备考2024届高考生物一轮复习讲义第十一章生物技术与工程课时4动物细胞工程考点2物细胞融合技术和单克鹿体

考点2动物细胞融合技术和单克隆抗体1.动物细胞融合技术（1）动物细胞融合（2）辨析动物细胞融合和植物体细胞杂交项目动物细胞融合植物体细胞杂交原理细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、细胞的全能性前处理使细胞分散开除去细胞壁相关酶胰蛋白酶和胶原蛋白酶纤维素酶和果胶酶诱导方法物理法：电融合法；化学法：PEG融合法；生物法：灭活病毒诱导法物理法：电融合法、离心法等；化学法：PEG融合法、高Ca2＋—高pH融合法目的获得杂交细胞获得杂种植株意义和用途制备单克隆抗体，诊断、治疗、预防疾病打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种2.单克隆抗体及其应用技术手段动物细胞融合和动物细胞培养原理细胞膜的流动性和细胞增殖制备流程筛选目的第一次：获得[6]杂交瘤细胞；第二次：获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞特点杂交瘤细胞：既能迅速大量增殖，又能产生[7]特异性抗体单克隆抗体：能准确地识别抗原的细微差别，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备应用①作为诊断试剂：利用同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。②运载药物[如抗体—药物偶联物（ADC）]。③用于治疗疾病基础自测1.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。（√）2.动物细胞融合的结果是形成单核的杂种细胞，植物体细胞杂交的结果是得到杂种植株。（√）3.用特定的抗原对小鼠进行免疫后，从小鼠脾脏中只能得到一种B淋巴细胞。（×）4.单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。（×）5.单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。（×）6.杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。（×）深度思考1.为什么诱导动物细胞融合时要用灭活的病毒，而不用活病毒？诱导细胞融合的原理是什么？提示活病毒可能会感染细胞，而灭活的病毒不会感染细胞。诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。2.ADC在临床应用上的作用机理是什么？提示其作用机理是通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别并结合肿瘤细胞表面的抗原，然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞内发挥作用，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。研透高考明确方向命题点1动物细胞融合的过程分析1.细胞融合技术是研究细胞遗传、细胞免疫等的重要手段，如图A、B表示两种动物细胞。下列有关说法错误的是（D）A.图示过程与植物原生质体融合的基本原理相同B.仙台病毒需要用紫外线等灭活使其失去感染能力C.图中C细胞进行的细胞分裂方式为有丝分裂D.将A、B细胞等量混合诱导得到的融合细胞即为杂交细胞解析图示过程为动物细胞的融合，该过程与植物原生质体融合的基本原理相同，都依赖于细胞膜的流动性，A正确；用来诱导动物细胞融合的病毒，需要用紫外线等灭活使其失去感染能力，B正确；图中C细胞进行的细胞分裂方式为有丝分裂，C正确；将A、B细胞等量混合诱导得到的融合细胞可能有三种类型：AA型、BB型、AB型（杂交细胞），D错误。2.[2022江苏，多选]如图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人—鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（ACD）A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B.细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人—人、人—鼠、鼠—鼠融合细胞C.芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上D.胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上解析加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合，A正确。细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均是在选择培养基上进行筛选过的细胞，所以均是人—鼠杂交细胞，B错误。由题意可知，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，分析题图可知，相关基因位于2号染色体上；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均含有11号染色体，故乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上，C正确。只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅲ含有17号染色体，而Ⅰ、Ⅱ不含有17号染色体，故相关基因位于17号染色体上；Ⅰ、Ⅲ都有X染色体和11号染色体，都有磷酸甘油酸激酶活性，而Ⅱ不具有磷酸甘油酸激酶活性，故磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上，D正确。命题点2单克隆抗体的制备和应用分析3.[2023北京]甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（D）A.需要使用动物细胞培养技术B.需要制备用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞解析在单克隆抗体制备过程中需要用到动物细胞培养技术，还需要制备用PTH免疫的小鼠，A、B正确；若要筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，需要利用抗原—抗体结合的原理进行筛选，C正确；一般来说，单个杂交瘤细胞只能分泌一种抗体，D错误。4.[2023湖北节选，11分]某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。回答下列问题：（1）添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是改变细胞膜结构（使两个细胞接触处质膜的脂类分子发生疏散和重组）。（2）在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对未融合的（亲本）细胞和融合的具有同种核的细胞生长具有抑制作用。（3）单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是筛选能分泌与该病毒外壳蛋白A特异性结合的抗体的杂交瘤细胞。解析（1）聚乙二醇（PEG）分子能改变膜结构，使两个细胞接触处质膜的脂类分子发生疏散和重组，从而导致质膜相互亲和、融合。（2）淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合后，有的细胞未融合，有的细胞已融合；融合细胞中有的是具有同种核的细胞，有的是具有不同种核的