历年部分真题整理-免疫微生物

朽木易折，金石可镂。千里之行，始于足下。第页/共页免疫微生物名词解释2011异嗜性抗原：与种属特异性无关，存在于人、动物、植物及微生物之间的共同抗原称为异嗜性抗原，它们之间有广泛的交错反应性。APC：抗原递呈细胞，指在免疫应答过程中能捕捉和处理抗原以及能把抗原递呈给免疫活性细胞的一类免疫细胞。SPA：金黄色葡萄球菌A蛋白，是金黄色葡萄球菌的特异性表面抗原，能与多种哺乳动物IgG分子的Fc片结合，而其Fab片裸露于外，保持抗体活性，当此SPA-Ab与相应抗原结合时，就可产生凝集反应。细菌素：是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它同种不同菌株的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌。亚病毒：含核酸或蛋白质侵染因子的一类容易病毒，包括类病毒、拟病毒和朊病毒。荚膜：是某些细菌在一定的营养条件下向细胞外分泌的一层粘性物质，用理化主意去除后并不影响细胞的生命活动。菌群失调：因为外界因素的影响，破坏了正常菌群中各种微生物之间的互相制约关系，而引起的疾病。变态反应：也叫超敏反应，指机体对某些抗原初次应答后，再次采纳相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。灭活疫苗：选用免疫原性强的细菌、病毒等人工培养后，用物理的或化学的主意将病原微生物灭活后制成的疫苗。干扰素：细胞受病毒感染或干扰素诱生剂作用于细胞后产生的一组糖蛋白，可干扰病毒的感染和复制。立克次体：是一类细菌，但许多特征和病毒一样，如不能在培养基上培养，只能在动物细胞内寄生繁殖等。溶原性转换：当噬菌体感染细菌时，宿主菌染色体获得了噬菌体的DNA片段，使其成为溶源状态时而使细菌获得新的性状。群体免疫力：指在动物群体中，因为存在着一定比例的免疫动物，使囫囵动物群体具有对某种疾病的抵御力。菌丝体：也称为霉菌的菌落，是菌丝顶端延伸、分支，互相交错成团形成的典型真菌营养体。淋巴细胞再循环：淋巴细胞在血液、淋巴液和淋巴器官之间反复循环，使带有各种不同抗原受体的淋巴细胞不断在体内各处遨游，增强与抗原和抗原递呈细胞接触的机会，便于激发再次免疫应答。2013ID50：半数感染量，指能使实验动物在接种后一定时限内感染一半所需的微生物或毒素的量。TNF：肿瘤坏死因子，是一类能直接引起肿瘤组织出血坏死、造成肿瘤细胞死亡的细胞因子。O抗原：菌体抗原，指革兰阴性细菌细胞壁上的侧链多糖。IMViC：常用于鉴定肠道杆菌的生理生化特征的4个实验，即:吲哚实验、甲基红实验、VP实验、枸橼酸盐实验。CD：分化群，指对淋巴细胞分化过程中产生的表面抗原统一的命名。DI突变株：缺损型干扰突变株，大多数病毒均能产生DI突变株，这些突变株自身不能复制，惟独在亲本野生株作为辅助病毒存在时才干复制，但它又会干扰亲本病毒的复制，导致后者数量减少。爆裂发酵(汹涌发酵)：在牛乳培养基中，产气荚膜梭菌能发酵乳糖，使牛乳酸凝，同时产生大量气体将凝块破碎成多孔海绵状，严重时被冲成数段，甚至喷到管外。毒力岛：指病原菌的某个或某些毒力基因群，分子结构与功能有别于细菌染色体，但位于细菌染色体中，因此称之为“岛”。生物安全：防止病原微生物及其他有害生物或物质传入实验室，防止病原微生物等传出实验室，实验室人员的自身安全防护。免疫应答：指动物机体免疫系统受到抗原物质刺激后，免疫细胞对抗原分子的识别并产生一系列复杂的免疫连锁反应和表现出特定的生物学效应的过程。超抗原：具有强大的刺激T细胞活化的能力，只须极低浓度即可诱发最大的免疫效应的一些细菌和病毒的抗原成分。