病原生物学与免疫学-第十四章课件

第十四章真菌第十四章第一节真菌概述第一节第一节真菌概述真菌（fungus）是一类细胞高度分化，具有典型细胞核和完整细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物。真菌少数为单细胞，大多数为多细胞。真菌在自然界分布广泛，种类繁多，有10万多种，多数对人类有益，已广泛应用于医药工业、食品、化工和农业生产，如用于生产抗生素、酿酒、生产酶类制剂等。可引起人类疾病的约300余种，包括致病性真菌、条件致病性真菌、产毒及致癌真菌等。第一节真菌概述真菌（fungus）是一类细胞高度分化，具有第一节真菌概述近年来，由于广谱抗生素、免疫抑制剂、激素、抗肿瘤药物和放射治疗的大量应用，器官移植、介入性治疗技术的开展，艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等引起机体免疫功能低下等，导致真菌病发病率，尤其是机会致病性真菌引起的感染率明显上升，已引起医学界的高度重视。第一节真菌概述近年来，由于广谱抗生素、免疫抑制剂、激素、抗第一节真菌概述一、生物学性状.（一）形态与结构真菌的细胞结构比细菌复杂，细胞壁不含肽聚糖，主要由多糖构成，此外还含有少量的蛋白质和脂质。真菌按形态分为单细胞真菌和多细胞真菌两类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，以出芽方式繁殖，芽生孢子成熟后脱落成独立个体，如酵母菌或类酵母菌。多细胞真菌有菌丝和孢子，菌丝伸长分枝，交织成团称丝状菌，又称霉菌，如皮肤癣菌。第一节真菌概述一、生物学性状.（一）形态与结构第一节真菌概述一、生物学性状1．菌丝（hypha）真菌的孢子在环境适宜的情况下长出芽管，逐渐延长呈丝状，称菌丝。菌丝又可长出许多分枝，交织成团称菌丝体（mycelium）。菌丝按功能可分为三类：①营养菌丝：伸入培养基或被寄生的组织中吸收营养的菌丝体。②气生菌丝：向上生长，暴露于空气中的菌丝体。③生殖菌丝：能产生孢子的气生菌丝。第一节真菌概述一、生物学性状1．菌丝（hypha）真菌的孢第一节真菌概述一、生物学性状1．菌丝（hypha）菌丝按结构可分为两类：①无隔菌丝：菌丝中无横隔将其分段，整条菌丝是一个细胞，含有多个核，是一种多核单细胞。②有隔菌丝：菌丝间隔一定距离由横隔或隔膜将其分隔成多个细胞，每一个细胞含有一个至数个核。隔膜中有小孔，可允许胞质流通。第一节真菌概述一、生物学性状1．菌丝（hypha）菌丝按结第一节真菌概述一、生物学性状菌丝有多种形态，如结节状、螺旋状、球拍状、梳状、鹿角状等。不同的真菌有不同形态的菌丝，故菌丝形态有助于真菌的鉴别。第一节真菌概述一、生物学性状菌丝有多种形态，如结节状、螺旋第一节真菌概述一、生物学性状2．孢子（spore）孢子是真菌的繁殖器官，一条菌丝可长出多个孢子。孢子在适宜环境条件下可发育为菌体细胞或发芽长出芽管，并逐渐发育成菌丝和菌丝体。真菌孢子与细菌的芽胞不同，它的抵抗力不强，60～70℃即可将其杀死。第一节真菌概述一、生物学性状2．孢子（spore）孢子是真第一节真菌概述一、生物学性状2．孢子（spore）真菌孢子分有性孢子与无性孢子两种。有性孢子是由同一菌体或不同菌体上的2个细胞融合经减数分裂形成；无性孢子是生殖菌丝上的细胞分化或出芽生成。无性孢子根据形态分为叶状孢子、分生孢子和孢子囊孢子三种。第一节真菌概述一、生物学性状2．孢子（spore）真菌孢子第一节真菌概述一、生物学性状叶状孢子是由单细胞真菌的菌体细胞或多细胞真菌的生殖菌丝细胞直接形成，它又可以分为三种类型：①芽生孢子：由单细胞真菌的菌体细胞或多细胞真菌的生殖菌丝细胞出芽形成的圆形或卵圆形孢子。芽生孢子长到一定大小即与母体细胞脱离，若不脱离则形成假菌丝。（1）叶状孢子第一节真菌概述一、生物学性状叶状孢子是由单细胞真菌的菌体细第一节真菌概述一、生物学性状②厚膜孢子：由单细胞真菌的菌体细胞，或多细胞真菌生殖菌丝顶端或中间的细胞变圆、胞质浓缩、胞壁加厚形成的孢子。真菌在不利环境中形成厚膜孢子，抵抗力增强；环境有利时，厚膜孢子又可出芽繁殖。