第37讲细胞工程

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3目的:按照人的意愿来改变细胞内的或获得细胞产品。

遗传物质细胞水平或细胞器水平2植物细胞的全能性1概念:具有某种生物的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,在理论上,每个生物细胞都具有的特点。

2原因:细胞内含有本物种的。

3表现条件:具有完整的细胞结构,处于状态,提供一定的和其他适宜的外界条件。

全部遗传信息全能性全部遗传信息离体营养、激素1一般来说,随着细胞分化程度的不断提高,细胞的全能性逐渐降低生殖细胞较特殊,其分化程度高,全能性也高。2体细胞的全能性:分化程度低的>分化程度高的;细胞分裂能力强的>细胞分裂能力弱的;幼嫩的细胞>衰老的细胞。3植物组织培养1原理:植物细胞的。

2操作过程图图中①表示,②表示,A表示,B表示丛芽或胚状体。

3培养条件:和人工控制条件。

外植体AB植物体图12-37-1全能性脱分化再分化愈伤组织无菌4植物体细胞杂交技术1概念:指将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。

2原理:细胞膜的和植物细胞的。

杂种细胞流动性全能性3过程图12-37-2纤维素酶、果胶原生质体物理聚乙二醇PEG细胞壁4意义:克服的障碍,培育作物新品种。

5植物细胞工程的应用1植物繁殖的新途径①微型繁殖:用于优良品种的植物组织培养技术。

优点:保持优良品种的;高效快速地实现种苗的大量繁殖。

远缘杂交不亲和快速繁殖遗传特性②作物脱毒:一般选取作物分生区附近如进行组织培养,获得脱毒苗。

③人工种子:以植物组织培养得到的、不定芽、顶芽、腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子,可以解决某些植物结实率低、繁殖困难等问题。

茎尖胚状体2作物新品种的培育①单倍体育种:正常植株→取花粉→经培养→形成单倍体幼苗→经处理→正常二倍体植株。

②突变体的利用a产生:植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断的,因此容易受到培养条件和外界压力如射线、化学物质等的影响而产生突变。

b利用:筛选对人们,进而培育新品种。

花药离体秋水仙素分生状态有用的突变体3细胞产物的工厂化生产:利用技术生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。

细胞产物的工厂化生产利用的是细胞的增殖原理,只需要将外植体培养到愈伤组织阶段即可。植物组织培养正误辨析1植物体内的细胞没有表现出全能性,而是分化成各种组织和器官,其原因是所含基因不同。 2棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现植物细胞的全能性。 3韧皮部细胞是高度分化的植物细胞,用韧皮部细胞进行组织培养形成愈伤组织。 ×植物体内的细胞没有表现出全能性,其原因是基因的选择性表达。√×韧皮部细胞具有全能性,用韧皮部细胞进行组织培养可形成完整植株。4植物体细胞融合完成的标志是细胞核发生融合。 5在愈伤组织培养基中加入促使细胞融合的诱导剂,可获得染色体数目加倍的细胞。 6植物的分生区附近病毒极少,甚至无病毒。 ×√植物体细胞融合完成的标志是产生新的细胞壁。×由于植物细胞有细胞壁,故在愈伤组织培养基中加入促使细胞融合的诱导剂,不能获得染色体数目加倍的细胞。1植物组织培养过程中的条件控制①无菌:培养基和接种器械灭菌、培养材料消毒。②固体培养基:大多由无机营养成分、有机营养成分、激素、琼脂四部分组成。③光照:脱分化阶段不需要光照,再分化阶段需要光照。④激素调控:培养基中生长素和细胞分裂素的比例调控组织培养进程:生长素与细胞分裂素的比值高,有利于根分化,抑制芽的形成;比值低,有利于芽分化,抑制根形成;比例适中,有利于愈伤组织生长。名称植物组织培养植物体细胞杂交原理植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性过程

