食品卫生微生物的检验-微生物检验的准备工作（食品分析课件）

7.3食品微生物实验室

基础与常用仪器微生物实验室的基本要求——功能分区主要分区主要作用办公室登记待检验样品；出检测报告；处理有关文件资料；放松休息等通用实验室是进行微生物学检验准备工作和非无菌操作实验时使用，也可供理化检验及科研工作使用。一般均配备实验台、仪器柜、通风橱、凳子等。为方便工作实验的开展，通常配备常用的仪器（分光光度计、pH计、干燥箱、电炉等）及常用的各种玻璃器皿和常用的各种化学试剂、药品等。灭菌室灭菌室主要用于培养基、玻璃器皿、试剂等的灭菌，室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备及设施。准备室用于培养基的配置和样品的处理等，室内设有试剂柜、存放器具或材料的专柜、实验台、电炉、冰箱、天平和上下水道、电源等。洗涤室用以消毒洗涤待用与已用之玻璃器皿,培养基及污物。室内应备有器皿柜和试验台，加热器、蒸锅，洗刷器皿用的盆、桶等，还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等更衣室是进入无菌室之前工作人员进行更衣、洗手的地方。室内设置无菌室及缓冲室的电源控制开关和放置无菌操作时穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。缓冲室是进入缓冲室之前所经过的房间，安装有鼓风机，以减少操作人员进入无菌操作室时的污染。保证实验结果的准确性。要求比较高的微生物学检验项目如致病菌的检验，应设有多个缓冲室。无菌室是微生物学检验过程无菌操作的场所，要求密封、清洁，安装紫外灯和空调设备（带过滤设备）及传递物品用的传递小窗。还应配置有超净工作台和普通工作台。恒温培养室进行微生物培养的房间，通常配备有恒温培养箱、水浴锅、厌氧培养箱及振荡培养箱等，或整个房间安装保温、控温设备。房间要求保持清洁，有防尘、防噪音等功能。光线充足检验室和准备室要分开，设备用具要合理安排，防止交叉污染。配备超净工作台，操作时，必须穿实验服，在工作帽、口罩，严格遵守无菌操作要求。检验室一般用紫外线照射消毒。所有用过的器具，要用消毒水消毒或煮沸甚至高压灭菌后再清洗。超净工作台高压灭菌锅微生物实验室的基本要求——常用仪器显微镜摇床/振荡器电热恒温培养箱生化培养箱厌氧培养箱常用仪器主要功能天平用于样品和培养基、试剂等的称量。一般要求具备精度达到万分之一的分析天平超净工作台为实验的开展提供一个相对无菌的操作台。冰箱用于样品和试剂的存储高压蒸汽灭菌器培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。红外线灭菌器进行接种环、接种针等的灭菌。电热恒温干燥箱用于吸管，平皿类玻璃器皿的干热、灭菌和烘烤。生化培养箱用于微生物的培养。电热恒温培养箱用于一样微生物的培养。厌氧培养箱用于厌氧微生物的培养。水浴锅用于培养基等的冷却保温以及某些细菌（如大肠杆菌）的水浴保温培养。PH计|酸度计用于培养基、试剂等pH的测定和调整。均质器用于固体或半固体样品的均质处理。实验参考条件：8000~10000r/min均质1~2min。摇床/振荡器用于试样的振荡、混匀。离心机用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于在常温下不太稳定，需要低温环境，要视样品的种类而定。显微镜观察细菌形态和动力、微生物和微小物品结构的必备仪器。用于微生物的观察。实验参考条件：10×~100×。菌落计数器可帮助操作者计数菌落总数、大肠菌群等细菌数量。通过放大，拍照，计数等方式来准确的获取菌落的数量。紫外灯用于大肠杆菌等的荧光检查，参考条件：长波紫外光灯，366nm，功率≤6W。电炉用于培养基、试剂等的溶解、加热。微生物实验的技术要求培养基原料的质控培养基性能的指控指标培养基原料的质控琼脂蛋白胨胆盐牛肉膏或酵母浸膏培养基性能的质控指标物理性状透明度pH值硬度生物学要求敏感性菌落特征补充内容——培养基培养基——以人工方法配制成的适合细菌（或其它微生物）生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。培养基为微生物生长提供水分、碳源、氮源、无机盐和其他生长因子。培养基的类型按物理性质固体培养基液体培养基半固体培养基按组成成分天然培养基合成培养基半天然培养基按作用基础培养基营养培养基选择培养基鉴别培养基厌氧培养基基础培养基——含细菌需要的最基本营养成分，例如肉汤培养基。营养培养基——在基础营养基中再加入葡萄糖、血液、血清等，供营养需求高的菌生长。鉴别培养基——在培养基中加入某种试剂，培养后发生某种反应，从而鉴别不同的菌。例如，伊红-美兰培养基，糖发酵管。选择培养基——根据某一种或某一类微生物生长的特殊营养要求或对一些物理、化学条件有特殊抗性而设计的培养基。可作分离微生物用。例如，在培养基中加入胆盐，可抑制革兰氏阳性菌的生长而有利于革兰氏阴性菌的肠道菌生长。厌氧培养基——使用于专型厌氧菌。例如，在液体培养基表面加盖凡士