中药标准物质在中药饮片质量控制中的应用

中药标准物质在中药饮片质量控制中的应用

中医药的制备是根据中医药理论、药理学的性质和临床应用的需要，采用独特的制药技术创造的。药材经炮制后得到的饮片,既可直接用于临床配方,又可用于中药制剂的生产,其质量优劣直接影响到疗效的好坏。因此,系统深入的研究制定饮片质量标准与评价方法显得尤为重要。目前,《中国药典》和各省、市、自治区地方炮制规范共同形成了中药饮片的质量标准体系。中药标准物质(包括中药化学对照品、对照药材与对照提取物)在中药饮片质量控制中发挥了重要作用。但中药成分复杂,且炮制过程又是药物的理化性质发生复杂变化的过程,因此饮片的物质基础———化学成分更加复杂。采用当前的质量评价方法与质量控制标准,尚存在一定的缺陷,这也在一定程度上制约了饮片产业的健康发展,影响了中药的现代化与国际化进程。因此,只有研究建立更加科学、完善、合理、可控的质量评价标准,保障中药饮片的安全性、有效性、稳定性和质量可控性,才能使中药在国际市场占有一席之地。本文对中药标准物质的概况及其在中药饮片质量控制中的应用现状作简要综述,对当前中药饮片质量控制中存在的问题加以分析探讨,并提出解决问题的思路。1中药对照物质的选择原则《国家药品标准物质管理办法》第三条规定:“国家药品标准物质是指供国家药品标准中物理和化学测试及生物方法试验用,具有确定特性量值,用于校准设备、评价测量方法或者给供试品赋值的材料或物质。”其中,中药标准物质是国家颁布的一种计量标准,是定性、定量检测中药所使用的实物对照,必须具有高度均匀性、量值准确性和良好的稳定性。目前中药标准物质可分为中药化学对照品(包括内标物)、对照药材和对照提取物。依据《国家药品标准物质技术规范》,中药对照物质的选择原则可归纳为:1新建标准物质必须考虑其制备、标定、保存和分发使用的可能性;2专属性强、稳定性强、可大量制备;3质量控制标准中所采用的中药化学对照品物质要有可靠性。此外,该指导原则对中药化学对照品、对照药材和对照提取物的标定都制定了较为具体的技术细则。2收载中药饮片数量增加中药饮片质量的优劣直接影响到疗效的好坏,规范、稳定、可控的炮制工艺技术是中药饮片质量的根本保证。深入研究中药饮片质量标准、建立中药饮片质量评价体系对于控制饮片质量具有重要意义。目前,《中国药典》和省、市、自治区地方炮制规范共同形成了中药饮片的质量标准体系。《中国药典》作为我国药品检验的最高标准,收载的饮片数目不断增加,2005年版收载中药饮片13种,2010年版收载中药饮片439种,总品种数822种,即将修订的2015年版《中国药典》计划新增43%的品种。中药饮片的质量评价由形态、性状、气味及简单的理化鉴别方法,逐步发展成为一个质量标准体系,具体包含以下15项内容:名称、来源、制法、性状、鉴别、检查、辅料测定、浸出物测定、量测定、性味归经、功能主治、用法用量、注意事项、有效期、包装贮藏。这对于提高饮片质量、指导工业生产、保证临床用药的安全有效性具有重要意义。3对照药材鉴别2010年版《中国药典》收载的822种饮片规格,其中72%需采用蒸、煮、火单、制、炒、煅等技术炮制。所收载的饮片质量标准中应用到的中药对照物质共计640种,其中对照药材有239种,中药化学对照品有400种,对照提取物有1种。3.2饮片鉴别2010年版《中国药典》中,饮片鉴别项应用了239种对照药材,300种中药化学对照品,1种对照提取物,即薏苡仁油对照提取物。其中,仅采用对照药材鉴别的饮片有94种,如三棱、大血藤、大蓟、山药、千里光、川木香、麦冬、麦芽、花椒、苍耳子、重楼、桔梗、狼毒等;仅采用中药化学对照品鉴别的饮片有152种,如秦艽、秦皮、莪术、桃仁、党参、远志、吴茱萸、阿胶、陈皮等;同时采用对照药材和中药化学对照品鉴别的饮片有78种,如芫花、苍术、苏木、两面针、沙苑子、独活、姜黄、穿心莲、莱菔子、桂枝、柴胡等;采用对照提取物和中药化学对照品鉴别的有1种,即薏苡仁。3.3饮片含量测定2010年版《中国药典》中,饮片含量测定项应用了320种中药化学对照品。其中,饮片含量测定的成分与药材不同的有7种,分别为(制)草乌、(熟)地黄、(制)远志、附子、禹州漏芦、(制)淫羊藿,具体见表2。饮片含量测定标准低于药材的有55种,分别为姜炭、山豆根、山茱萸、炒山楂、焦山楂、炒川楝子、马钱子粉、制远志、赤芍、炒芥子、何首乌、炒苑子、陈皮、忍冬藤、姜黄、络石藤、王不留行、木青、乌梅、薏苡仁、青皮、苦杏仁、苦参、知母、佩兰、金荞麦、泽泻、荆芥、茜草、草果仁、栀子、厚朴、甘松、甘草、石菖蒲、龙胆、仙茅、槲寄生、秦皮、莪术、荷叶、桃仁、积雪草、益母草、焦槟榔、地榆炭、朱砂根、延胡索、防己、黄芩、黄精、猪苓、淫羊藿、续断、肉豆蔻。