2植物组织培养和植物体细胞杂交比较联系植物体细胞杂交技术包括植物细胞融合和植物组织培养两个过程,植物组织培养是植物体细胞杂交的一个环节,融合的植物体细胞只有通过植物组织培养才能发育成完整的个体生命观念清概念明结论1辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图12-37-3。以下叙述不正确的是 A植物组织培养的培养基中需要加入有机营养和植物激素B用高压蒸汽灭菌法处理外植体和培养基C①和②分别表示脱分化和再分化过程D果实细胞的基因型与外植体基因型相同B图12-37-3植物组织培养所用的固体培养基大多数由无机营养、有机营养、植物激素和琼脂四部分组成,A正确;培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌,外植体需要用酒精溶液和次氯酸钠溶液消毒处理,若用高压蒸汽灭菌法处理外植体,外植体将失去活性,B错误;①和②分别表示脱分化和再分化过程,C正确;植物组织培养属于无性繁殖,能保持亲本的优良性状,故果实细胞的基因型与外植体基因型相同,D正确。图12-37-32下列有关植物体细胞杂交技术的说法中,不正确的是A可以通过酶解法先获得有活力的原生质体,再完成原生质体的融合B人工诱导原生质体融合时可用物理或化学的方法,不能利用病毒进行诱导C利用此技术获得的杂种植株一定能同时表现出两个亲本的所有优良性状D植物体细胞杂交的意义在于克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍C可以通过用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁的方法获得有活力的原生质体,再完成原生质体的融合,A正确;诱导植物原生质体融合可采用物理离心、振动和电激和化学聚乙二醇的方法,但不能用灭活的病毒,B正确;2下列有关植物体细胞杂交技术的说法中,不正确的是A可以通过酶解法先获得有活力的原生质体,再完成原生质体的融合B人工诱导原生质体融合时可用物理或化学的方法,不能利用病毒进行诱导C利用此技术获得的杂种植株一定能同时表现出两个亲本的所有优良性状D植物体细胞杂交的意义在于克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍C利用植物体细胞杂交技术获得的杂种植株,不一定能同时表现出两个亲本的优良性状,C错误;植物体细胞杂交技术最大的优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍,培养作物新品种,D正确。素养综合重知识提能力3植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题。1植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比,这种微型繁殖技术的特点有答出2点即可。

能保持植物原有的遗传特性,繁殖速度快2通过组织培养技术,可把植物组织细胞培养成胚状体,再通过人工种皮人工薄膜包装得到人工种子如图12-37-4所示,这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是。人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质,因此应含有植物激素、和等几类物质。

图12-37-4有利于胚状体进行呼吸作用矿质元素糖3用脱毒苗进行繁殖,可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗,可以选取植物的进行组织培养。

4植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是

用流程图表示。茎尖含目的基因的细胞

愈伤组织

小植株4红豆杉因其次生代谢产物紫杉醇的显著治癌效果而倍受关注。为了获得紫杉醇,可以先用植物外植体获得愈伤组织,然后在生物反应器中悬浮培养。请回答下列问题:1以该植物的幼茎、树皮、针叶作为外植体,在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是。研究发现,用幼嫩茎段比成年老枝更易产生愈伤组织,且时间早,诱导率高,原因是幼嫩茎段细胞分化程度较。

幼茎、树皮、针叶的细胞都具有全能性,在一定条件下能发育成完整的植株低通过植物组织培养获得试管苗,利用的原理是植物细胞的全能性,即植物细胞在一定条件下能发育成完整的植株;幼嫩茎段细胞分化程度较低,恢复全能性较容易,因此更易产生愈伤组织。2可采用部位进行植物组织培养获得脱毒的红豆杉。与从红豆杉树皮中直接提取相比,通过茎段组织培养获得的愈伤组织细胞悬浮培养生产紫杉醇的优点是。