（1）叶状孢子③关节孢子：生殖菌丝细胞壁增厚、分化，出现隔膜，断裂成长方形的几个节段并排列成链状，形成关节孢子，多出现于陈旧培养物中。第一节真菌概述一、生物学性状②厚膜孢子：由单细胞真菌的菌第一节真菌概述一、生物学性状分生孢子由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。根据大小、组成和细胞的多少又可分为两类：①大分生孢子：体积较大，由多个细胞组成，常呈梭状、棍棒状、梨状等。②小分生孢子：体积较小，一个孢子只有一个细胞，有球形、卵圆形、梨形及短棍棒状等。（2）分生孢子第一节真菌概述一、生物学性状分生孢子由生殖菌丝末端的细胞分第一节真菌概述一、生物学性状生殖菌丝末端膨大形成孢子囊，囊内含有许多孢子，孢子成熟后破囊而出，即为孢子囊孢子，如毛霉菌、根霉菌的孢子囊孢子。（3）孢子囊孢子第一节真菌概述一、生物学性状生殖菌丝末端膨大形成孢子囊，囊第一节真菌概述一、生物学性状.（二）培养特性真菌的营养要求不高，在一般的细菌培养基上能生长。实验室培养常用沙保培养基（Sabouraud’smedium），其成分相对简单，主要由蛋白胨、葡萄糖和琼脂组成。第一节真菌概述一、生物学性状.（二）培养特性第一节真菌概述一、生物学性状.（二）培养特性由于真菌在不同的培养基上形成的菌落形态差异较大，为了统一标准，鉴定真菌时均以沙保培养基上形成的菌落形态为准。真菌依靠菌丝和孢子繁殖。除有性繁殖外，无性繁殖也是真菌的主要繁殖方式，有芽生、裂殖、萌管和隔殖四种形式。多数病原性真菌生长缓慢，特别是皮肤癣菌，需培养1～4周。酵母型真菌生长较快，一般经24～48小时可形成肉眼可见的菌落。第一节真菌概述一、生物学性状.（二）培养特性第一节真菌概述一、生物学性状酵母型菌落是单细胞真菌的菌落形式，与一般细菌菌落相似。菌落光滑湿润，柔软致密，多为乳白色，如新生隐球菌的菌落。1．酵母型菌落类酵母型菌落是类酵母型单细胞真菌形成的菌落，菌落特征类似酵母型菌落，但可见假菌丝伸入培养基中，如白假丝酵母菌菌落。2．类酵母型菌落第一节真菌概述一、生物学性状酵母型菌落是单细胞真菌的菌落形一、生物学性状丝状菌落是多细胞真菌的菌落形式。菌落呈绒毛状、棉絮状和粉末状。菌落的中心与边缘，及其正面和背面可呈不同颜色，如皮肤癣菌和毛霉菌等。丝状菌落的形态、结构和颜色可作为鉴定真菌的参考。3．丝状菌落第一节真菌概述一、生物学性状丝状菌落是多细胞真菌的菌落形式。菌落呈绒毛状、第一节真菌概述一、生物学性状.（三）抵抗力真菌对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂均有较强的抵抗力；对热抵抗力较差，60～70℃加热1小时可被杀死；对1%～2%苯酚、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛溶液等比较敏感；对常用抗生素均不敏感，灰黄霉素、制霉菌素、两性霉素B、克霉唑、酮康唑、伊曲康唑等对多种真菌有抑制作用。第一节真菌概述一、生物学性状.（三）抵抗力第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性1．致病性真菌感染致病性真菌感染主要为外源性真菌感染，可引起皮肤、皮下组织和全身性真菌感染，如各种皮肤癣菌引起的皮肤癣菌病；此外，组织胞浆菌侵入机体，遭吞噬细胞吞噬后，常不被杀死而在细胞内增殖，引起组织慢性肉芽肿炎症和坏死等。第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性1．致病性真菌第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性2．条件致病性真菌感染条件致病性真菌感染主要为内源性感染，如白假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉菌等所致的感染。此类真菌多为人体的正常菌群，只有在机体免疫力降低或菌群失调的情况下，如肿瘤，糖尿病，免疫缺陷，长期使用广谱抗生素、皮质激素、免疫抑制剂，放射治疗，或在应用导管、手术过程中等，易伴发这类感染。