021,20(1:25－28．[7]国家环境保护总局．GB7492-87水质六六六、滴滴涕的测定气相色谱法[S]．北京:中国标准出版社,1987．6658安徽农业科学2021年离子色谱法应用于油田采出水中有机酸和无机阴离子的分析郭新美1，王宗花1*，张菲菲1，侯倩慧21青岛大学纤维新材料与现代纺织实验室，国家重点实验室培育基地，青岛，266071，wangzonghua@2青岛普仁仪器，青岛，266071摘要：运用离子色谱分析技术对油田采出水中的有机酸和无机阴离子进行了分离和检测。采用C18柱对油田采出水进行前处理，色谱柱为ShodexICSI-524E阴离子色谱柱，流动相为2.0mmol/LNa2CO3溶液，流速为0.8mL/min。该分析方法重复测定相对偏差小于l％，线性范围大于102,相关系数大于0.999，加标回收率在98.4％～101.5％。该方法具有简便、准确、灵敏度高等优点，用于油田采出水中F-、Cl-、SO42-、CH3COO-、HCOO-、C2O42-离子的同时分离检测，可得到令人满意的效果。:///Shop/Product/Product_195551.shtml关键词：离子色谱,油田采出水,有机酸和无机阴离子，C18柱石油又称原油，是从地下深处开采的棕黑色、可燃、粘稠液体。油田含油污水主要是来源于油田勘探开发过程的油田采出水、洗井污水、钻井污水等，其中主要为油田采出水。油田采出水是与地下的石油、天然气伴生在一起的水体[1]，具有高矿化度、化学成分含量相差悬殊并含有大量不溶性颗粒物、有机物等特点。了解和研究油田采出水，对于揭示地下水或储油介质和油气之间的物质、能量交换特征，以及油气起源和演化均有重要意义[2]。常用的油田水分析方法是经典的化学分析方法[3,4]，操作比较繁杂，分析时间较长，难以满足现代化分析检测的要求。离子色谱法因其高灵敏度、分析快速、能够测定某组分含量很大的试样中的微量组分和能够同时分析多种低浓度离子等优点，而成为我们工作的首选。用离子色谱法测定油、气田水中的无机阴离子已有报道[5]，但是尚无用离子色谱同时分析测定油田采出水中有机酸和无机阴离子的实例。本文采用C18柱对油田采出水进行前处理，研究了离子色谱法应用于油田采出水中有机酸和无机阴离子的分析，得到了满意的效果。1．实验部分1.1实验仪器与试剂普仁PIC-10离子色谱仪（青岛普仁仪器），ShodexICSI-524E250mm×4.0mm阴离子柱，0.45μm水性微孔滤膜（上海兴亚净化材料厂），C18柱。所用试剂均为优级纯，实验用电阻率为18.0MΩ.cm的去离子水。:///Product.asp?action=search&dq=1860&proClass=0&textitle=微孔滤膜1.2色谱条件淋洗液为2.0mmol/LNa2CO3溶液；流速为0.8mL/min；ShodexICSI-524E（250mm×4.0mmi.d.）阴离子色谱柱；电导检测；抑制电流为60mA；柱温45℃；进样量200μL。1.3实验步骤（1）C18柱的活化：用甲醇充满C18小柱，放置10min后，用去离子水冲洗至无甲醇。（2）油田采出水的预处理：将待测油田采出水静置1h以上，使油水两相静置分层后，取容器中部的油田采出水通过中速滤纸过滤，然后用C18柱除去水样中的有机物，使样品澄清透明。将预处理后的水样稀释100倍后备用。用针筒式水相滤膜过滤器（膜孔径0.45μm）进样，滤去水中残余的微生物和杂质，确保进入离子色谱仪的水样澄清透明。:///Shop/Product/Product_621085.shtml2．结果与讨论2.1色谱条件优化选择合适的流动相是改善待测离子分离度的有效方法，Na2CO3溶液是ShodexICSI-524E最常用的淋洗液，通过改变淋洗液中Na2CO3溶液的浓度，即可获得不同强度的淋洗液。