茎尖可以在生物反应器中大规模培养细胞,并且通过控制培养条件使培养细胞合成大量紫杉醇茎尖所含病毒极少,甚至无病毒,可进行植物组织培养获得脱毒的红豆杉;从红豆杉树皮中直接提取紫杉醇产量低,且对红豆杉破坏严重。通过茎段组织培养获得的愈伤组织细胞悬浮培养生产紫杉醇可以在生物反应器中大规模培养细胞,并且通过控制培养条件使培养细胞合成大量紫杉醇。3二倍体愈伤组织细胞经处理,会产生染色体数目加倍的细胞。

秋水仙素或低温二倍体愈伤组织细胞经秋水仙素或低温处理,抑制前期纺锤体的形成,会产生染色体数目加倍的细胞。4不同有机溶剂及其组合作为浸提溶剂对紫杉醇得率的影响如图12-37-5所示:注:1-甲醇;2-乙醇;3-丙酮;4-二氯甲烷;5-乙酸乙酯;6-甲醇-乙醇;7-甲醇-丙酮;8-甲醇-二氯甲烷;9-甲醇-乙酸乙酯;10-乙醇-丙酮;11-乙醇-二氯甲烷;12-乙醇-乙酸乙酯;13-丙酮-二氯甲烷;14-丙酮-乙酸乙酯;15-二氯甲烷-乙酸乙酯图12-37-5从溶剂单独和混合提取效果的角度分析,可得出的结论:单一溶剂作为提取紫杉醇的浸提溶剂时,的提取效果最佳;溶剂混合浸提时,作为浸提溶剂提取紫杉醇效果最好。

甲醇乙醇-二氯甲烷分析柱形图中1~5组,可知单一溶剂作为提取紫杉醇的浸提溶剂时,甲醇的提取效果最佳;分析柱形图中6~15组,溶剂混合浸提时,乙醇-二氯甲烷作为浸提溶剂提取紫杉醇效果最好。考点二动物细胞培养与核移植技术基础·自主诊断素养·全面提升 1动物细胞培养——动物细胞工程技术的基础1概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和。

2原理:。

单个细胞增殖细胞增殖3过程取健康、幼龄动物组织块

分散成单个细胞:剪碎,用或处理一段时间

制成细胞悬液

原代培养:具有和的特点

胰蛋白酶胶原蛋白酶贴壁生长接触抑制二倍体核型不死性4培养条件①无菌、无毒的环境:对和所有培养用具进行无菌处理;添加;定期更换培养液以清除。

②营养:除正常的有机和无机营养外,还需加入等一些天然成分。

③温度和pH:适宜温度为哺乳动物,pH为。

④气体环境:95%空气加维持培养液的pH。

培养液抗生素代谢产物血清、血浆365±05℃72~745%CO25应用①生产生物制品:如病毒疫苗、干扰素等。②应用于基因工程:动物细胞是基因工程技术中常用的。

③应用于检测,判断某种物质的毒性。

④用于生理、病理、药理等方面的研究,如用于筛选抗癌药物等。受体细胞有毒物质2动物体细胞核移植技术和克隆动物1概念:将动物的一个细胞的,移入一个已经去掉细胞核的中,使其重组并发育成一个新的胚胎,最终发育为动物个体。

2原理:。

3核移植的类型:和体细胞核移植。体细胞核移植难度明显高于胚胎细胞核移植,原因是动物胚胎细胞,恢复其相对容易。

细胞核卵母细胞动物体细胞核具有全能性胚胎细胞核移植分化程度低全能性4动物体细胞核移植技术的过程图12-37-6细胞培养重组细胞供体5应用①畜牧生产中:加速家畜进程,促进优良畜群繁育。