第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性2．条件致病性第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性3．真菌毒素性中毒有些真菌在粮食或饲料上生长，人、畜食用后会导致急、慢性中毒，称为真菌毒素中毒症，可引起肝、肾、神经系统损害及血液系统的变化。真菌毒素性中毒的发病有地区性和季节性，但没有传染性。第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性3．真菌毒素性第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性4．真菌超敏反应性疾病当过敏体质者接触、吸入或食入某些真菌的菌丝或孢子时，可引起各类超敏反应，如荨麻疹、过敏性皮炎、支气管哮喘、过敏性鼻炎、农民肺等。第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性4．真菌超敏反第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性5．真菌毒素与肿瘤真菌毒素与肿瘤的关系已引起医学界的广泛关注和深入研究，其中研究最多的是黄曲霉毒素。大鼠实验饲料中含0.015×10-6g/g黄曲霉毒素即可诱发肝癌。此外，黄褐毒素也可诱发肝肿瘤，镰刀菌T-2毒素可诱发大鼠胃癌、胰腺癌、垂体和脑肿瘤。第一节真菌概述二、致病性与免疫性（一）致病性5．真菌毒素与第一节真菌概述二、致病性与免疫性（二）免疫性抗真菌免疫包括天然免疫应答和获得性免疫应答，其中天然免疫应答在阻止真菌病的发生上起重要作用，获得性免疫应答与真菌病的恢复密切相关。第一节真菌概述二、致病性与免疫性（二）免疫性抗真菌免疫包括二、致病性与免疫性在天然免疫应答方面，皮肤黏膜屏障发挥着重要作用。如儿童易患头癣，是因为皮脂腺发育不完善，具有杀真菌作用的不饱和脂肪酸分泌不足，影响其抗真菌作用；成人易患手足癣，是因为成人手足部的汗较多，有利于真菌生长。其次，人体中也发现了一些天然具有抗真菌作用的物质，如促癣吞噬肽、转铁蛋白等。1．天然免疫第一节真菌概述二、致病性与免疫性在天然免疫应答方面，皮肤黏膜屏障发挥着重要二、致病性与免疫性真菌感染后也可诱发机体产生获得性免疫，主要包括体液免疫和细胞免疫。一般认为真菌感染的恢复主要靠细胞免疫，细胞免疫低下或缺陷者易患真菌感染，特别是深部真菌感染。2．获得性免疫第一节真菌概述二、致病性与免疫性真菌感染后也可诱发机体产生获得性免疫，主要第二节常见病原性真菌第二节第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌皮肤感染真菌引起表面角化组织，如角化的皮肤、毛发、指（趾）甲的感染，称为浅部真菌。浅部真菌引起的感染称为浅部真菌病，简称癣。浅部真菌可分为皮肤癣菌和角层癣菌两类。第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌皮肤感染真菌引起表面角第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌（一）皮肤癣菌皮肤癣菌侵犯部位仅限于角化的皮肤、毛发、指（趾）甲，引起体癣、头癣、手癣、足癣、股癣、甲癣等。其致病机制主要是真菌产生角蛋白酶水解角蛋白，以及在局部大量繁殖并产生代谢产物，引起炎症病变。皮肤癣，特别是手足癣，是人类最多见的真菌病。第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌（一）皮肤癣菌皮肤癣菌第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌（一）皮肤癣菌皮肤癣真菌分为毛癣菌、表皮癣菌和小孢子癣菌三个属，根据菌落特征、镜下形态，可对皮肤癣菌做出初步鉴定。第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌（一）皮肤癣菌皮肤癣真第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌（二）角层癣菌角层癣菌是腐生于皮肤角层及毛干表面的浅部真菌，引起角层型和毛发型病变。