乙型肝炎病毒血清免疫学标记的表现模式

乙型肝炎病毒血清免疫学标记的表现模式

肝炎（hbv）的血清生化检验是目前临床分析和评估患者病史和传染性的重要依据之一。有关我国HBV血清学标志的表现模式,国内曾有多篇研究报告。随着检测技术的不断进步和与国外同类型患者比较,我们感到HBV血清学标志的表现模式较为复杂。为了进一步分析我国此类患者病毒血清学标记的表现模式,我们收集并分析了我科近年来检测乙肝患者HBV血清学标志的资料。现将结果报告如下。材料和方法一、病例选择及一般资料收集收集1997年4月～1998年5月在我科门诊和病房就诊,并检测HBV血清免疫学标记的全部结果。所有患者均采集静脉血,于当日分离血清,4℃保存,并于1周内检测。在所收集的资料中,凡乙肝表面抗原、抗体(HBsAg、抗-HBs),乙肝e抗原、抗体(HBeAg、抗-HBe)以及乙肝核心抗体(抗-HBc)5项指标均同时检测,其结果有1项或1项以上阳性,并且一般资料完整者列为本组的研究对象。符合本组资料收集要求的病例共957例,其中男762例,女195例,男女比例为4∶1;年龄5～90岁,平均为40岁。由于各模式组年龄差别经t检验差异无显著意义,故合并统计。此外,对199份标本平行作了HBVDNA检查;对141例患者作了随访复查。随访观察期自1997年4月～1999年1月。二、检测hbvna血清免疫学标记:所有标本以Abbott多功能全自动酶免疫快速分析仪进行检测。以酶显色速率代表反应强度,经电脑自动换算后打印结果。抗-HBs以标准品作标准曲线并进行半定量检测。设备操作与质控均按Abbott公司操作规范进行,试剂由Abbott公司提供。HBVDNA:以多聚酶链反应的方法扩增HBVC区片断,取第一轮扩增产物,以电泳法判定结果。试剂由华美生物工程公司提供。三、定血清病毒学标记检测项目第15项的排列顺序所有资料输入数据库分别整理。采用EXCEL软件包作统计学处理,统计方法在文中相应部分加以说明。为表述方便,设定血清病毒学标记检测项目第1～5项的排列顺序为(1)HBsAg,(2)抗-HBs,(3)HBeAg,(4)抗-HBe和(5)抗-HBc,并以出现阳性项目的序号为该模式的代码。例如某患者血清病毒学标记的检测结果为HBsAg阳性,抗-HBs阴性,HBeAg阳性,抗-HBe阴性,抗-HBc阳性,则该模式代码为“135”,余类推。血清学标记改变的随访情况本组标本所见血清免疫学标记模式共有16种。全部样本按是否检出HBsAg分为2组。凡HBsAg检测结果为阳性的模式列为感染期模式组,凡HBsAg检测阴性者为恢复期模式组。2组分别按频度排序(表1)。各组部分病例同时检测了HBVDNA的样本,其结果亦列入表1,以供比较。957例患者中有141例患者作了346例次随访复检。其中52例患者在随访期间有血清学标记的改变,占随访总数的37%(52/141)。52例患者的平均观察时间为5.4个月。其中复检5次者1例,观察时间为12个月;复检4次者3例,平均观察时间为10个月;复检3次者5例,平均观察时间为7.6个月;复检2次者17例,平均观察时间为5.2个月。为便于分析,合并同一患者相同的检验结果,并将同一患者2次以上的检验结果分别按单一复检结果统计,其随访结果列于表2。由表2可见,52例患者152例次的复检结果中,有79例次的复检结果有模式改变。其模式改变的大致类型有:低滴度抗-HBc的出现与消失或抗-HBs的出现与消失,以及HBeAg与抗-HBe的转换等。此外29例模式改变尚未能归类。抗-hbs的基因特征1.从本组资料看,HBV血清免疫学标记的模式较为复杂。如表1所示,本组957例患者中血清病毒学标记的表现模式可达16种之多。在16种模式中,常见的模式有5种,约占总数的88.3%。常见模式的种类与文献报告基本相同。2.在10种感染期模式组中,属常见模式的是“145”和“135”,这2种模式约占全部病例的一半左右(47%)。在6种恢复期模式组中,属常见模式的是“245”和“25”,这2种模式约占全部病例的35.6%。由于HBsAg阴性的HBV感染在肝病患者中有相当的比例,按是否检出HBsAg分组仅为临床使用方便。在恢复期模式组,如HBVDNA阳性或IgM抗-HBc阳性,均应作为感染期模式组对待。3.在随访的79例次复检中,与“13”模式有关的模式改变占8%(“135”转至“13”占5%,“13”转至“135”占3%),说明低滴度抗-HBc是产生“13”少见模式的原因之一。但本组病例仍有2例其抗-HBc虽经多次复查均为阴性。我们推测可能系前C区突变后,核心抗原(HBcAg)变异,以至目前的核心抗原检测系统不能检出抗-HBc;或由于宿主有选择性免疫缺陷,缺乏HBcAg特异性的T细胞,对HBcAg没有淋巴细胞增殖反应。“15”模式的14例中,6例HBVDNA阳性。此6例阳性患者其“15”模式有两种可能性:即血清转换期或前C区突变。如经动态观察,“15”模式不变,且HBVDNA保持阳性,则可能为前C区突变类型。此种模式最多见的是位于前C区末端1896位点发生G→A的突变,这使原来编码色氨酸的TGG转变为终止码TAG,使得HBeAg合成终止。抗-HBs低滴度阳性(<50mIU)可出现在任何常见模式而组成所谓非常见模式。如“135”模式在抗-HBs低滴度阳性后变为“1235”模式(本模式9例HBVDNA均为阳性)。类似情况有“145”模式与“1245”模式;“1345”模式与“12345”模式;“15”模式与“125”等。在上述转换过程中,抗-HBs的出现是重要转换指标。Abbott多功能全自动酶免疫快速分析仪可以提供抗-HBs的具体数值,这为临床动态观察病情提供了较大的便利。由表2可见,HBeAg与抗-HBe的转换,也是产生少见模式“1345”的原因。4.本组病例的随访结果对推测HBV血清免疫学标志模式转换顺序提供一定帮助。在病毒感染过程中,“135”是感染的起始模式。感染的清除首先表现为e系统的转换。在一般情况下,“135”在向“145”转变过程中,应有“1235”或“1345”等中间模式。“145”是模式转换的重要停留点,此种模式占全部病例的30.6%,说明在整个乙肝发生发展的过程中,此期所占的时间较长。其次表现为s系统的转换,即“145”向“245”的转变。在此转变过程中,应有“45”,“14”或“1245”等中间模式。最后表现为抗-HBe消失或抗-HBe与抗-HBs同时消失。具体表现在“245”有2个转归:即以“25”为表现形式的特异性免疫模式和以“5”为表现形式的感染后模式。这2种模式应分别是自然感染过程的