医学原虫学概论、阿米巴、弓形虫

病例：某女，30岁，上海某外资企业会计，公司聚餐食生鱼片及海胆等海产品后出现腹泻而就医。2011年11月28日于中国预防医学科学院上海寄生虫病研究所粪检，结果：阿米巴包囊阳性，粪阿米巴抗原阳性。医学原虫学(MedicalProtozoology)授课单位病原生物学系

人体寄生虫学教研室

授课人董惠芬概论一.定义原虫：体积微小，能独立完成如摄食、代谢、呼吸、排泄、运动及生殖等生命活动全部功能的单细胞真核动物。（原虫：6万5千余种，寄生原虫：1万种）医学原虫：寄生于人体腔道、体液、组织、或细胞内致病或非致病性原虫。（约40种）二、形态特征外形：多样，有球形、卵圆形/不规则形等。结构：由细胞膜、细胞质和细胞核三部分组成。原虫胞膜胞质胞核基质内含物细胞器膜质细胞器运动细胞器营养细胞器泡状核实质核伪足鞭毛纤毛外质：透明，凝胶状内质：不透明，溶胶状三、生活史类型滋养体(trophozite)：是原虫生活史中代谢旺盛的阶段，具有运动和摄食功能，为原虫的生长、发育和繁殖的阶段。包囊(cyst)：为原虫生活史中不运动的阶段，当环境不利时，分泌囊壁起保护作用，也是传播阶段。按传播方式可分三种类型：1.人际传播型：通过直接或间接接触由传染源传播给易感者。感染阶段大多是包囊，如：溶组织内阿米巴；也可是滋养体，如：阴道毛滴虫。滋养体（trophozite）直接方式传播滋养体+包囊间接方式传播2.循环传播型完成生活史和传播过程中，至少需要一种以上的脊椎动物作为终末宿主及中间宿主，其感染阶段在两者之间进行传播。终宿主/中间宿主/脊椎动物3.虫媒传播型需在媒介昆虫体内发育至感染阶段，再传播给人四、生殖生理1.无性生殖（1）二分裂：核先分裂为二，再胞质分裂，形成两个子体（2）多分裂：核先分裂为多个，胞质再分裂并分别包绕每个已分裂的胞核，一次形成多个子体（3）出芽生殖：母体先经过不均等分裂产生一个或多个芽体，再发育成新个体2.有性生殖（1）接合生殖：两个虫体暂时结合，交换核质，再分裂成两个新个体（2）配子生殖：由原虫的雌、雄配子结合（受精）形成合子的过程3.世代交替：生活史中无性生殖和有性生殖两种方式交替进行五、致病特点1.增殖作用2.播散作用3.机会性致病隐性感染条件适合致病危害生命溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)分类上隶属于阿米巴门（肉足鞭毛门）、内阿米巴纲（叶足纲）、内阿米巴目（阿米巴目）、内阿米巴科、内阿米巴属迪斯帕阿米巴(Entamoebadispar)：不致病共栖型形态上不能区分，需进行同工酶、抗原、及基因分析来鉴别引起痢疾的重要病原之一，引起阿米巴痢疾，还可扩散至肝、脑、肺等脏器一、形态1.滋养体（trophozite）活时运动活泼，靠伪足做定向运动在外界环境中抵抗力极差，易死亡溶解外型变化大以二分裂法增殖肠腔型滋养体：10~30µm组织型滋养体：20~50µm溶组织内阿米巴滋养体

(10X100)核膜内质吞噬的红细胞外质核周染粒核仁

2.包囊（cyst）形状：圆球形大小：10~16µm结构：囊壁明显，核的形态同滋养体未成熟包囊1

2个核拟染色体呈棒状成熟包囊:4个核糖原泡1个核拟染色体糖原泡糖原泡二、生活史组织型滋养体包囊(四核)肠腔型滋养体包囊(四核)侵入肠壁落入肠腔

基本形式：排出体外播散至其他器官感染与传播阶段：成熟包囊（四核包囊）分裂方式囊后(四核)滋养体：3次胞质分裂，1次核分裂（8个）病变部位小结：致病阶段：组织型滋养体肠内：多发于盲肠或阑尾，也易累及乙状结肠和升结肠，偶及回肠肠外：肝、脑、肺等组织型、肠腔型滋养体：二分裂

包囊：有丝分裂

侵入组织血流播散三、致病1.致病机理:“触杀”借凝集素（260kDa半乳糖/乙酰氨基半乳糖）吸附于宿主结肠上皮细胞及红细胞等释放阿米巴穿孔素释放蛋白酶（主要为30kDa半胱氨酸蛋白酶）使靶细胞（组织）溶解2.影响致病的因素虫株毒力与侵袭力：共生菌协同作用宿主抵抗力主要是T细胞免疫，特异性T细胞及细胞因子