前者代表菌种是秕糠状鳞斑癣菌，后者代表菌种是何徳毛结节菌和白色毛结节菌。秕糠状鳞斑癣菌可引起皮肤出现黄褐色的花斑癣，好发于颈、胸、腹、背和上臂，形如汗渍斑点，俗称汗斑。何徳毛结节菌和白色毛结节菌主要侵犯头发，在毛干上形成坚硬的砂粒状结节，黏着于发干上，引起黑毛结节病和白毛结节病，俗称砂毛。第二节常见病原性真菌一、皮肤感染真菌（二）角层癣菌角层癣菌第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌.机会致病性真菌多为宿主正常菌群，机体免疫力降低是主要的致病条件。机会致病性真菌主要有白假丝酵母菌、新生隐球菌、肺孢子菌、曲霉菌和毛霉菌等，为深部感染真菌。第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌.机会致病性真菌多为第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌白假丝酵母菌俗称白色念珠菌。菌体为圆形、卵圆形，直径2～4μm，革兰氏染色阳性，着色不均匀。该菌以芽生孢子出芽繁殖，孢子伸长成芽管，不与母体脱离，形成较长的假菌丝。临床标本及活检组织标本中，除芽生孢子外，还见有大量假菌丝，表明白假丝酵母菌处于活动状态，有诊断价值。（一）白假丝酵母菌第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌白假丝酵母菌俗称白色第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌本菌在沙保培养基、普通培养基、血平板培养基上均生长良好，37℃培养2～3天可形成白色或乳白色类酵母菌型菌落。在玉米粉培养基上可长出厚膜孢子。假菌丝和厚膜孢子有助于白假丝酵母菌的鉴定。（一）白假丝酵母菌第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌本菌在沙保培养基、普第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌白假丝酵母菌可侵犯皮肤、黏膜、指甲及各内脏器官。常见白假丝酵母菌感染有以下几种类型：①皮肤黏膜感染：皮肤念珠菌感染好发于皮肤皱褶处，如腋窝、乳房下、肛门周围、会阴部及指（趾）甲等潮湿部位。黏膜感染表现为鹅口疮、口角糜烂、外阴与阴道炎等，其中以鹅口疮最为多见，好发于新生儿。②内脏感染：主要有肺炎、支气管炎、食管炎、肠炎、膀胱炎和肾盂肾炎等，偶可引起败血症。③中枢神经系统感染：主要有脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿等。此外，对白假丝酵母菌过敏者可出现变应性念珠菌疹或哮喘等超敏反应性疾病。（一）白假丝酵母菌第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌白假丝酵母菌可侵犯皮第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（二）新生隐球菌新生隐球菌广泛分布于自然界，主要传染源是鸽子，在鸽粪中大量存在，鸽子自身有抗此菌的能力。正常人体表、口腔、粪便有时也能分离到新生隐球菌。人因吸入鸽粪污染的空气而感染，特别是免疫力低下者。第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（二）新生隐球菌新生第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（二）新生隐球菌新生隐球菌为酵母型真菌，菌体为圆球形，直径4～20μm，外周有宽厚的荚膜，一般染色不被着色而难以发现，故称隐球菌。用墨汁负染后镜检，可见黑色背景中有圆形或卵圆形的透亮菌体，内有一个较大与数个小的反光颗粒。新生隐球菌为双壁细胞，外包有一层透明的荚膜，非致病菌的隐球菌则无荚膜。新生隐球菌以芽生方式繁殖，但不形成假菌丝。