酶制剂质量要求 第3部分：α-淀粉酶制剂 编制说明

《酶制剂质量要求第3部分：淀粉酶制剂》编制说明（征求意见稿）准化基础研究攻关，组织开展《酶制剂质量要求第3部分：淀粉酶制剂》国家标准的我国加入WTO后，与国际贸易接轨，向世界先进水平靠拢根据《国家标准化管理委员会秘书处关于征求对<食品质量国家标准清理结论（征），家标准清理工作。全国食品工业标准化技术委员会工业发酵分技术委员会秘书处制剂、β-淀粉酶制剂、葡糖淀粉酶和麦芽糖淀粉酶等淀粉酶制剂。其中，β-淀粉酶制剂“本文件适用于α-淀粉酶制剂和β-淀粉酶制剂的生产、检验和销售”。根据标准中技术要求和试验方法等引用文件料和加工助剂专家组（CER）法规关于酶制剂定义，规范了“淀粉酶活力”表述，增加了“β-淀粉酶制剂”、“β-淀粉酶制剂活力”等定义。其中，考虑淀粉酶制剂不同的使用条件和评价方式，“活力单位”增加“注：也可根据所采用的酶活力测定方法，另行约定相应气味要求中，固体剂型与液体剂型统一改为“无异味，产品的生产菌种、原辅料、配方等不同，容重和pH差异很大，且不具有评价酶制剂产）；除GB/T24401-2009外，共收集了6家企业反馈的14份淀粉酶活力测定方法，同时整起草组各实验室采用α-淀粉酶相应方法，选择企业生产的代表性α-淀粉酶样品，分实验室Aml-Subs-1Aml-Subs-2内部底物Subs-2与内部底物的相对相差lab016099624560163.81lab05236920245137247454-0.94lab05115151170311786-0.70lab024126942727415502.83lab023.95lab03201540206574203541lab031965820293202050.44lab041221012008116642.95lab06215752277019905结果：新底物Aml-Subs-2测得的酶活与原底物具有较好的一致性；其中，8个结果Aml-Subs-2的酶活高于原底物。结论：本次筛选的可溶性淀粉底物Aml-Subs-2满足实验需求，适合作为α-淀粉酶活起草组各实验室采用α-淀粉酶方法，对组织方提供的α-淀粉酶盲样SCFF-Aml-S进实验室编号Aml-Subs-1实验室内RSD%平均值实验室内RSD%lab01105681046110289104397.65lab021116511129110920.3311129lab031008510243101130.8310147lab0411761121811214612029实验室编号Aml-Subs-2实验室内RSD%平均值实验室内RSD%lab011066510513106100.73105967.49lab021134811384113140.3111349lab031040010483104100.4310431lab0412104123781229512259(1)标准曲线荀萄糖浓度(mg/mL)A测定方法最适温度的测定不同温度——大麦来源——微生物来源编号葡萄糖液量/ml缓冲液量/mlDNS液量/ml空白0.000.510.20.10.420.40.20.330.60.30.240.80.40.150.50的磷酸盐缓冲液代替酶液），准确计时，反应30min后按加入顺序依次取出0.5mL反加热15min后取出（水沸后开始计时迅速放入冰水中冷却X——试样β-淀粉酶的酶活力，单位为U/mLc——反应结束后，样品溶液吸光度在标准曲线对应的葡萄糖的）；B测定结果(a)标准曲线图4-4葡萄糖标准曲线的酶活极差在216224.10,RSD为9.97%,但这个吸光值范围已经超出了分光光度计测在约在13.31~33.01U/mL,此区间内的酶活极差在138420.39,RSD为7.39%,建议将表4-6大麦来源β-淀粉酶不同酶浓度的测定结果酶浓度(U/mL)测定酶活(U/g)表4-7大麦来源β-淀粉酶不同吸光值区间的结果吸光值区间最小值(U/g)最大值(U/g)极差(U/g)平均值(U/g)图4-5大麦来源的β-淀粉酶不同酶浓度的测定结果(c)微生物来源β-淀粉酶最适酶浓度测定结果酶浓度控制在17.19~110.88U/mL时，对应的吸光值在0.139-0.984,此范围内测出的酶活极差在266121.97,RSD为7.59%,此时极差与RSD值较高；若吸光值控制在182958.86,RSD为6.05%,但这个吸光值范围已经超出了分光光度计测定的最佳范围；若吸光值控制在0.250~0.500,酶活极差只有29384.30,且RSD值也仅有1.33%,所以建议将吸光值控制在0.250~0.500,即酶浓度29.22~57.33U/mL之间。表4-8微生物来源β-淀粉酶不同酶浓度的测定结果酶浓度(U/mL) 表4-9微生物来源β-淀粉酶不同吸光值区间的结果吸光值区间最小值(U/g)最大值(U/g)极差(U/g)平均值(U/g)图4-6微生物来源的β-淀粉酶不同酶浓度的测定结果3、样品普查数据采用标准中方法对征集的部分样品进行检测，结果见表7。//β-淀粉酶//β-淀粉酶//β-淀粉酶/β-淀粉酶//β-淀粉酶//β-淀粉酶/