-干扰素可活化巨噬细胞杀阿米巴；体液免疫中的抗体可通过凝集滋养体起辅助作用。但在活动感染时，虫体可抑制T细胞及巨噬细胞的活性，使宿主处于免疫抑制状态3.病理与临床（1）肠阿米巴病(intestinalamoebiasis)好发于盲肠/阑尾，易累及结肠/回肠口小底大烧瓶状溃疡，多仅累及黏膜层，但可深达肌层，溃疡间的黏膜多正常，但可大片脱落烧瓶状溃疡无症状带包囊者稀便，奇臭，巧克力状腹痛，胀气，里急后重阿米巴性结肠炎急性暴发型：60%肠穿孔，肠外阿米巴病重要传染源5年以上慢性阿米巴病：1年阿米巴肿（2）肠外阿米巴病(extraintestinalamoebiasis)阿米巴性肝脓肿多发性肺阿米巴病：死亡率15~30%阿米巴性脑脓肿最常见：10%年轻患者居多右上腹痛，向右肩放射，发热，寒战，盗汗，厌食，体重下降皮肤阿米巴病四、实验诊断

病原学检查：生理盐水涂片法碘液涂片法体外培养2.血清学诊断：ELISA、IHA、IFA等影像诊断：结肠镜、B超、CT、X线等4.PCR诊断：29/30kDa半胱氨酸抗原5.鉴别诊断：细菌性痢疾与典型菌痢的区别菌痢：起病急；左下腹压痛；白细胞总数和中性粒细胞升高；粘液脓血便，含大量脓球、红细胞和巨噬细胞。阿米巴痢疾：起病稍缓；右下腹可有压痛；少量白细胞，中性粒细胞少见；粘液血便果酱色，腥臭味，含大量坏死组织和红细胞以及少量白细胞，有时可见夏科-莱登结晶。五、流行(一)分布全球性分布，热带及亚热带最常见；全球感染者近5千万，每年死亡人数约4~10万，死亡率仅次于疟疾和血吸虫。国内：估计感染人数1千多万，平均感染率接近1%，最高是西藏，达8.124%，其次是云南、新疆、贵州、甘肃等省。卫生部编撰的《中国卫生统计年鉴》显示，2011年全国菌痢与阿米巴痢疾的发病数为252248例，死亡36例；2012年全国菌痢与阿米巴痢疾的发病数为237930例，死亡24例。

(二)流行环节传染源：粪便中持续排包囊者传播途径：经包囊污染的饮水、食品、餐具；口——肛接触；蝇及蟑螂携带包囊加重传播易感人群：高危人群包括免疫力低下者（爱滋病、肿瘤、长期使用激素者）、营养不良者、旅游者、弱智人群、同性恋者、新生儿、孕妇、哺乳期妇女等六、防治1.治疗2.管粪管水：粪便无害化管理（杀灭包囊），保护水源3.杀灭有害昆虫4.注意个人饮食卫生