本文比较了淋洗液不同浓度（1.8，2.0，2.2，2.4，3.0和3.6mmol/L的Na2CO3溶液）条件下ShodexICSI-524E的分离效果。淋洗液的浓度过高，各种阴离子之间的分离度不好，浓度过低，分离时间太长，当淋洗液浓度为2.0mmol/L时各种离子能达到很好的分离（图1）。对淋洗液的流速进行了选择。流速过大，虽然能缩短分离时间，但是会增加柱压，流速过小，分离时间会加长。实验表明最佳流速为0.8mL/min。在本实验中，改变柱温对离子的分离度没有明显的影响，实验采用ShodexICSI-524E色谱柱的常用温度45℃。最佳的色谱条件为Na2CO3淋洗液浓度为2.0mmol/L，流速为0.8mL/min，柱温45℃。图1为在最佳色谱条件下的油田采出水样品的离子色谱图。2.2方法的线性范围及相关性考虑到油田采出水中各离子实际质量浓度范围，配制系列浓度的6种阴离子的标准溶液，在最优的色谱分析条件下进样分析，以质量浓度C为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线。以3倍信噪比（S/N=3）计算各离子的检测限。线性方程、线性范围、相关系数及检出限见表1。2.3精密度实验将配制好的系列标准溶液，连续进样7次，考察精密度。结果表明，6种离子的保留时间（t）和峰面积(A)的相对标准偏差(RSD)均较小，分别在0.04%～0.08%，0.19%～0.29%。2.4实际样品分析及回收率实验在最佳的色谱条件下对样品进行分析，测得油田采出水中F-、Cl-、SO42-、CH3COO-、HCOO-、C2O42-离子的含量，见表2。为了正确评估方法的准确度和客观反映实际样品中复杂的基体效应和化学干扰对测试方法的影响，我们进行了加标回收率实验。加标回收率实验应注意控制加标物体积与待加物体积误差不超过1%；加标量应为待加样品含量的0.5～2.0倍为宜；加标后的总含量不应超过所选方法测定上限。由表2可见，回收率在98.4-101.5%之间。3．结论本文采用等度洗脱的离子色谱法，用C18柱对油田采出水样品进行前处理，在最佳的色谱条件下，对样品中的F-、Cl-、SO42-、CH3COO-、HCOO-、C2O42-进行同时分离和检测。该方法重复测定相对偏差小于l％，线性范围大于102，相关系数大于0.999，标样回收率在98.4％～101.5％。该方法具有简便、准确、检测灵敏度高、分离效果好等特点，随着离子色谱技术的发展，离子色谱将势必在油田开发中得到广泛的应用。油脂中八种脂肪酸的分析测定黄龙娣1,郑建明2,姚维武3,张丹青4(江苏天瑞仪器股份,江苏昆山215300摘要:油脂经氢氧化钾-甲醇溶液甲酯化后,生成的脂肪酸甲酯用DB-WAX毛细管柱进行分离,GC-FID进行检测。该方法的回收率在91.45%~112.53%,相对标准偏差小于8%,八种脂肪酸的检出限在0.29μg/mL~1.10μg/mL之间。本方法准确度高,检出限低,能满足实际检测工作的需要。关键词:脂肪酸;气相色谱法;油脂Determinationof8kindsoffattyacidsinoilsHUANGLong-di1,ZHENGJian-ming2,YAOWei-wu3,ZHANGDan-qing4(JiangsuSkyrayInstrumentCo.,Ltd.,JiangsuKunshan,215300Abstract:Amethodforthedeterminationof8kindsoffattyacidsinoilsbyGC-FIDwasdeveloped.Fattyacidsweremethylatedtofattyacidmethylethers(FAMEsbyKOHinmethanol.FAMEswerequantitivelymeasuredbyDB-WAXcapillarygaschromatography.Therecoveriesoffattyacidsrangedfrom91.45%~112.53%withrelativestandarddeviationslessthan8%,andthedetectionlimitswereintherangeof0.29μg/mL~1.10μg/mL.Withthehighaccurateandlowdetectionlimits,thismetodcouldbeusedinmanylaboratorydetectings.Keywords:fattyacid;gaschromatography;oil油脂是食物中3大产能营养素之一,其主要成分是高级脂肪酸(12个碳原子以上的甘油酯,是人类从饮食中摄取能量的主要来源,具有重要的生理作用。油脂中所含的亚油酸、亚麻酸为必需脂肪酸,人体自身不能合成,只能由食物供给[1]。但是,在最近10年来,乡居民的膳食、营养状况有了明显改善,但仍面临营养失衡的情况。由于膳食营养比例失衡所导致的儿童发育不良、贫血,成人肥胖、高血压、糖尿病、血脂异常等慢性病现象,依然十分严重。因此,膳食营养摄入必需考虑各种脂肪酸的搭配,尤其是必须脂肪酸一定要有足够的量[2]。可见,对油脂中脂肪酸成分和含量进行分析,对于科学评价油脂的营养价值,指导人们合理安排膳食具有重要意义。油脂中脂肪酸含量的测定方法主要是气相色谱法。脂肪酸的极性较强,虽然脂肪酸可以直接在极性固定相上进行分析,但是如果把脂肪酸衍生为脂肪酸甲酯就可以降低它们的沸点得到更为可靠和重复性的数据。常用的方法有三氟化硼法、三甲基氢氧化硫法、酯交换法等[3-6]。笔者采用氢氧化钾-甲醇进行甲酯化,用DB-WAX毛细管柱进行分离,优化了甲酯化的条件,对橄榄油、大豆油、花生油、菜籽油及猪油中的脂肪酸组成及含量进行了测定。1实验部分1.1仪器试剂仪器:气相色谱仪(GC5400,江苏天瑞仪器股份;恒温水浴锅;氢气发生器(AYH-300,北京天雨泽科技;空气发生器(AYK-2000北京天雨泽科技;微量进样器(10μL,安捷伦试剂:正己烷(色谱纯,百灵威;氢氧化钾(分析纯,江苏强盛化工;甲醇(色谱纯,SANFO;脂肪酸甲酯标准品,AccuStandard公司样品:橄榄油、大豆油、花生油、菜籽油、猪油均购自市场1..2脂肪酸甲酯混合标准溶液的配制准确称取一定量的豆蔻酸甲酯、棕榈酸甲酯、棕榈油酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯、花生酸甲酯标准品于同一容量瓶中,用正己烷溶解并定容至100mL,置于4℃冰箱保存备用。1.3样品处理称取0.1000g左右(精确到0.001g试样至具塞试管中,用移液管移取3mL正己烷溶解试样,再加入1.0mol/LKOH-CH3OH溶液2mL,放入恒温水浴锅中衍生20min后取出冷却至室温,加入2mL饱和氯化钠溶液,振摇1分钟,静置分层,取上清液过滤,用做气相色谱分析。1.4色谱条件色谱柱为DB-WAX毛细管柱(3m×0.320mm×0.25μm;载气为高纯氮气,1.40MPa,分流比10:1,柱温:200℃,进样口温度:250℃,检测器温度:280℃,进样量:1.0μL。2结果与讨论2.1甲酯化条件的选择2.1.1甲酯化温度的选择实验比较了甲酯化温度对反应的影响,选择30℃、40℃、50℃、60℃的甲酯化温度分别进行了实验。实验结果表明:甲酯化反应温度为50℃时,甲酯化反应效果相当,甲酯化反应温度为60℃时,正己烷易挥发影响实验结果的准确性,因此本实验选择甲酯化温度为50℃。2.1.2甲酯化时间的选择任何反应都需要一定的时间,因此时间是影响甲酯化程度的一个重要因素,时间太短,甲酯化反应不完全;时间太长,则影响了实验效率。因此本实验对不同时间下的响应值进行了比较,其结果见表1。表1不同甲酯化时间的响应值甲酯化时间10min20min30min40min响应值(Mv411751397385364968355626从表1可以看出,随着甲酯化时间的增长,响应值越来越小,因此本实验选择甲酯化时间为10min。