人工主动免疫：指给动物接种疫苗等抗原物质，刺激机体免疫系统发生免疫应答而产生的特异性免疫力。抗原肽：指外源性抗原与抗原提呈细胞结合、内化，形成内体，在内体或溶酶体中被蛋白酶降解成的多肽。免疫接种：指用人工主意将免疫原或免疫效应物质输入到机体内，使机体通过人工自动免疫或人工被动免疫的主意获得防治某种传染病的能力。Colony：菌落，某个细菌在相宜其生长的固体培养基表面或内部，在相宜的条件下，经过一定时光的培养，生长繁殖出庞大数量的菌体，形成一个肉眼可见的、有一定形态的自立群体，又称克隆(clone)。2014Cytokine：细胞因子(CK)，是指由免疫细胞和某些非免疫细胞合成和分泌的一类高活性多功能小分子蛋白质多肽，通过与细胞表面的相应受体结合，发挥生物学作用。库姆斯实验：抗球蛋白实验(Coombs实验)，桥梁凝集反应，用于检测不彻低抗体。即不彻低抗体与抗原结合不浮上凝集反应，但参加抗球蛋白抗体后可以将两个各衔接一方抗原表位的单价抗体再衔接起来，浮上凝集。Spore：芽孢，某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。细胞传代：原代培养形成的单层细胞汇集以后，需要举行分离培养，否则细胞会因生成空间不足或因为细胞密度过大引起营养枯竭，都将影响细胞的生长，这一程序又称为传代培养。病毒性颗粒：也称病毒粒子，指成熟的、具有侵染力的单个病毒。T细胞表位：蛋白质抗原分子中被MHC分子结合、递呈，由TCR所识别的肽段。B细胞表位：抗原分子中被BCR中的膜免疫球蛋白和抗体分子所识别的部位。准种：指由一种母序列和来自该序列的大量相关突变基因组所组成的病毒群体，是对病毒“种”概念的补充。MOI：感染比，指一个系统中感染病毒的细胞数与细胞总数之比。VirusReceptor：病毒受体，指能特异性地与病毒结合、介导病毒侵入并促进病毒感染的宿主细胞膜组分。2015原代细胞抗生素顺序表位免疫记忆抗独特型抗体Vi抗原PFUH-O变异火箭免疫电泳APCBCRTCID50菌群失调感染性核酸网状体二、简答题⑴请写出下列物品最合适的灭菌主意。①接种针：烧灼灭菌法；②培养皿：高压蒸汽灭菌法；③基础培养基：间歇灭菌法；④细胞培养液：滤过除菌法；⑤超净台：紫外线；⑥外科手术器械：高压蒸汽灭菌法。⑵简述真菌性疾病的几种形式。①致病性真菌感染；②条件致病性真菌感染；③真菌变态反应性疾病；④真菌性中毒；⑤致肿瘤。⑶抗体有哪些免疫学功能？①中和作用；②免疫溶解作用；③免疫调理作用；④局部黏膜免疫作用；⑤免疫损伤作用；⑥抗体依赖性细胞介导性细胞毒性型；⑦对病原微生物生长的抑制作用。⑷真菌的分离鉴定。标本的采集与处理→显微镜检查→分离培养→变态反应诊断→真菌毒素检测⑸抗病毒免疫包括哪些因素？①非特异性免疫作用：⒈病毒感染细胞产生细胞因子的抗病毒作用，其中IFN是动物机体抗病毒抵御力的主要因子⒉NK细胞天然杀伤作用②特异性免疫作用：⒈病毒感染后的恢复主要依赖细胞免疫⒉预防再传染主要依赖体液免疫⑹简述朊病毒的结构特点及其诊断主意。①结构特点：一类不含核酸而仅由蛋白质构成的可自我复制并具感染性的因子②诊断主意：⒈临床症状：共济失调，震颤等；⒉遗传背景：痒病，克雅氏综合症，致死性家族失眠症；⒊脑组织的病理学检查：淀粉样斑块，神经元空斑；⒋免疫学主意(特异性抗体)：包括免疫组化，免疫印迹，双抗体夹心ELISA等。⑺Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型变态反应均由抗体介导，简述三者之间的主要区别。型别免疫类型损伤机制反应速度组织损伤Ⅰ型速发型体液免疫IgEIgE-肥大细胞结合再次入侵变应原导致肥大细胞，释放生物活性介质-组胺样作用。