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实验六

微生物的显微直接计数

1.了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数板的计数方法。2.观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活细胞的方法。一、目的要求（一）血球计数板计数原理

血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室：边长为１ｍｍ，深为0.1mm，容积为0.1mm3(10-4ml)。计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。两种都共有400个小方格。二、基本原理

4-2计数板结构血球计数板高度0.1mm计菌器高度0.02mm计数区每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm3。其计算方法如下：

1．16×25的计数板计算公式细胞数/mL=(100小格内的细胞数/100)×400×1000×稀释倍数2．25×16的计数板计算公式细胞数/mL=(80小格内的细胞数/80)×400×1000×稀释倍数（二）区分酵母菌死活细胞基本原理

美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成无色的还原型。具有还原能力

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