2.1.3甲酯化试剂浓度的选择KOH-CH3OH的浓度是影响甲酯化程度的另一个重要因素,本实验对不同浓度的KOH-CH3OH溶液进行了比较,结果见表2。表2加入不同浓度KOH-CH3OH溶液时的响应值KOH-CH3OH浓度(mol/L0.40.81.01.2响应值(MV452349482986598519589965从表2可以看出,采用1.0mol/LKOH-CH3OH和1.2mol/LKOH-CH3OH,甲酯化反应效果相当,因此本实验选择KOH-CH3OH溶液的浓度为1.0mol/L。2.2工作曲线将1.2配制的脂肪酸甲酯混合标准溶液逐步稀释,在最优化色谱条件下注入气相色谱仪进行检测。以脂肪酸质量为横坐标,其相应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。各脂肪酸的线性方程、相关系数见表3。方法的检出限是依据线性最低浓度点,以3倍噪声比计算得出。表3八种脂肪酸的线性方程和相关系数检出限脂肪酸名称线性范围(ng线性方程相关系数(μg/mL豆蔻酸3.29~26.32y=91.028x+125.720.99960.29棕榈酸2.85~22.8y=97.232x+232.10.99950.38棕榈油酸3.32~26.56y=73.061x+192.730.99950.48硬脂酸3.02~23.52y=108.92x+215.30.99960.71油酸4.31~34.48y=60.893x+140.170.99940.63亚油酸3.42~27.36y=105.37x+258.320.99950.90亚麻酸4.26~34.08y=52.9x+158.230.99951.00花生酸2.94~23.52y=87.986x+68.40.99991.102.3回收率与精密度取橄榄油样品进行标准添加试验,每个添加量做3个平行实验,试验结果见表4。结果表明,脂肪酸的回收率在91.45%~107.55%之间,相对标准偏差小于1.12%~7.83%(n=3之间。说明该方法是可行的。表44种脂肪酸的加标回收实验结果2.4样品中八种脂肪酸含量的测定在确定的色谱条件下,分别对标样和样品进行色谱分析,利用保留值定性,外标法定量,图1、图2分别为标样和样品的色谱分离图。油脂的定量结果见表5.图1标样色谱图图2猪油脂肪酸甲酯气相色谱分离图注:(1C14:0;(2C16:0;(3C16:1;(4C18:0;(5C18:1;(6C18:2;(7C18:3;脂肪酸名称添加量(mg添加水平1回收率RSD%添加量(mg添加水平2回收率RSD%添加量(mg添加水平3回收率RSD%豆蔻酸1.64597.473.553.29107.553.894.9391.455.67棕榈油酸1.66106.627.833.32101.471.124.98103.526.47亚油酸1.7193.763.483.42101.0054.995.1398.424.23花生酸1.4799.651.522.94105.764.054.4195.095.11(8C20:0;表5不同油脂中各主要脂肪酸的含量油脂豆蔻酸(mg/g棕榈酸(mg/g棕榈油酸(mg/g硬脂酸(mg/g油酸(mg/g亚油酸(mg/g亚麻酸(mg/g花生酸(mg/g橄榄油0.15779.904.277.784615.4150.844.9662.859大豆油0.590586.430.238525.67194.65462.157.382.569花生油0.18475.77—19.11431.84389.590.48115.69菜籽油0.353526.3040.946.702369.56134.3461.412.653猪油10.16192.8911.6293.45294.18108.0610.261.93从表5结果可以看出,被测油脂中所含的主要成分是棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸。植物油脂中不饱和脂肪酸含量较高,其中花生油中油酸和亚油酸含量最高;而在猪油中棕榈酸含量则较多。3结语本方法采用甲酯化分析食用油中八种脂肪酸的含量,对甲酯化的温度、时间及试剂的浓度等条件做了选择性对比实验,确认了最佳实验方案。实验结果稳定,具有很好的回收率与重现性,可完全满足动植物油脂这几种脂肪酸检测的要求,为科学的评价油脂的营养提供了依据。参考文献:[1]郭莉萍,李正方,孟令惠.脂类与人体健康的关系[J].山西食品工业,1999,(3:3-6.[2]换油吃出心脑健康[OL]http://hi.baidu.com/lvwenchuang/blog/item/2869e6760b97850bb151b91f.html[3]韩菊,冯冬,何春,等.低酚棉籽中脂肪酸成分的研究[J].分析测试学报,1997,16(2:31-32.[4]杨德崇.气相色谱法测定油脂中的掺假物质[J].中国公共卫生,1993.(1:20-22.[5]可成友,吴晓芳.不饱和脂肪酸的气相色谱法同时测定[J].中国卫生检疫杂志,2005,15(5:528-535.一、各种原料制备生物柴油工艺路线1皂脚,酸化油工艺路线：皂脚酸化（H2SO4）酸化油H2SO4，甲醇酯化油层甲醇回收甲醇层中和碱炼（NaOH）NaOH分离，水洗，干燥酯交换甲醇回收KOH,甲醇油层甘油层回收甲醇水洗分离干燥回收甲醇生物柴油粗品精馏精制甲酯2脂肪酸为原料制备生物柴油工艺线：脂肪酸H2SO4，甲醇酯化油层甲醇回收甲醇层中和碱炼（NaOH）NaOH离心分离水洗干燥生物柴油粗品精制甲酯3棕榈油，潲水油，麻疯树油为原料制备生物柴油工艺线棕榈油，潲水油，麻疯树油NaOH，甲醇酯交换甘油层油层甘油层甲醇回收水洗柠檬酸离心分离，干燥生物柴油粗品精制甲酯二、生产反应过程中的实验工艺参数原料酯化反应甲醇硫酸反应时间反应温度酯化后静置时间碱炼温度水洗加水量水洗温度水洗后静置时间脂肪酸80%2%1.5h70°C10min80°C5%95°C10min皂脚酸化油80%2%1.5h70°C10min80°C10%95°C10min需加柠檬酸注：酯化水洗处理完属于静置分离，最好在这部分是离心分离对分离效果较好，比较能保证去除杂质能力以及后续水分干燥工艺的效果。原料酯交换反应棕榈油潲水油麻疯油皂脚酸化油甲醇KOH反应温度反应时间蒸甲醇压力蒸甲醇温度水洗量水洗温度水洗静置时间30%-40%1%50°C1h0.095MPa50°C10%95°C10min酌情加柠檬酸原料精馏工艺生物柴油粗品馏出温度填料真空度回流比柱高185-210℃玻璃弹簧最大真空10pa的泵。自动回流，＞11m三、产品展示中国水产科学2021年7月,18(4:929−935JournalofFisherySciencesofChina研究简报收稿日期:2021−07−30;修订日期:2021−10−12.基金项目:国家科技支撑计划资助项目(2021BAD94B05.作者简介:楼乔明(1981−,男,博士研究生,从事海洋生物活性物质研究.E-mail:louqm2005@163通信作者:薛长湖,博士生导师,教授.E-mail:xuech@DOI:10.3724/SP.J/1118.2021.00929南极磷虾脂肪酸组成及多不饱和脂肪酸质谱特征分析楼乔明,王玉明,刘小芳,李国云,薛长湖,李红艳中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛266003摘要:以10%浓硫酸-甲醇溶液为甲酯化试剂,采用气相色谱/质谱(GC/MS联用技术分析南极磷虾(Euphausuasu-perba的脂肪酸组成。