数秒至30分钟内发生，随后疾驰消除。无组织损伤Ⅱ型细胞毒型体液免疫IgGIgM抗体形成，作用于细胞表面抗原或结合的半抗原，补体、吞噬细胞、NK细胞协同作用。数小时细胞、组织损伤Ⅲ型免疫复合物型体液免疫IgGIgM抗原抗体复合物形成，在毛细血管周围沉积激活补体，中性粒细胞聚拢，溶酶体酶释放，组织损伤，血管炎症。数小时血管炎⑻简述分离与鉴定禽流感病毒(AIV)常用的实验步骤及结果判断标准。实验步骤：①病料的采集和处理：采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏等有病变的组织器官，并举行处理；②鸡胚接种：将处理好的病料尿囊腔接种，看见胚体病变；③细菌检查：收集死亡鸡胚的尿囊液，划线接种鲜血平板举行细菌培养；④HA实验和HI实验：对死亡鸡胚的尿囊液举行HA实验，结果为阳性者，应用AIV和NDV的单克隆抗体举行HI实验。结果：①接种鸡胚的死亡及病变接种的鸡胚在接种后42h死亡，胚体呈全身出血，四肢和头部出血异常严重。②细菌检查结果死亡胚体的尿囊液划线接种的鲜血平板培养24h，无细菌生长。③HI实验的结果凝集能被AIV的单克隆抗体所抑制，而不能被NDV的单克隆抗体所抑制。⑼克隆挑选学说是谁提出的，主要思想内容是什么。抗原进入机体挑选的是事先存在于淋巴细胞膜表面的抗原受体(膜表面免疫球蛋白,SmIg)。动物体内存在有无数多的淋巴细胞克隆(预计约107)，每个克隆表面都带有特异性的SmIg，进入体内的外来抗原或内源性抗原可挑选性地激活带有相应受体的淋巴细胞克隆，进而使其分化增殖，产生抗体。⑽抗原交错性产生缘故。不同抗原物质之间、不同种属的微生物间、微生物与其它抗原物质间，有相同或相似的抗原组成或结构，也可能存在共同的抗原表位。⑾衣原体发育周期特点。元体→吸附→吞噬体→在吞噬体内形成网状体→二分裂繁殖→形成包容体→在包容体内成熟为元体→释放⑿请列举三位免疫学领域的闻名学者，并说明他们的主要贡献。①法国科学家巴斯德研制胜利禽霍乱、炭疽与狂犬病弱毒疫苗。②澳大利亚科学家伯内特提出克隆挑选学说。③英国科学家波特提出免疫球蛋白的结构模型。⒀细菌基因转移和重组方式有哪些，各自特点。转化：受体菌直接摄取供体菌游离DNA片段获得新的性状。要求细菌细胞必须处于感触态，并具有摄取外源性DNA的能力。转导：以温暖噬菌体为媒介，把供体菌的DNA小片段转移到受体菌中，通过交换与整合，使受体菌获得供体菌的部分遗传性状。溶源性转换：当噬菌体感染细菌时，宿主菌染色体获得了噬菌体的DNA片段，使其成为溶源状态时而使细菌获得新的性状。接合：两个细菌细胞通过性菌毛互相接触,由一个供体菌(雄性菌)直接将遗传物质DNA输入另一个受体菌(雌性菌),并与受体菌DNA整合引起的基因转移，称为接合。具有方向性。原生质体融合：使遗传性状不同的两细菌的原生质体融合而发生遗传重组，以产生同时带有双亲性状的、遗传性稳定的融合子。⒁病毒增殖方式。①吸附：病毒与宿主细胞接触，先是静电结合，再是病毒表面位点与宿主细胞膜上的相应受体结合。②穿入和脱壳：病毒吸附在宿主细胞膜上后，可通过多种穿入方式进入细胞：⒈通过细胞膜吞入形成内吞小体，再脱壳；⒉与细胞膜发生膜融合，病毒的核衣壳直接进入细胞浆内；⒊核膜脱壳：细胞吞饮，释放入胞浆；病毒基因组通过核孔复合物进入细胞核内；⒋有的病毒表面有位点与细胞受体结合后，由细胞表面的酶类协助病毒脱壳，使病毒核酸直接进入宿主细胞内。③生物合成：病毒成分的合成，是在病毒基因指令下，利用细胞生物合成的场所和原材料举行合成的过程，包括：病毒核酸的复制和病毒蛋白质的合成。④组装与释放：⒈组装：病毒核酸进入衣壳形成残破的病毒粒子；⒉释放：a.