②保护濒危物种方面:增加动物的存活数量。③医药卫生领域:转基因克隆动物作为,生产医用蛋白。

④治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为的供体等。

6存在问题:、克隆动物存在健康问题、克隆动物食品的安全性问题等。

遗传改良生物反应器异种移植成功率低正误辨析1可用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞,并稀释制成细胞悬液。 2培养保留接触抑制的细胞,在培养瓶壁上可形成多层细胞。 3体细胞核移植技术通常采用MⅡ中期的卵母细胞作为受体细胞。 ×可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织分散成单个细胞,因为胃蛋白酶作用的最适pH为15~22。×贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时,就停止分裂增殖,因此培养瓶壁上只能形成单层细胞。√4细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中。 5克隆动物是对提供体细胞核的动物进行了完全复制。 ×克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同,但不是完全相同,还有一小部分性状受细胞质基因控制。细胞的癌变一般发生于50代后的细胞培养过程中。×1动物细胞培养中两组概念的辨析1细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞进行有丝分裂,数量不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。2原代培养与传代培养①原代培养:细胞悬液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养。原代培养的细胞核型正常。②传代培养:原代培养的细胞生长、增殖一定时间后,会由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭,影响细胞的生长,因此需要重新用胰蛋白酶等处理,进行分瓶扩大培养,即传代培养。一般情况下,细胞传至10~50代后,会出现核型异常,细胞增殖会明显减缓,有的细胞甚至会死亡。2植物组织培养和动物细胞培养的比较项目植物组织培养动物细胞培养原理植物细胞的全能性、细胞的增殖细胞的增殖取材较幼嫩的细胞、组织或器官胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织培养基成分无机盐、蔗糖、维生素、植物激素、琼脂等葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、抗生素、动物血清等项目植物组织培养动物细胞培养结果可以获得植株,也可以获得大量细胞只能获得大量细胞,不能得到生物个体相同点都需要人工条件下的无菌操作;都需要适宜的温度、pH等条件3关于核移植技术的几个问题1选MⅡ中期卵母细胞作为受体细胞的原因:①此类细胞体积大,易于操作;②卵黄多,营养物质丰富,可为发育提供充足的营养;③卵母细胞的细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。2克隆动物是由重组的细胞经培养而来的,该重组细胞的细胞质基因提供细胞核的亲本,其遗传物质来自两个亲本。3核移植中供体动物、提供卵母细胞的动物、代孕动物和克隆动物之间的关系:克隆动物绝大部分性状与供体动物相同,少数性状与提供卵母细胞的动物相同,与代孕动物的性状无遗传关系。4动物体细胞核移植技术克隆从生殖方式的角度看属于无性生殖,重组细胞相当于受精卵,需要动物细胞培养和胚胎工程技术的支持。生命观念清概念明结论1图12-37-7表示动物细胞培养过程,下列有关该过程的说法,正确的是 A乙中进行动物细胞培养时应通入适量的CO2以调节pHB宜用胃蛋白酶将甲中的动物组织块分散为单个的细胞C甲中用于培养的动物细胞宜取自成年动物D丙中细胞大量繁殖后,细胞之间相互接触能促进细胞的分裂A图12-37-7动物细胞培养过程中,需要加入一定量的CO2以调节培养液的pH,A正确;将甲中的动物组织块分散为单个的细胞应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶,不能用胃蛋白酶,B错误;甲中用于培养的动物细胞宜取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织,C错误;丙中细胞大量繁殖后,细胞之间相互接触能抑制细胞的分裂,D错误。图12-37-72下列对动物核移植技术的描述正确的是A提供细胞核和去核卵母细胞的动物都应为雌性B去除卵母细胞细胞核的操作必须在电子显微镜下进行C成熟体细胞核移植比胚胎细胞核移植的难度大D通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核C提供细胞核的动物不一定要为雌性,A错误;去除卵母细胞细胞核时,可采用显微操作法,不需要电子显微镜,B错误;体细胞的全能性低于胚胎细胞,所以哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植,C正确;克隆动物的核基因完全来自供体动物,而细胞质基因则来自受体细胞,因此克隆动物遗传物质来自供体细胞核和受体细胞的细胞质,D错误。素养综合重知识提能力3请回答下列有关细胞培养的问题:1动物细胞培养利用填“液体”或“固体”培养基并在的培养箱中进行,这是对动物体的的模拟。用于植物组织培养的固体培养基大多由无机营养成分、有机营养成分、激素和四部分组成;利用发酵罐进行人参、三七等细胞产物的工厂化生产时,用填“液体”或“固体”培养基。