根据GC/MS标准质谱数据库检索,结合有机质谱学规律,对多不饱和脂肪酸甲酯的裂解规律和质谱特征进行分析归纳,建立了特征离子确定其碳数和双键数,α离子和ω离子分别确定脂肪链羰基端和甲基端双键位置的方法。通过气相色谱/质谱分析,从南极磷虾中鉴定出27种脂肪酸,其中多不饱和脂肪酸13种,二十碳五烯酸(EPA和二十二碳六烯酸(DHA占总脂肪酸含量的40.64%,高于一般海洋鱼虾类,表明南极磷虾具有较高的营养价值和脂质开发潜力。本研究旨在为南极磷虾营养评价和南极磷虾油等产品的研制开发以及多不饱和脂肪酸甲酯的鉴定提供理论和参考依据。关键词:南极磷虾;脂肪酸;质谱特征;气相色谱/质谱法(GC/MS中图分类号:S91文献标志码:A文章编号:1005−8737−(202104−0929−07南极磷虾通常指的是南极大磷虾(Euphausuasuperba,属于节肢动物门(Arthropoda,软甲纲(Malacostraca,磷虾科(Euphausiidae,磷虾属(Euphausia,是地球上数量最大、繁衍最成功的单种生物资源之一。根据最新估计,南极磷虾的生物量为6.5亿~10.0亿t,每年可捕捞量高达1亿t,相当于目前全世界每年鱼类和其他甲壳类渔获量的总和[1-3]。南极磷虾因其巨大的生物量和潜在的渔业资源,以及在南极生态系统中的特殊地位而日益受到人们的关注。目前中国已把南极磷虾列为今后远洋渔业发展的主要开发种类之一,同时国内对南极磷虾的一般成分、矿物质、重金属以及蛋白质氨基酸组成等进行了系统的分析研究和营养学评价[4]。但目前国内对南极磷虾脂质的相关研究较少,对其脂肪酸组成分析尚未见报道。本研究采用气相色谱/质谱法对南极磷虾脂肪酸组成进行分析鉴定,同时对多不饱和脂肪酸甲酯的质谱特征进行归纳,旨在为南极磷虾营养评价和南极磷虾油等产品的研制开发以及多不饱和脂肪酸甲酯的鉴定提供理论和参考依据。1材料与方法1.1仪器与材料6890N型气相色谱仪、5973型质谱仪:美国Agilent公司;Laborota4000efficient旋转蒸发器:德国海道尔夫公司;AB135-S型精密电子分析天平:瑞士梅特勒-托利多公司;Milli-QSynthesis超纯水系统:美国Millipore公司。脂肪酸甲酯标准品购于Sigma公司;甲醇、三氯甲烷、正己烷等分析纯购于天津市科密欧化学试剂公司。南极磷虾(E.superba由日本水产株式会社提供,冷冻方式运至实验室,并贮藏于−30℃冰柜。930中国水产科学第18卷1.2实验方法1.2.1总脂提取南极磷虾去壳后,取尾部肌肉,经匀浆后用Folch法提取南极磷虾样品中的总脂。1.2.2样品甲酯化取南极磷虾总脂5~10mg,加入1mL10%浓硫酸-甲醇溶液,于60℃水浴甲酯化15min,冷却后加入正己烷1mL振荡,静置分层。取上清液供GC/MS分析。1.3分析条件1.3.1色谱条件HP-INNOWax石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25µm,高纯氦气为载气,采用恒压模式,压力为54kPa,分流比为25∶1。进样口温度为230,℃检测器温度为250,℃柱温以3/min℃由140℃升到210,℃然后在210℃下保持10min,整个分析过程为33min。1.3.2质谱条件GC/MS接口温度280,EI℃离子源,电离能量70eV,离子源温度230,℃扫描周期2.84次/s,质量扫描范围m/z50−500u。2结果与分析2.1多不饱和脂肪酸甲酯质谱特征三烯酸甲酯的质谱特征以十八碳三烯酸C18:3(n−3甲酯为例,其质谱图见图1。质谱断裂机制:十八碳三烯酸甲酯的分子离子峰为m/z292;羰基发生α断裂,产生[M-31]+离子261;双键迁移进行α断裂产生环状C6H7+离子m/z79,此离子为十八碳三烯酸甲酯的基峰离子(形成此基峰离子的条件为脂肪链中至少有3双键,且双键之间的间隔不得大于一个亚甲基[5];由此可以得到三烯酸甲酯的特征离子:m/z79,[M-31]+,分子离子M+。