5.疫苗的研制及应用（尚未成功）阿米巴病首选药物：甲硝咪唑(灭滴灵)带包囊者：巴龙霉素、喹碘方等肠道不吸收、低副作用的药物；二氯尼特、双碘喹啉肠外阿米巴脓肿：药物配合穿刺排脓，有细菌感染者加用抗生素广东省CDC发布的一则消息一对姐妹的悲剧妹妹娩出一个怪胎：大大的头，腰背部还有个大水瘤——“先天性脑积水并发脊柱裂”。姐姐的孩子是个傻子，5岁了，只会叫爸妈，还经常癫痫发作。医生详细追问病史，姐俩自幼就喜欢养猫，化验后发现，姐妹俩抗弓形虫抗体均阳性，并在姐姐孩子的脑脊液中查到了滋养体，还从她们家猫的粪便中查到了卵囊。原来是猫把这姐俩给害苦了！刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)分类上隶属于孢子虫门（顶复门）、球虫纲（孢子虫纲）、艾美目（真球虫目）、艾美科（弓形虫科）、弓形虫属感染率高人兽共患机会致病危害严重一、形态假包囊包囊卵囊孢子囊子孢子宿主细胞膜虫体分泌包绕囊壁滋养体（缓殖子）（速殖子）二、生活史在中间宿主体内吞食血流中间宿主：除人外，尚有多种哺乳动物(包括与人关系密切的有牛、羊、猪、猫、鼠等)，鸟类、鱼类、爬行类卵囊子孢子滋养体假包囊(急性期)包囊(慢性期)包囊假包囊缓殖子速殖子1.感染阶段：卵囊、包囊、假包囊、滋养体2.感染方式：A.猫粪中卵囊污染食物、水源、手B.食入动物肉类（猪、羊、牛）中包囊、假包囊C.孕妇体内的假包囊中的速殖子随血流经胎盘传给胎儿D.滋养体经伤口感染3.感染途径：A.经口（主要）B.胎盘C.损伤的皮肤粘膜D.输血或器官移植4.寄生部位：有核细胞内(脑、眼、淋巴结、肝、心…)5.致病阶段：速殖子(急性期)/包囊(慢性期)6.繁殖方式：内二芽殖、二分裂、裂体增殖内二芽殖：无性增殖方式的一种，首先胞核前沿长出2个花蕾样突起物，逐渐伸展形成2个子核，胞质一分为二，虫体分裂成2个滋养体7.寿命：数月、数年、甚至终身在终宿主体内小肠上皮细胞内卵囊子孢子滋养体假包囊包囊裂殖体裂殖子♂配子体♀配子体♂配子♀配子合子卵囊裂体增殖配子生殖猫及猫科动物（虎、狮）1.发育部位：3.卵囊排出量：1000万个／日，持续10~20天2.发育时间：●肠内期：小肠上皮细胞内（猫作终宿主）●肠外期：肠外组织细胞内（猫作中间宿主）●从包囊感染到排出卵囊约需3~10天●从假包囊、卵囊感染到排出卵囊需20天以上小结：1.感染阶段多：卵囊、包囊、假包囊、滋养体5.猫既是终宿主，也是中间宿主2.寄生的组织部位多：所有有核细胞，特别是脑、淋巴结、肌肉、心、肝、肺等3.中间宿主多：除人外，140多种哺乳动物，鸟类，鱼类4.繁殖方式多：内二芽殖、二分裂、裂体增殖、孢子生殖（无性）；配子生殖（有性）三、致病（一）影响致病的相关因素●虫株虫株侵袭力增殖包囊形成致病死亡率RH强迅速难急,剧高Beverley弱缓慢易缓,轻低速殖子慢性感染形式缓殖子宿主免疫功能状态主要致病阶段症状，病程，愈后与被侵宿主组织器官相关——先天性弓形虫病（二）临床母亲孕期感染，约50%胎儿受染孕期前3个月感染，症状尤重，可致流产、早产、死产或脑积水、小脑畸形、小眼畸形等胎儿畸形，还会增加妊娠的合并症受染胎儿出生时出现症状/畸形者，死亡率12%存活者，80%精神障碍，50%视力障碍隐性感染，数月—数年—成年，出现症状典型表现：脑积水，大脑钙化灶，视网膜脉络膜炎，精神/运动障碍先天性弓形虫病（婴儿肠管外露）先天性弓形虫病（无脑婴儿）先天性弓形虫病(胎盘与头连在一起)先天性弓形虫病——获得性弓形虫病后天感染占绝大多数依所侵脏器出现相应的症状与体征常累及脑，眼脑：脑炎，脑膜脑炎，癫痫，精神障碍眼：视网膜脉络膜炎多见淋巴结肿大，伴低热，倦怠，肝脾肿大等急性播散——全身各脏器广泛性炎症弓形虫病是AIDS患者最常见的机会性寄生虫病之一，感染率约为30％～40％在晚期AIDS病人中，弓形虫最常见感染部位为脑，发生率约为3％～40％，临床常表现为脑炎、脑膜脑炎，病人常可发生癫痫、偏瘫和精神异常，多在几个月内死亡。其次为眼部和肺部感染，眼部以视网膜脉络膜炎为多见，多为双侧性。

此外病人还可伴有全身反应和多器官损害。在AIDS病人中，弓形虫病还常常与其他机会性感染并存，如肺孢子虫肺炎等。调查表明，AIDS病人约30%表现为抗弓形虫抗体阳性，这部分病人均有可能发展为脑弓形虫病

四、实验诊断1.病原学：确诊涂片染色法：腹水、胸水、羊水、胎血、脑脊液、血液、肺泡灌洗液等动物接种分离/细胞培养活检：骨髓、淋巴结等穿刺2.血清学试验染色试验（dyetest,DT）间接荧光抗体试验（IFA）酶联免疫吸附试验（ELISA）60%虫体不被美蓝染色为阳性，50%虫体不被美蓝染色为血清最高滴度免疫吸附凝集试验（ISAGA）3.物理学检查超声检查：每月检查1次，若脑室扩大或伴有脑实质钙化等胎儿颅脑异常，可考虑终止妊娠。CT/MRI：对于弓形虫脑病，CT扫描可见环状或节结状低密度阴影；MRI可查出小于1cm的病变。4.分子生物学检查:DNA五、流行——