饮片含量测定限度高于药材的有3种,分别为商陆、板蓝根、(清)半夏,具体见表3。4研究主要行政药品中的质量控制方法4.1以对照药材、对照品控制饮片质量,不能全面体现炮制作用中药炮制的作用主要体现在解毒、增效、改性3个方面。现代研究表明,通过炮制技术影响毒性成分是炮制解毒的有效途径。炮制增效主要与提高有效成分溶出率、改变药物成分的含量或化学组分的比例以及生成新的有效成分有关。现行的饮片质量标准中,以对照药材、中药化学对照品控制饮片质量,忽略了炮制过程中饮片发生的变化,不能全面体现炮制的作用,这样的标准是不合理、不完善的。如生表22010年版《中国药典》饮片与药材含量测定成分的比较Table2ThecomparisonofcomponentsincontentdeterminationbetwwenherbalpiecesandcrudedrugsinChinesePharmacopoe-ia(2010edition)地黄甘、苦、寒,归心、肝、肾经,具有清热凉血、养阴生津的功效,临床主要用于热入营血、温毒发斑、热病伤阴、骨蒸劳热等;经酒炖法或蒸制法炮制成为熟地黄后,性味、归经、功效都发生了不同程度的变化,其性味偏温,归肝、肾经,具有滋阴补血、益精填髓的功效,临床主要用于血虚萎黄,心悸怔肿,月经不调,崩漏下血,肝肾阴虚,盗汗遗精,内热消渴等。2010年版《中国药典》中,生地黄项下以梓醇和毛蕊花糖苷作为鉴别项和含量测定项的检测指标,熟地黄项下以毛蕊花糖苷作为鉴别项和含量测定项的检测指标。药材与饮片之间、不同炮制品之间的性味归经和功能主治是有区别的,采用相同的评价指标和检测方法显然是不合理的,因此需要深入研究能体现炮制作用与饮片特点的质量控制方法。中药化学对照品存在分离难度大、单体不稳定、供应价格高、资源浪费、供应数目有限且所测成分单一等缺点。中药饮片成分多样且复杂,以单体化学对照品控制饮片质量,所提供的信息远远不足,达不到整体质量控制的目的,与中医药整体观的学术思想不相符。2010年版《中国药典》饮片质量控制中应用的化学对照品约400种,占对照物质总数的62.5%。因此,建立更加科学、系统、可操作性强,能客观真实的反映中药饮片内在质量与整体质量的评价方法势在必行。4.3炮制后产生的新组分如何在质量标准中体现中药饮片的炮制加工过程是药物的理化性质发生复杂变化的过程。同种药材,其炮制工艺不同,饮片的理化性质就会发生不同的变化,相应的药性功效也不相同。因此,照搬药材的质量控制方法和标准是不合理的。陆兔林等［2］采用GC-MS分析炮制对莪术挥发油成分的影响,结果显示,莪术经醋制后组分变化很大,并产生2个新组分4-异丙基苯甲酸和2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-环己酮。2010年版《中国药典》中,仅以挥发油总量控制莪术与醋莪术的质量,未能体现炮制过程中组分变化的情况。中药经过炮制后发生的变化极其复杂,有些会形成新的物质,而真正起药效作用的不一定是原来存在于药材中的物质,有可能是炮制后经过多途径变化的新组分。因此,在饮片质量标准制定过程中,应深入研究炮制后产生的新组分,尤其应注重具有生物活性作用的新组分的研究,这对于体现炮制过程和饮片特点具有重要意义。4.4动物药质量标准水平较低动物药是中医药宝库中不可缺少的部分,在临床应用中占有重要地位。临床应用的动物药多为炮制后的饮片,成分复杂,虽然近年来在其质量控制方面的研究已取得许多成果,但进展相对缓慢,质量标准水平仍较低。2010年版《中国药典》收载的动物药中有14味无质量标准,分别为血余炭、虫白蜡、鸡内金、金钱白花蛇、海龙、蛇蜕、鹿角、鹿角霜、紫河车、蜈蚣、蜂房、蜂蜡、蝉蜕、鳖甲。有质量标准的动物药中,仅12味有含量测定项,占总动物药的26.7%,分别为牛黄、五倍子、冬虫夏草、牡蛎、龟甲胶、阿胶、猪胆粉、鹿角胶、斑蝥、蜂胶、蜂蜜、麝香。但动物药成分复杂,仅以某一种或某几种化合物的含量作为其质量评价的指标是不完善、不充分的。5完善饮片质量标准5.1研究制定中药对照饮片现行的饮片质量标准中,以对照药材、中药化学对照品控制饮片质量,忽略了炮制过程中饮片发生的变化,不能体现炮制的作用,因此建议研究制定中药对照饮片,即按标准炮制工艺生产,经鉴定、标化合格后,用于鉴别中药饮片及其制剂的对照物质。