液体无菌的含5%CO2的恒温内环境琼脂液体动物细胞在体内生活在内环境中,因此培养时利用液体培养基并在无菌的含5%CO2的恒温的培养箱中进行;用于植物组织培养的固体培养基大多由无机营养成分、有机营养成分、激素和琼脂四部分组成;利用发酵罐进行人参、三七等细胞产物的工厂化生产时,采用液体培养基。2在动物细胞培养过程中,通常在条件下保存细胞,因为在该条件下,。

低温细胞中的酶的催化活性降低,细胞新陈代谢的速率降低低温条件下,细胞中的酶催化活性降低,细胞新陈代谢的速率降低,有利于保存。3在动物细胞培养过程中,将动物组织块分散成单个细胞、使贴壁生长的细胞脱落都常用处理。

胰蛋白酶在动物细胞培养过程中,将动物组织块分散成单个细胞、使贴壁生长的细胞脱落都常用胰蛋白酶处理。4图12-37-8表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物二倍体的流程。回答下列问题:1图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用的方法。②代表的过程是。

图12-37-8或Y显微操作胚胎移植二倍体哺乳动物的性别决定方式为Y型,A的性别未知,其性染色体组成可能为,也可能为Y。核移植时,要通过显微操作去除卵母细胞中的核。早期胚胎可通过胚胎移植移入受体子宫中。2经过多次传代后,供体细胞中的稳定性会降低。因此,选材时必须关注传代次数。

3若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是。

遗传物质卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响2一般来说,细胞传代培养至10~50代左右时,增殖会逐渐缓慢,以至于完全停止,这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。3克隆动物的遗传物质主要来自于供体核,但卵母细胞的线粒体中也含有一部分遗传物质。4与克隆羊“多莉利”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了。

动物已分化体细胞的细胞核具有全能性克隆动物的成功获得证明动物已分化体细胞的细胞核具有全能性。考点三动物细胞融合及单克隆抗体基础·自主诊断素养·全面提升 1动物细胞融合1概念:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2条件:需要用聚乙二醇PEG、或电激等诱导。

3原理:。

4结果:形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为。

灭活的病毒细胞膜的流动性杂交细胞5意义:突破了方法的局限,使成为可能;成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,为制造开辟了新途径。

2单克隆抗体1传统抗体的获得①方法:向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生;从动物中分离所需抗体。

