食品添加剂的测定-防腐剂的测定

防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（气相色谱法）

技能点：标准溶液的配制山梨酸、苯甲酸标准储备溶液的配制二山梨酸、苯甲酸混合标准中间溶液的配制三山梨酸、苯甲酸混合标准系列溶液的配制四目录仪器准备一仪器准备一仪器规格仪器规格分析天平0.0001g刻度移液管1mL、5mL、10mL冰箱-18℃烧杯100mL容量瓶10mL、50mL、100mL玻璃棒移液枪试剂瓶山梨酸、苯甲酸标准储备溶液的配制（1000mg/L）二定容至100mL山梨酸、苯甲酸标准贮备液（1000mg/L）分别准确称取山梨酸、苯甲酸各0.1g（精确到0.0001g），用甲醇溶解并分别定容至100mL，转移至密闭容器中。-18℃于-18℃贮存，保存期为6个月。山梨酸、苯甲酸混合标准中间溶液的配制（200mg/L）三分别准确吸取山梨酸、苯甲酸标准贮备液各10.0mL于50mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容，转移至密闭容器中。-18℃定容至50mL贮备液山梨酸、苯甲酸标准中间液（200mg/L）吸取10mL于-18℃贮存，保存期为3个月。山梨酸、苯甲酸混合标准系列工作溶液的配制四1.00mg/L5.00mg/L20.0mg/L100mg/L0mg/L10.0mg/L50.0mg/L200mg/L分别准确吸取山梨酸、苯甲酸标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.0mL，用正己烷-乙酸乙酯混合溶液（1＋1）定容至10mL。临用现配。防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（气相色谱法）

技能点：测定原理与试剂配制测定原理一适用范围二试剂配制三目录测定原理试样经盐酸酸化后，用乙醚提取苯甲酸、山梨酸，采用气相色谱-氢火焰离子化检测器进行分离测定，外标法定量。一适用范围1.本法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。2.测定依据：GB5009.28-2016第二法（气相色谱法）。二试剂配制1.试剂2.仪器准备3.试剂配制4.标准品三防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（1）乙醚（C2H5OC2H5）。（2）乙醇（C2H5OH）。（3）正己烷（C6H14）。（4）乙酸乙酯:（CH3CO2C2H5）色谱纯。（5）盐酸（HCl）。（6）氯化钠（NaCl）。（7）无水硫酸钠（Na2SO4）：500℃烘8h，于干燥器中冷却至室温后备用。（8）甲醇（CH3OH）：色谱纯。1.试剂（除另有说明，本法所用试剂均为分析纯）仪器规格仪器规格电子天平0.001g量筒100mL移液枪刻度移液管2mL常压烘箱烧杯250mL干燥器玻璃棒容量瓶1000mL试剂瓶2.仪器准备防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（1）盐酸溶液（1+1）：取50mL盐酸，边搅拌边慢慢加入到50mL水中，混匀。3.试剂配制：盐酸溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定50mL水50mL盐酸盐酸溶液（1＋1）（2）氯化钠溶液（40g/L）：称取40g氯化钠，用适量水溶解，加盐酸溶液2mL，加水定容至1000mL。3.试剂配制：氯化钠溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定一级水106g亚铁氰化钾40g氯化钠一级水定容至1000mL氯化钠溶液（40g/L）盐酸2mL（3）正己烷-乙酸乙酯混合溶液（1+1）：取100mL正己烷和100mL乙酸乙酯，混匀。3.试剂配制：正己烷-乙酸乙酯混合溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定100mL乙酸乙酯100mL正己烷正己烷-乙酸乙酯溶液（1＋1）苯甲酸（C6H5COOH，CAS号：65-85-0），纯度≥99.0%；或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。山梨酸（C6H8O2，CAS号：110-44-1），纯度≥99.0%；或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.标准品防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（气相色谱法）