无囊膜病毒：通过极迅速度的合成造成病毒粒子在胞浆中大量积聚，以致细胞胀破，释放出病毒；b.有囊膜病毒：释放过程中病毒可以从细胞膜或核膜上以出芽方式获得囊膜。⒂带现象及缘故。带现象：因反应体系中抗原过多或抗体过多而浮上抑制可见反应的现象称为带现象。缘故：大多数抗体为二价，大多数抗原为多价，惟独两者比例适当初，才干形成彼此衔接的大复合物；而抗原过多或抗体过多时，形成的单个复合物不能被肉眼所见。(格子学说)⒃淋巴细胞再循环过程、意义。淋巴细胞在血液、淋巴液和淋巴器官之间反复循环，使带有各种不同抗原受体的淋巴细胞不断在体内各处遨游，增强与抗原和抗原递呈细胞接触的机会；便于激发再次免疫应答。⒄简述细胞因子的主要生物学作用。①参加免疫应答与免疫调节；②刺激造血功能；③在神经-内分泌-免疫网络中作为免疫细胞的递质。⒅B细胞的功能。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞，浆细胞可合成和分泌抗体，主要执行机体的体液免疫。⒆评估免疫检测主意的两个指标，和计算公式。特异性=真阴性/(真阴性+假阳性)×100%，指用该实验检查非患畜时浮上阴性结果的可能性。敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%，指用该实验检查某病畜时浮上阳性结果的可能性。⒇细菌生长曲线的描述，意义①赶紧期：是细菌初到新环境的适应期。此时菌体增大、代谢活跃、合成所需酶系统。RNA含量显然增多，DNA无变化，此时细菌数并不增强。l-4h。②对数期：细菌疾驰分裂繁殖，活菌数以几何级数增长，生长曲线近斜线。该期病原菌致病力最强，其形态染色及生理均较典型，对抗菌药物敏感。6-10h。③稳定期：因营养消耗、代谢产物蓄积等，此时新繁殖的活菌与死菌平衡，活菌数最多。该期形态染色不特异。产生毒素等代谢产物。普通8h。④衰亡期：细菌死亡速度加大，繁殖速度变小。如不移植到新培养基，总算可所有死亡。此期菌体变形或自溶，染色不典型。(21)革兰染色的原理，意义。原理：G+菌：肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞仍呈紫色；G-菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色。意义：可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。(22)证实抗体是免疫球蛋白。①选三只SPF小鼠，分离记A、B、C；②采取A的血清，B、C免疫肺炎双球菌荚膜多糖；③10日后采取B、C血清；④在C血清中参加肺炎双球菌荚膜多糖后离心取上清液；⑤对三个血清举行电泳；⑥A条带正常，B条带γ-球蛋白增多，C条带γ-球蛋白减少。(23)IgG的理化特性、生理特性IgG是动物血清中含量最高的免疫球蛋白，介导体液免疫的主要抗体，多以单体形式存在。IgG主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产生，大部分存在于血浆中，其余存在于组织液和淋巴液中。IgG在动物体内持续时光长，可发挥抗菌，抗病毒，抗毒素等免疫学活性，并具有抗肿瘤作用--肿瘤特异性抗原的IgG抗体的Fc片段可与巨噬细胞，K细胞等表面的Fc受体结合，从而在肿瘤细胞与这些效应细胞之间起着搭桥作用，引起抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)而杀伤肿瘤细胞等靶细胞。IgG是唯一可通过人(和兔)胎盘的抗体，因此在新生儿的抗感染中起着十分重要的作用。