四烯及以上多不饱和脂肪酸甲酯的质谱特征以二十碳四烯酸C20:4(n−6甲酯和二十碳五烯酸C20:5(n−3甲酯为例,其质谱图见图2和图3。二十碳四烯酸C20:4(n−6甲酯和二十碳五烯酸C20:5(n−3甲酯两者的分子离子分别为m/z318和m/z316,但随着双键数目增加,碳链增长,分子离子强度减弱;双键迁移进行α断裂产生C6H7+离子m/z79;α断裂产生[M-29]+离子m/z289和m/z287;同时两者双键迁移进行α断裂产生较强的卓离子C7H7+m/z91[6],此离子可作为三烯酸甲酯与四烯及以上多不饱和脂肪酸甲酯的区别依据;由此可以得到四烯及以上多不饱和脂肪酸甲酯的特征离子:m/z79,m/z91,[M-29]+,分子离子M+。图19,12,15-十八碳三烯酸甲酯质谱图Fig.1Massspectrumof9,12,15-octadecatrienoicacidmethylester第4期楼乔明等:南极磷虾脂肪酸组成及多不饱和脂肪酸质谱特征分析931图24,7,11,14-二十碳四烯酸甲酯质谱图Fig.2Massspectrumof4,7,11,14-eicosatetraenoicacidmethylester图34,7,11,14,17-二十碳五烯酸甲酯质谱图Fig.3Massspectrumof4,7,11,14,17-eicosapentaenoicacidmethylester2.2多不饱和脂肪酸甲酯双键位置分析多不饱和脂肪酸(三烯及以上甲酯中碳链甲基端第一双键位置可以根据ω离子[Cn+5H2n+6]+进行判断(n为甲基端到第一双键位置的碳原子数,因此可以根据质谱图中离子m/z108、122、150和192的强弱来判断多不饱和脂肪酸的n-3型、n-4型、n-6932中国水产科学第18卷型和n-9型[7-9];而多不饱和脂肪酸甲酯中羰基端第一、二双键的位置可以根据α离子[Cn+6O2H2n+6]+进行判断(n为羰基端到第一双键位置的碳原子数,具体判断离子见表1[5,10-11]。从十八碳三烯酸C18:3(n−3甲酯的质谱图(图1可以看出ω离子为m/z108,表明其为n-3型脂肪酸;α离子为m/z236,表明羰基端前两个双键位于第9、12号碳原子,因此可以推算出十八碳三烯酸C18:3(n−3甲酯的3个双键依次位于第9、12和15号碳原子上,为9,12,15-十八碳三烯酸甲酯。表1多不饱和脂肪酸甲酯羰基端双键位置与判断离子Tab.1Diagnosticionsandpositionofthefirsttwodouble-bondsfromcarbonylgroupinPUFAmethylesters羰基端第一二双键位置positionofthefirsttwodouble-bondsfromcarbonylgroup∆4,7∆5,8∆6,9∆7,10∆8,11∆9,12∆10,13∆11,14α离子αion(m/z166180194208222236250264从二十碳四烯酸C20:4(n−6甲酯和二十碳五烯酸C20:5(n−3甲酯的质谱图(图2、图3中可以看出,两者的ω离子分别为m/z150和m/z108,表明两者分别为n-6型脂肪酸和n-3型脂肪酸;而α离子均为m/z180,表明两者的羰基端前两个双键均位于第5、8号碳原子上,因此可以推算出二十碳四烯酸C20:4(n−6甲酯的4个双键依次位于第5、8、11和14号碳原子上,为5,8,11,14-二十碳四烯酸甲酯;而二十碳五烯酸C20:5(n−3甲酯的5个双键依次位于第5、8、11、14和17号碳原子上,为5,8,11,14,17-二十碳五烯酸甲酯。