技能点：试样溶液的测定试样制备二试样提取三仪器参考条件四标准曲线的制作五试样溶液的测定六目录仪器与设备一仪器与设备1.气相色谱仪：带氢火焰离子化检测器（FID）。2.分析天平：感量为0.001g和0.0001g。3.涡旋振荡器。4.离心机：转速＞8000r/min。5.匀浆机。6.氮吹仪。一试样制备取多个预包装的样品，其中均匀样品直接混合，非均匀样品用组织匀浆机充分搅拌均匀，取其中的200g装入洁净的玻璃容器中，密封，水溶液于4℃保存，其他试样于-18℃保存。二试样提取三仪器参考条件四色谱柱：聚乙二醇毛细管气相色谱柱，柱长30m，内径320μm，膜厚度0.25μm，或等效色谱柱。载气：氮气，流速3mL/min。空气：400L/min。氢气：40L/min。进样口温度：250℃。检测器温度：250℃。柱温程序：初始温度80℃，保持2min，以15℃/min的速率升温至250℃，保持5min。进样量：2μL。分流比：10:1。标准曲线的制作将混合标准系列工作溶液注入气相色谱仪中，以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。五试样溶液的测定将试样溶液注入气相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中山梨酸、苯甲酸的质量浓度。六式中：X——试样中待测组分含量，g/kg；ρ——由标准曲线得出的试样中待测物的质量浓度，mg/L；V——加入正己烷-乙酸乙酯（1＋1）混合溶剂的体积，mL；25——试样乙醚提取液的总体积，mL；m——试样质量，g；5——测定时吸取乙醚提取液的体积，mL；1000——由mg/kg转换为g/kg的换算因子。结果保留3位有效数字。结果计算防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（液相色谱法）

技能点：标准溶液的配制山梨酸、苯甲酸标准储备溶液的配制二山梨酸、苯甲酸混合标准中间溶液的配制三山梨酸、苯甲酸混合标准系列溶液的配制四目录仪器准备一仪器准备一仪器规格仪器规格常压烘箱容量瓶10mL、50mL、100mL干燥器刻度移液管1mL、5mL、10mL分析天平0.0001g烧杯100mL冰箱0℃~5℃玻璃棒移液枪洗瓶山梨酸、苯甲酸标准储备溶液的配制（1000mg/L）二1.溶液配制2.贮存1.溶液配制防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定准确称取山梨酸钾和苯甲酸钠0.134g和0.118g（精确到0.0001g），用水溶解并定容至100mL。当使用山梨酸和苯甲酸标准品时，需要用甲醇溶解并定容。一级水定容至100mL一级水2.贮存防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定定容至100mL后转移至试剂瓶中，山梨酸、苯甲酸标准贮备液（1000mg/L）4℃山梨酸、苯甲酸标准贮备液（1000mg/L）山梨酸、苯甲酸贮备液4℃贮存，保存期为6个月。山梨酸、苯甲酸标准中间溶液的配制（200mg/L）三准确吸取山梨酸、苯甲酸标准贮备液10.0mL于50mL容量瓶中，用水定容。4℃定容至50mL贮备液山梨酸、苯甲酸标准中间液（200mg/L）吸取10mL中间液4℃贮存，保存期为3个月。山梨酸、苯甲酸标准系列工作溶液的配制四1.00mg/L5.00mg/L20.0mg/L100mg/L0mg/L10.0mg/L50.0mg/L200mg/L准确吸取山梨酸、苯甲酸标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.0mL，用水定容至10mL。临用现配。防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（液相色谱法）