②缺陷:产量低、纯度低、。

有性杂交远缘杂交单克隆抗体抗体血清特异性差2单克隆抗体的制备①制备原理细胞特点B淋巴细胞能产生

,但不能

骨髓瘤细胞能

,但不能

融合细胞既能

,又能

单一抗体无限增殖无限增殖产生抗体产生抗体无限增殖②过程图12-37-9杂交瘤细胞能产生所需抗体③优点:特异性强、,可大量制备。

④用途:作为;用于治疗疾病和。

灵敏度高诊断试剂运载药物正误辨析1动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。 2动物细胞融合采用的诱导方法与植物原生质体融合采用的方法相同。3单克隆抗体是指单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体。 √×动物细胞融合特有的诱导方法是利用灭活的病毒。×单克隆抗体是指单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体。4经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞可用于单克隆抗体的生产。 5治疗癌症的“生物导弹”制备原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞。 ×经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞。√单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种融合细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和进行抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞生命观念清概念明结论1下列关于单克隆抗体制备的说法,正确的是 A将特定抗原注射到小鼠体内,可以从小鼠血清中获得单克隆抗体淋巴细胞在体外培养时可分泌单克隆抗体淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤细胞D筛选出杂交瘤细胞后,需利用特定抗原再次筛选分泌单克隆抗体的细胞D单克隆抗体的制备过程是向小鼠体内注射特定抗原,在小鼠体内产生特定的B淋巴细胞,提取B淋巴细胞在体外与骨髓瘤细胞进行诱导融合,会形成三种类型的融合细胞两两融合:B细胞和B细胞融合形成的细胞、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合形成的细胞、B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,在特定的选择培养基上筛选出杂交瘤细胞,第一步筛选后再用特定抗原再次筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞,A、B、C错误,D正确。2将人细胞与小鼠细胞融合,培养出的杂交细胞可能会随机丢失来自人细胞的染色体。在丢失人的1号染色体的融合细胞中,不能合成人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中不合理的是 A与人和小鼠细胞相比,融合细胞发生了遗传物质的改变B研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术C融合细胞经过培养,能实现细胞的全能性D尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上C融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体,即发生了遗传物质的改变,A正确;选择适当的培养基用来筛选融合细胞,常用PEG、灭活的病毒和电激来诱导细胞融合,B正确;该过程没有将杂交细胞培养成个体,不能体现细胞的全能性,C错误;在丢失人的1号染色体的融合细胞中,不能合成人的尿苷单磷酸激酶,说明尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上,D正确。素养综合重知识提能力3如图12-37-10为细胞融合技术的一些过程,回答下列相关问题:1从A细胞和B细胞到C细胞的过程中,必须用化学方法处理。

图12-37-10PEG或聚乙二醇细胞融合中常用的化学方法是通过聚乙二醇作为诱导剂进行诱导融合。2若A、B细胞为植物细胞,则这样的细胞已经用酶降解了,这种酶可能是酶,由此处理A和B细胞生成的结构称为。

图12-37-10细胞壁纤维素酶和果胶原生质体植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,可用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁得到原生质体。3若由D细胞培育成植株,可用技术,这一培养过程要经过和两个阶段。

图12-37-10植物组织培养脱分化再分化可通过植物组织培养技术将杂交细胞D培养成植株,该过程包括脱分化和再分化。4若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为B淋巴细胞,那么D细胞称为细胞,由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程,称为过程。这种细胞既能无限繁殖,又能产生。

图12-37-10杂交瘤克隆特异性抗体B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞为杂交瘤细胞D,特点是既能无限繁殖,又能产生特异性抗体。5若A细胞为人细胞,B细胞为鼠细胞,并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质,在形成C细胞时,细胞一半发红色荧光,一半发绿色荧光,到D细胞阶段,两种颜色的荧光均匀分布,请解释原因:。

图12-37-10细胞膜上的蛋白质是可以移动的或细胞膜具有一定的流动性由于细胞膜具有一定的流动性,最终导致两种颜色的荧光均匀分布。4某研究者用抗原A分别免疫3只同种小鼠、Y和,每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价能检测出抗原—抗体反应的血清最大稀释倍数,结果如图12-37-11所示。若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞染色体数目为40条,并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞染色体数目为60条按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。图12-37-11回答下列问题:1制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的、Y、这

3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是小鼠,理由是。

图12-37-11四YY小鼠的血清抗体效价最高据图分析,第四次免疫后Y小鼠的血清抗体效价达到16000以上。达到要求后的、Y、这3只小鼠中,Y小鼠的血清抗体效价最高,最适合用于制备B淋巴细胞。2细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有,体系中出现多种类型细胞的原因是。

图12-37-11B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的,且融合率达不到100%融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外,还有骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的自身融合产物,由于细胞融合是随机的,且融合率达不到100%,故体系中会出现多种类型的细胞。3杂交瘤细胞中有个细胞核,染色体数目最多是条。

图12-37-111100杂交瘤细胞形成后,由于核膜具有流动性,故小鼠的已免疫的B淋巴细胞的细胞核与其骨髓瘤细胞的细胞核会融合形成一个杂交的细胞核,因此染色体数目最多是100条。4未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是。

图12-37-11不能无限增殖未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后,仍然是不能无限增殖的细胞,同时B淋巴细胞不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次“危机”而达到细胞系水平。真题·新题五年真题培养胡萝卜根组织可获得试管苗,获得试管苗的过程如图12-37-12所示。回答下列问题。1利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株,这是因为植物细胞具有。