2.3多不饱和脂肪酸甲酯定性综合多不饱和脂肪酸甲酯的质谱特征离子定性:(1离子m/z79为三烯及以上多不饱和脂肪酸甲酯的基峰离子,同时卓离子C7H7+m/z91的强弱可作为三烯酸甲酯与四烯及以上多不饱和脂肪酸甲酯的区别依据;(2通过分子离子可以确定多不饱和脂肪酸甲酯的碳数和双键数,同时当多不饱和脂肪酸甲酯的分子离子强度较弱时,[M-31]+可辅助判断三烯酸甲酯的分子离子,[M-29]+可辅助判断四烯及以上多不饱和脂肪酸甲酯的分子离子;(3ω离子和α离子可分别对多不饱和脂肪酸甲酯的甲基端和羰基端的双键位置进行分析。2.4南极磷虾脂肪酸成分的鉴定结果南极磷虾脂肪酸成分的GC/MS总离子流色谱图见图4。南极磷虾脂肪酸通过标准品对照和标准质谱数据库检索,同时结合特征离子和出峰顺序进行定性分析,按峰面积归一法进行定量,分析鉴定结果和百分含量列于表2。从南极磷虾肌肉的气相色谱/质谱图中共分析鉴定出27种脂肪酸,由C14−C22脂肪酸组成,主要脂肪酸为C16:0、C16:1(n−9、C18:1(n−9、C18:1(n−7、C20:5(n−3和C22:6(n−3。南极磷虾脂肪酸组成中不饱和脂肪酸占72.17%,其中多不饱和脂肪酸为47.98%,明显高于饱和脂肪酸(27.83%和单不饱和脂肪酸(24.19%。其中饱和脂肪酸6种,主要为C16:0(20.51%和C14:0(5.03%;单烯脂肪酸8种,主要为C18:1(n−9(10.82%、C18:1(n−7(6.95%和C16:1(n−9(4.29%;多不饱和脂肪酸13种,以C20:5(n−3(21.42%和C22:6(n−3(19.22%为主,且两者总含量高达40.64%。3讨论南极磷虾肌肉脂肪酸组成中饱和脂肪酸占27.83%,与虾蛄(25.3%~28.5%[12]相近,但略低于凡纳滨对虾(31.03%~31.89%[13]和中国对虾(33.69%[14]。南极磷虾肌肉饱和脂肪酸主要为C16:0(20.51%和C14:0(5.03%,但C18:0(0.88%含量较低;而虾蛄、凡纳滨对虾和中国对虾的饱和脂肪酸均以C16:0(12.26%~20.02%和C18:0(3.97%~11.90%为主,C14:0(0.47%~1.48%含量却相对较低。同时南极磷虾肌肉中3,7,11,15-四甲基十六烷酸含量为0.82%,表明南极磷虾肌肉对此多支链饱和脂肪酸具有一定的积累作用。南极磷虾肌肉中单不饱和脂肪酸为24.19%,与虾蛄和凡纳滨对虾含量相近,但显著高于中国第4期楼乔明等:南极磷虾脂肪酸组成及多不饱和脂肪酸质谱特征分析933图4南极磷虾肌肉脂肪酸成分的GC/MS总离子流色谱图Fig.4Totalionchromatogram(TICoffattyacidcomponentsfromEuphausuasuperbabyGC/MS表2南极磷虾脂肪酸成分的鉴定结果及其含量Tab.2IdentificationandcontentsoffattyacidscomponentsinEuphausuasuperbabyGC/MS序号number出峰时间/minretentiontime脂肪酸fattyacid特征离子characteristicions含量/%content14.87C14:074a,199,211,242d5.0325.33C14:1(n-555a,166,208,240d0.1036.39C15:074a,213,225,256d0.2548.46C16:074a,227,239,270d20.5158.81C16:1(n-955a,194,236,268d4.2969.01C16:1(n-755a,194,236,268d0.3079.36C17:074a,241,253,284d0.3489.91C16:2(n-467a,192,235,266d0.33910.373,7,11,15-TMHD74,101a,283,326d0.821010.80C16:3(n-379a,108b,208c,233,264d0.191111.79C16:4(n-379a,91,108b,166c,233,262d0.301