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男性生育力评价中精浆生化标志物的重要地位

不规则和不孕症是一种常见的综合征。大约10%15%的已婚夫妇无法怀孕,约40%是男性因素,约40%是女性因素,约10%是由于情绪原因的。其中,男性不育是一种复杂的男性综合征,约10%15%的患者是病因不明的核电站异常。目前在男性不育症诊断中,常规精液分析仍然是男性不育诊断中一个重要指标,精子密度、运动能力和形态是判断男性不育的重要精子参数。随着生物化学技术手段不断发展,精浆生化标志物检测在男性不育诊断中越来越起重要作用。怎样将常规精液分析与精浆生化检测很好地结合起来,来准确判断男性不育原因,是临床期待解决问题。本文对不育男性精浆生化标志物的水平及其与精液参数之间的关系进行了研究,以期为男性不育的发生机制提供一些实验依据。1数据和方法1.1临床资料及活力不育组97例男性不育患者均来自2009年11月-2010年11月兰州军区乌鲁木齐总医院,年龄23岁~41岁,婚后正常性生活2年以上不育,无外伤及遗传性疾病家族史,无性功能障碍病史,临床检查未发现有明显睾丸、附睾及输精管异常,并且隐睾症、无精子症、有腮腺炎史、有泌尿生殖道相关手术史等。不育组分别以精子密度20×106分为密度正常组(≥20×106)和密度异常组;以a+b级活力50%分为活力正常组(≥50%)和活力异常组。生育组30例正常生育男性随机选取来自同时期兰州军区乌鲁木齐总医院正常体检人群,年龄26岁~50岁,被检时均已生育一个或一个以上子女,精液常规检查在正常范围。1.2精浆生化物的提取禁欲5d~7d后手淫法取精液于干燥消毒量杯内,置37℃水浴箱内液化,1h后取出,从每份标本中提取2份,1份作精液常规分析,另1份作精浆生化标志物分析。1.3一般分析采用WLJY-9000型伟力彩色精子质量检测系统,按照WHO的精液分析标准进行常规精液检测。1.4精浆-糖苷酶活性检测包括精浆果糖含量、精浆酸性磷酸酶含量检测采用分光光度比色法测定,方法参考文献进行;精浆α-糖苷酶活性检测参考世界卫生组织编写的《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》;精浆锌含量检测由Johnson和Eliasson的方法改良形成,所有试剂盒均由南京军区南京总医院全军医学检验中心提供。1.5统计分析所有数据用x¯±sx¯±s表示,实验结果采用SPSS11.0统计软件中的方差分析、秩和检验及直线相关分析处理。2结果2.1密度正常组和生育组p>0.05不育组中,密度异常组精浆果糖含量显著高于密度正常组和生育组(P<0.05);活力异常组精浆果糖含量低于生育组(P<0.05)(表1)。2.2生育组和活力正常组p>0.05不育组中,活力异常组精浆酸性磷酸酶含量显著低于生育组和活力正常组(P<0.05);精子密度异常组精浆酸性磷酸酶含量与正常组和生育组之间均无差别(P>0.05)(表2)。2.3密度正常组、生育组p>0.05不育组中,密度异常组精浆中性α-糖苷酶含量显著低于密度正常组、生育组(P<0.05);活力异常组精浆中性α-糖苷酶含量显著低于活力正常组、生育组(P<0.05)(表3)。2.4密度正常组和生育组精子活力检测不育组中,密度异常组精浆锌含量分别显著低于密度正常组、生育组(P<0.01),按精子活力分组,异常精浆锌含量与正常组和生育组之间差别均无统计学意义(P>0.05)(表4)。3精浆的及其功能精液主要由精子和精浆组成。精浆是精子运载物,可以起到中和、缓冲和保护精子作用,使精子能够在阴道酸性环境中存活。正常功能的附属性腺产生精子所需要的多种物质,如前列腺分泌的锌进入精浆中,能促进生殖器官发育,维持正常生精功能,提高精子密度和活力;而精囊腺分泌的果糖则是供精子利用的主要能源物质。因此精浆中一些生化标志物可反映附属性腺功能,例如果糖反映精囊腺功能;中性α-糖苷酶反映附睾功能;酸性磷酸酶反映前列腺功能。这些特异性标志物测定,能帮助临床建立新的标准用以评价男性附属性腺的分泌功能,客观地评价男性生育力。精浆中的果糖来自精囊液,由精囊所分泌,是精子活动的主要糖类能源,直接参与精子的获能和受精。精子轴丝收缩依赖ATP供给能量,而ATP可由果糖分解产代谢产生,故精浆果糖浓度降低将使精子活动力减弱,影响受精率。Dieudonne等报道果糖可作为男性不育症研究中的一项筛查指标。本文结果显示,不育组精囊腺标志物果糖含量显著低于生育组,两组比较有显著性差异(P<0.05),与庞训莉等报道结果一致。同时,在不同精子密度的不育症患者中,精浆果糖含量有明显差异,果糖含量与精子密度有明显关系,精子密度越高,果糖分解率越高,故果糖含量随精子密度的增加而降低。精浆果糖含量与精子活力呈负相关,精浆果糖浓度减少的患者,精子存活率常较低,精子的活动力明显减弱。这与Lewis-Jones等研究结果相符,提示射精后可能只有活动精子才能消耗果糖。精浆中的酸性磷酸酶几乎全部来自前列腺,因此酸性磷酸酶是代表前列腺功能的重要指标,慢性前列腺炎时可显著降低,而前列腺癌时则显著增高。测定精浆中ACP有助于了解前裂腺功能。王瑞等报道不论按精子密度分组或按精子活力分组,不育各组酸性磷酸酶含量明显低于正常对照组。本文结果表明,精浆酸性磷酸酶含量与精子活力有一定的相关关系,精浆中酸性磷酸酶水平下降可导致精子密度和精子活力降低,可作为男性不育的诊断标准。精浆中性α-糖苷酶由附睾分泌,此酶可催化多糖或糖蛋白中碳水化合物分解为葡萄糖,为精子代谢和运动供能,其活性高低可直接影响精液质量,但其机制迄今尚未完全明了。中性α-糖苷酶活性异常提示附睾功能障碍,这可导致精子成熟障碍,使精液中未成熟精子比例增加。本文结果表明,中性α-糖苷酶活性与精子密度、活力、形态均有显著相关性,精子密度、活力、形态异常组中性α-糖苷酶活性均显著低于其对应的正常组和生育组。但精浆中性α-糖苷酶可能受季节变化影响较大,特别是在四季分明的地区,在临床应用上应该予以考虑。精浆锌在精子的生理功能中起重要作用,锌缺乏将导致性腺发育不良、睾丸发育停滞和促使曲细精管萎缩。锌是多种核酸和蛋白质合成相关酶的辅酶;锌还是精浆具有抗细菌活性的重要物质;锌还通过延缓脂质过氧化而维持精子细胞膜的稳定性等。本文结果表明,精浆锌含量与精子密度关系密切,密度异常组精浆锌含量显著低于密度正常组和生育组。Burden等推测:精浆锌对精子运动有抑制作用,但锌抑制精子运动的同时,前列腺小泡能吸收锌离子形成复合体,通过钙离子的转移增强精子运动。精浆锌抑制精子运动,锌与前列腺小泡结合形成的复合体增强精子运动,这

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