食品中病原微生物检验技术-食品中志贺氏菌检验技术

食品微生物与检验志贺氏菌的鉴定检验流程：LOREM自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体和营养琼脂斜面各一管，置36℃±1℃培养20h～24h，分别观察结果。Part1一初步鉴定试验原理：分解葡萄糖产酸不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体），不分解乳糖，蔗糖。不产生硫化氢。接种方法：穿刺划线结果：底层变黄不变黑，无气泡，斜面不变色。1.

三糖铁试验1.

三糖铁试验沙门氏菌志贺氏菌2.动力试验原理：在半固体上穿刺接种后，细菌因不具有鞭毛只能沿着穿刺线生长。结果：阳性——沿穿刺线生长阴性对照试验——扩散生长取营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行β-半乳糖苷酶、尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶以及水杨苷和七叶苷的分解试验。Part1二生化试验由于某些不活泼的大肠埃希氏菌的部分生化特征与志贺氏菌相似，并能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集。Part1三附加生化试验因此前面生化实验符合志贺氏菌属生化特性的培养物还需另加葡萄糖胺、西蒙氏柠檬酸盐、粘液酸盐试验(36℃培养24h～48h)。志贺氏菌属和不活泼大肠埃希氏菌、A-D菌的生化特性区别：也可根据初步判断结果，用已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。原理：相应的抗原(细菌)与抗体(免疫球蛋白)在体外一定条件下作用，可出现肉眼可见的沉淀、凝集现象。在微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分离到的细菌，以最终确认检测结果。Part1四血清学鉴定抗体攻击抗原（居中者）抗原—抗体结合物食品微生物与检验志贺氏菌的增菌和分离检验流程：以无菌操作取样品25g（mL），加入志贺氏菌增菌肉汤225mL。用旋转刀片式均质器或拍击式均质器拍击均匀，制备成1:10的样品匀液。于41.5℃±１℃，厌氧培养16h～20h。Part1一増菌取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养20h～24h，观察各个平板上生长的菌落形态。若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。Part1二分离典型的志贺氏菌在MAC琼脂上的菌落无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐。食品微生物与检验志贺氏菌概述概述分类生物学特性流行病学1234目录①志贺氏菌属的细菌统称痢疾杆菌，是细菌性痢疾的病原菌。②在不卫生和人口密集条件下可迅速转播，如餐厅、食堂等。③主要为粪-口途径传播。痢疾杆菌随患者或带菌者的粪便排出，通过受污染食物、水、手等经口传播。一、概述二、分类A群痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae)通称志贺氏痢疾杆菌。不发酵甘露醇。有12个血清型，其中8型又分为三个亚型。B群福氏志贺氏菌(Sh.flexneri)通称福氏痢疾杆菌。发酵甘露醇。有15个血清型(含亚型及变种)，抗原构造复杂，有群抗原和型抗原。根据型抗原的不同，分为6型，又根据群抗原的不同将型分为亚型;X、Y变种没有特异性抗原，仅有不同的群抗原。C群鲍氏志贺氏菌(Sh.boydii)通称鲍氏痢疾杆菌。发酵甘露醇，有18个血清型，各型间无交叉反应。D群宋内氏志贺氏菌(Sh.sonnei)通称宋内氏痢疾杆菌。发酵甘露醇，并迟缓发酵乳糖，一般需要3~4天。只有一个血清型。有两个变异相，即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相为S型，Ⅱ相为R型。LOREMIPSUMDOLORSITAMET大小为0.5~0.7×2~3μm，无芽胞，无荚膜，无鞭毛。多数有菌毛。革兰氏阴性杆菌。三、生物学特性Part1一菌体形态学特征010203需氧或兼性厌氧，最适温度37℃。

Part1二培养特性三、生物学特性固体培养基上形成边缘整齐、湿润光滑、圆形的菌落。

液体培养基上呈均匀浑浊生长，无沉淀和菌膜。

0102本菌对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱。对酸敏感，在外界环境中的抵抗力能以宋内氏菌最强，福氏菌次之，志贺氏菌最弱。Part1三抵抗力三、