对照饮片标定项目应符合以下几点要求:1应是符合对照药材要求,并按标准炮制工艺生产的样品;2应是符合GAP及GMP规范生产的优质中药饮片;3饮片应经性状、组织及粉末显微鉴定,须符合标准规定;4应对饮片进行杂质、水分、灰分、浸出物测定,毒性中药应检查毒性成分的含量;5薄层测定项应依据炮制后饮片的成分选择合适的提取方法和展开条件;7含量测定项应选择炮制后饮片的特征性成分等进行测定。对照饮片专属性高、稳定性强并可大量制备,在饮片质量控制过程中积极引入对照饮片,可真实可靠的反映饮片质量的优劣。5.2研究制定饮片对照提取物对照提取物相对于中药化学对照品和对照药材有专属性较强、配制操作简单、价格低廉等特点和优势。对照提取物可以应用于薄层色谱法,弥补对照药材不能体现饮片炮制前后不同的缺点,还能应用于其他如液相、气相色谱鉴别。同时,在含量测定中对照提取物可以标示多个单体成分含量,达到“一标多测”的目的。因此,推行以饮片对照提取物为对照的质量评价体系,可以完善饮片质量标准,解决部分饮片标准缺失和炮制加工后成分改变标准未相应改变等问题。目前,2010年版《中国药典》收载了16种对照提取物对中药及其制剂进行质量控制,饮片质量标准中仅薏苡仁油1种对照提取物。5.3研究制定不同炮制品的有效成分、指标性成分中药饮片是一个天然化合物组合库,成分复杂,有效成分常常是一类化合物,而非单体化合物,应采用专属性强与疗效有直接关系的有效成分进行质量评价。炮制加工对成分都有一定破坏,而破坏程度只能用指标成分的含量来衡量［3］。因此对于制定饮片质量标准,研究制定不同炮制品的有效成分和(或)指标性成分就显得很有必要。为此,要加强炮制机制研究,尤其是要加强对毒性饮片的药理、药效研究;明确炮制过程中成分含量的变化;针对饮片炮制工艺水平、有效成分和药效的认知程度、量化指标等研究情况,分别制定不同级别的质量标准。例如对于有效成分和药效基本清楚、量化指标和检测方法科学的饮片制定专业级标准。这样的标准更容易做到成分检验有理有据、清楚明白,结果令人信服。5.4研究建立饮片特征图谱标准中药指纹图谱是采用指纹图谱的模式,将中药的内在化学物质特性转化为常规的色谱数据信息,通过对中药样品特征性的识别,全面、整体、特异性地表征中药的化学品质［4］。目前,在中药质量控制体系中,化学指纹图谱在中药的真实性鉴定方面已比较成熟;谱效学、生物指纹图谱和代谢指纹图谱由于与药效活性相关,在中药的有效性评价中已体现出优势;色谱指纹图谱在中药的安全性评价方面的应用也愈来愈受到重视［5］。中药的物质群在炮制过程中会发生复杂的变化,这种变化包括物质数、物质量以及物质的组成比例等,采用单一成分的线性质量控制模式是不合理的,研究清楚每一种物质的变化情况也是不现实的。因此,利用特征图谱的整体性与模糊性,将其引入中药饮片的质量控制体系中,既体现了中医药整体观的理论内涵,又可以全面、整体、特异地表征饮片的质量优劣。采用标准炮制工艺得到标准饮片,建立标准饮片的指纹图谱库,通过对比药材与炮制品的指纹图谱,可得到炮制前后发生变化的成分,通过对比不同批次炮制品的特征图谱,可对饮片的质量优劣及稳定性进行分析。这对于炮制机制的研究和炮制工艺的评判都具有重要意义。目前,中药饮片色谱指纹图谱质量控制已取得较多成果,但也存在不少困难,饮片特征图谱标准的建立还需要更加深入的探索与研究。5.5研究建立“一测多评”及“替代对照品”模式控制饮片质量中药化学对照品的单一性难以体现中药饮片多成分、多功效的复杂性,相应提出的多成分质量控制和多指标的质量评价体系也由于中药化学对照品生产成本及技术要求高、单体不稳定、供应数量有限和供应价格高等因素,实施时有诸多限制。近年来,王智民等［6］提出“一测多评”法及谢元超等［7］首次提出“替代对照品”法,即以中药中某一典型组分(有对照品供应者)为内标,建立该组分与其他组分(对照品难以得到或难供应)之间的相对校正因子,通过校正因子计算其他组分的含量。这种测定一个成分,实现对多个成分定量的方法,称为“一测多评”或“替代对照品”。目前,2010年版《中国药典》一部中,已经收载该方法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱等5个成分的含量。同时“一测多评”的研究文献逐渐增多,是中药质量控制和评价模式的发展趋势之一。该方法在部分多指标成分的测定中得到了成功的应用,但还需要对其技术适用性和应用可行性进一步完善和探索。6着力提高中药饮片质量控制体系的科学性随着国家医药卫生保障事业的发展,药品标准物质的应用