第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（二）新生隐球菌新生第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（二）新生隐球菌新生隐球菌一般为外源性感染，呼吸道是主要的入侵途径。大多数患者肺部感染后症状不明显，且能自愈。免疫功能低下者感染后，病原菌可在肺部大量繁殖，严重者呈暴发性感染并迅速死亡。部分患者发生血行播散，累及中枢神经系统及其他组织，引起亚急性或慢性脑膜炎，治疗不及时常导致患者死亡。感染也可播散至皮肤、黏膜、淋巴结、骨骼和内脏器官等，引起肉芽肿性病变。第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（二）新生隐球菌新生第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌肺孢子菌广泛分布于自然界，寄生在人和多种哺乳动物的肺内，是肺孢子菌肺炎（pneumocystispneumonia，PCP）的病原体。肺孢子菌经呼吸道进入肺内，多为隐性感染。当宿主抵抗力低下时，潜伏在肺内及新侵入的肺孢子菌得以大量繁殖，引起PCP，多见于严重营养不良、早产儿、先天性免疫缺陷病、抗癌化疗及接受免疫抑制剂治疗的患者。（三）肺孢子菌第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌肺孢子菌广泛分布于自第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌近年来，肺孢子菌成为艾滋病患者常见的并发症，未经治疗者死亡率几乎为100%。肺孢子菌也可随血行播散至全身或直接侵入其他组织器官，引起肺外感染，如肝炎、结肠炎、中耳炎等。本菌对多种抗真菌药物不敏感，治疗药物首选复方新诺明。（三）肺孢子菌第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌近年来，肺孢子菌成为第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（四）曲霉曲霉广泛分布于自然界，种类繁多，其中可引起人类疾病的最常见的为烟曲霉，此外黄曲霉、构巢曲霉、黑曲霉和土曲霉也有不同程度的致病性。烟曲霉主要由呼吸道侵入，引起支气管哮喘或肺部感染。有些曲霉可产生毒素，使人或动物发生急、慢性中毒，损伤肝、肾、神经等组织，黄曲霉毒素与恶性肿瘤（尤其是肝癌）的发生密切相关。第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌（四）曲霉曲霉广泛分第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌毛霉广泛分布于自然环境中，常引起食物霉变，一般为面包、水果和土壤中的腐生菌。毛霉引起的感染称为毛霉病，多发生在机体免疫力低下时。毛霉病多先发生在鼻或耳部，后可累及上颌窦、眼眶、脑膜等，也可累及脑、肺和胃肠道等多个器官。毛霉易侵犯血管，形成栓塞，死亡率较高。（五）毛霉第二节常见病原性真菌二、机会致病性真菌毛霉广泛分布于自然环第三节真菌感染的微生物学检查及防治原则第三节第三节真菌感染的微生物学检查及防治原则一、微生物学检查（一）标本采集浅部感染可取病变部位的鳞屑、病发或甲屑，深部感染可取病变部位的分泌物、排泄物、痰液及血液等。第三节真菌感染的微生物学检查及防治原则一、微生物学检查（一第三节真菌感染的微生物学检查及防治原则一、微生物学检查.（二）直接镜检黏稠或含角质的标本，先用10%KOH微加热处理，不染色直接镜检，如见到菌丝或孢子可初步诊断为真菌病。白假丝酵母菌感染，取材涂片后进行革兰氏染色镜检；新生隐球菌感染取脑脊液做墨汁负染色，镜检看有无厚荚膜的酵母型菌体出现。第三节真菌感染的微生物学检查及防治原则一、微生物学检查.（第三节真菌感染的微生物学检查及防治原则一、微生物学检查.（三）分离培养离培养常用于直接镜检不能确诊时，或需确定感染真菌的种类时，一般用含抗生素的沙保培养基分离培养。培养后观