图12-37-12全能性或答:形成完整植株所需的全部基因利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株,这是因为植物细胞具有全能性。2步骤③切取的组织块中要带有形成层,原因是。

图12-37-12形成层容易诱导形成愈伤组织步骤③中切取带有形成层的组织块是因为其容易被诱导形成愈伤组织。3从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基,其原因是

。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的过程,最终可形成试管苗。

图12-37-12诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同分化或答:再分化⑤脱分化和⑥再分化过程使用的培养基不同,诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的再分化过程,最终可形成试管苗。4步骤⑥要进行照光培养,其作用是。

图12-37-12诱导叶绿素的形成,使试管苗能够进行光合作用步骤⑥为再分化过程,该过程要进行照光培养,其作用是诱导叶绿素的形成,使试管苗能进行光合作用。5经组织培养得到的植株,一般可保持原品种的,这种繁殖方式属于繁殖。

遗传特性无性经组织培养得到的植株,一般可保持原品种的遗传特性,这种繁殖方式属于无性繁殖。新题精选1生物技术发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野马刚死亡,以下提供的“复生”野马个体的方法中能够成功的是 A将野马的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体B将野马的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体C取出野马的体细胞核移植到母家马的去核卵细胞中,经孕育培养成新个体D将野马基因导入家马的受精卵中,培育成新个体C由于动物体细胞的全能性受到限制,目前仍无法利用组织培养技术将动物体细胞直接培育成新个体,A错误;目前仍无法利用动物细胞融合技术培育动物新个体,且将野马的体细胞两两融合得到杂交细胞,该细胞的染色体数目是野马体细胞的两倍,遗传物质发生了改变,B错误;取出野马的体细胞核移植到母家马的去核卵细胞中,经孕育培养成新个体,这属于核移植技术,是目前较成熟的技术,能够“复生”野马,C正确;将野马基因导入家马的受精卵中,培育成的新个体为转基因马,不能“复生”野马,D错误。2人绒毛膜促性腺激素HCG是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,可通过孕妇血液循环而随尿排出,利用HCG单克隆抗体诊断是否妊娠的灵敏度很高,回答下列问题:1在人体内,糖蛋白可分布在体液、等处,其中后者的糖蛋白具有至少答两点作用。

细胞膜润滑、识别在人体内,糖蛋白可分布在体液和细胞膜的外表面等处;细胞膜上的糖蛋白能参与细胞间的信息交流识别,还有润滑和保护作用。2动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,利用了。动物细胞融合可利用灭活的病毒诱导,灭活是指。

细胞膜的流动性用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理都是细胞膜的流动性;灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构。3在制备单克隆抗体过程中获得杂交瘤细胞的目的是解决等问题。从杂交瘤细胞中筛选获得足够数量能分泌所需抗体的细胞需要进行。

淋巴细胞不能无限增殖、小鼠骨髓瘤细胞不能产生抗体克隆化培养和抗体检测浆细胞不能无限增殖,骨髓瘤细胞不能产生抗体,通过细胞融合获得的杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生专一的抗体;获得足够数量能分泌所需抗体的细胞需要进行克隆化培养和抗体检测。4在体外培养杂交瘤细胞时,需要控制其培养条件,若采用无血清培养,则需要在基本培养基中添加。

一些已知的促进细胞生长和增殖的物质血清中存在促进细胞生长和增殖的物质,在体外培养杂交瘤细胞时,若采用无血清培养,则需要在基本培养基中添加一些已知的促进细胞生长和增殖的物质。1P36培养基的组成:固体培养基大多数都是由无机营养成分、有机营养成分、激素、琼脂四部分组成。2P40化学诱变一般是利用一些化学诱变剂进行处理,常见的有甲基磺酸乙酯和叠氮化钠等。物理诱变一般采用电离辐射处理。3P422,4-D常用于植物愈伤组织的诱导和生长,但它趋向于抑制植物形态的发生,所以在分化培养基中很少利用。4P49目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法。5P52