IgG是引起II型、III型变态反应及自身免疫病的抗体。1.马动脉炎病毒，埃博拉病毒，变形杆菌，非洲猪瘟，鹅细小病毒写出属名2.链球菌三种溶血特点3.Ig画图功能区4.佐剂作用原理和用途5.抗细菌感染6.青霉素过敏机制7.朊病毒微生物学诊断8.间接ELISA9.巴氏杆菌诊断三、论述题⑴某禽场发生病毒疫病，分离检测流程主意。①活病毒标本的采集和运送；②标本的处理，将组织标本中的病毒游离出来和除菌；③标本的接种；④病毒增殖的判断：细胞病变、病毒间的干扰现象、细胞代谢改变、血细胞吸附等；⑤新分离病毒的理化性质测定；⑥血清学检测或鉴定。⑵列举与细菌致病性有关的因素，分析构成细菌侵袭力的物质基础。①致病性组成：⒈侵袭力：菌毛、荚膜、侵袭性酶⒉毒素：内毒素、外毒素②侵袭力的物质基础：⒈菌体的表面结构：a.与黏附有关的结构：革兰阴性菌的菌毛、某些外膜蛋白、革兰阳性菌的的脂磷壁酸等；b.荚膜：荚膜多糖具有黏附作用、抗吞噬作用、抗体内有害物质的损伤。⒉侵袭性酶：由细菌侵袭基因编码产生，如溶血素、透明质酸酶、链激酶、胶原酶、坏死因子等。⑶试述肠道病毒的共同特点。肠道病毒颗粒小，呈20面体，直径24-30nm，不含类脂体，核心有单链RNA，耐乙醚和其它脂溶剂，耐酸，对各种抗生素﹑抗病毒药﹑去污剂有抵御作用。多数病毒在细胞培养中产生细胞病变。肠道病毒通常寄生于肠道，仅于少数情况下，进入血流或神经组织。肠病毒具高传染性，大部分的肠病毒仅引起轻微的临床症如发烧、恶心等。⑷某鸡场近两个月发生鸡呼吸艰难、产蛋下降，试分析可能造成该结果的病毒及简述各自的鉴别诊断主意。⑸细菌形态看见需要注重哪些问题，如何在光学显微镜下迅速鉴别大肠杆菌、炭疽杆菌、结核分枝杆菌。⑹设计题：请自选材料建立一种检测猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒抗体的间接ELISA主意。(说明原理、实验步骤及结果判定主意)。【实验原理】把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面；测定时，将待检样品和酶标记物按一定程序反应形成复合物，并参加酶作用的底物；反应终止时，按照定性或定量分析有色产物的量来决定待检样品中的抗原或抗体的含量。【实验步骤】⑴包被：用包被缓冲液将PRRS病毒抗原稀释到5μg/mL，在96孔酶标板上每孔加100μL，4℃过夜；⑵洗涤：甩去包被缓冲液，用PBST液洗涤3次，拍干；⑶封闭：每孔参加300μL稀释液，37℃温水浴孵育30分钟；⑷洗涤：同⑵；⑸加样：设阴性、阳性对照各2孔，样品孔4个；阴性、阳性对照孔分离加阴性、阳性对照血清100μL；样品孔每孔先加样品稀释液100μL；37℃温水浴孵育30分钟；⑹洗涤：同⑵；⑺每孔加辣根过氧化物酶标记的抗猪IgG抗体100μL；37℃温水浴孵育30分钟；⑻洗涤：同⑵；⑼显色：每孔加100μL清新配置的底物溶液；常温下避光放置5分钟；⑽终止反应：每孔加终止液50μl；⑾ELISA测定仪测定各孔OD值。【结果判定】⑴若样本的OD值超过规定吸收值则判定为阳性（规定吸收值=阴性血清吸收值+2）；⑵样本的OD值与阴性血清OD值之比大于或等于1.5、2或3倍，即判为阳性。⑺多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体的制备过程、主要用途、各自优缺点。①多克隆抗体：⒈制备：抗原制备→动物免疫→测定血清抗体效价→血清分离与保存→多抗纯化→多抗的标记⒉用途：a.用于血清学实验；b.制作防治制剂②单克隆抗体：⒈制备：小鼠骨髓瘤细胞↘经抗原免疫后的小鼠脾细胞→→杂交瘤细胞→杂交瘤阳性克隆的筛选与