技能点：测定原理与试剂配制测定原理一适用范围二试剂配制三目录测定原理样品经水提取，高脂肪样品经正己烷脱脂.高蛋白样品经蛋白沉淀剂沉淀蛋白，采用液相色谱分离.紫外检测器检测，外标法定量。一适用范围1.本法适用于食品中山梨酸、苯甲酸的测定。2.测定依据：GB5009.28-2016第一法（液相色谱法）。二试剂配制1.试剂2.仪器准备3.试剂配制4.标准品三（1）氨水（NH3·H2O）。（2）亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。（3）乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]。（4）无水乙醇（CH3CH2OH）。（5）正己烷（C6H14）。1.试剂（除另有说明，所用试剂均为分析纯）防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（6）甲醇（CH3OH）：色谱纯。（7）乙酸铵（CH3COONH4）:色谱纯。（8）甲酸（HCOOH）：色谱纯。（9）水：GB/T6682规定的一级水。（10）冰乙酸（CH3COOH）。仪器规格仪器规格电子天平0.001g量筒100mL移液枪洗瓶塑料离心管50mL试管水性微孔滤膜0.22μm烧杯250mL容量瓶1000mL玻璃棒刻度移液管1mL试剂瓶2.仪器准备防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（1）氨水溶液（1+99）：取1mL氨水，加到99mL水中，混匀。3.试剂配制：氨水溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定99mL水1mL氨水氨水溶液（1＋99）（2）亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取106g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至1000mL。3.试剂配制：亚铁氰化钾溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定一级水106g亚铁氰化钾106g亚铁氰化钾一级水定容至1000mL亚铁氰化钾溶(106g/L）（3）乙酸锌溶液（220g/L）：称取220g乙酸锌溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，用水定容至1000mL。3.试剂配制:乙酸锌溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定一级水220g乙酸锌一级水定容至1000mL乙酸锌溶液（220g/L）30mL冰乙酸（4）乙酸铵溶液（20mmol/L）：称取1.54g乙酸铵，加入适量水溶解，用水定容至1000mL，经0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。3.试剂配制:乙酸锌溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定一级水1.54g乙酸铵一级水定容至1000mL乙酸铵溶液（20mmol/L）0.22μm水相微孔滤膜过滤（5）甲酸－乙酸铵溶液（2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸铵）：称取1.54g乙酸铵，加入适量水溶解，再加入75.2μL甲酸，用水定容至1000mL，经0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。3.试剂配制：甲酸——乙酸铵溶液防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定一级水1.54g乙酸铵75.2μL甲酸一级水定容至1000mL甲酸—乙酸锌溶液0.22μm水相微孔滤膜过滤苯甲酸钠（C6H5COONa，CAS号：532-32-1），纯度≥99.0%；或苯甲酸（C6H5COOH，CAS号：65-85-0），纯度≥99.0%；或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。山梨酸钾（C6H7KO2，CAS号：590-00-1），纯度≥99.0%；或山梨酸（C6H8O2，CAS号：110-44-1），纯度≥99.0%；或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.标准品防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定（液相色谱法）

技能点：试样溶液的测定试样制备一试样提取二仪器参考条件三标准曲线的制作四试样溶液的测定五目录试样制备一试样提取1.仪器准备2.一般性试样3.含胶基的果冻、糖果等试样4.油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样二1.仪器准备防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定仪器规格仪器规格高效液相色谱仪超声波清洗机电子天平0.001g低速速离心机8000r/min恒温水浴锅100℃±1℃涡旋振荡器水性微孔滤膜0.22μm具塞离心管50mL容量瓶50mL刻度移液管1mL、2mL2.一般性试样防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管加水25mL50℃水浴超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL8000r/min离心5min水相转移至50mL容量瓶残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜水相转移至50mL容量瓶定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管加水25mL50℃水浴超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL8000r/min离心5min水相转移至50mL容量瓶残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管加水25mL50℃水浴超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL水相转移至50mL容量瓶残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定3.含胶基的果冻、糖果等试样防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定定容至50mL准确称取2g（0.001g）50mL具塞离心管加水25mL50℃超声20min冷却至室温加亚铁氰化钾溶液2mL8000r/min离心5min水相转移至50mL容量瓶残渣中加水20mL涡旋混匀涡旋混匀超声5min8000r/min离心5min待液相色谱测定70℃水浴加热溶解试样50mL容量瓶适量上清液过0.22μm滤膜水相转移至50mL容量瓶4.油脂、巧克力