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文档简介
一、高考对试验与探究能力要求(1)能独立完成“生物知识内容表”所列生物试验,包含了解试验目标、原理、方法和操作步骤,掌握相关操作技能,并能将这些试验包括方法和技能进行综合利用。(2)具备验证简单生物学事实能力,并能对试验现象和结果进行解释、分析和处理。(3)含有对一些生物学问题进行初步探究能力,包含利用观察、试验与调查,假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。(4)能对一些简单试验方案做出恰当评价和修订。第1页二、考纲中试验考试内容考试说明中明确指出19个生物试验内容。按实验性质可分为以下类型:1.观察类。2.物质判定类3.验证类4.探究类5.调查类6.模拟建模类(一)观察类试验在这类试验中常综合利用显微观察技术、染色技术、暂时装本制作技术等。归类以下:第2页试验名称观察方式观察对象显微镜玻片标本染色剂生物材料观察叶绿体原色反应叶绿体高倍暂时装片无藓类叶观察质壁分离与复原紫色大液泡高倍暂时装片无洋葱表皮观察减数分裂蝗虫精母细胞高倍固定装片无固定装片观察有丝分裂染色观察染色体高倍暂时装片龙胆紫(醋酸洋红)洋葱根尖脂肪判定脂肪高倍切片暂时装片苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液花生种子观察DNA、RNA分布DNA、RNA高倍暂时装片甲基绿和吡罗红人口腔上皮细胞观察线粒体线粒体高倍暂时装片健那绿低温诱导染色体数目加倍染色体高倍暂时装片改良苯酚品红染液洋葱根尖细胞第3页判别类试验在这类试验中,常利用某种试剂对生物体或细胞中成份进行判别,针对不一样判别对象,采取不一样试剂。归类以下:第4页试验名称判定对象试剂颜色水浴加热生物材料生物组织中糖类判定淀粉碘液蓝色无脱色叶片还原糖斐林试剂(班氏试剂)砖红色沉淀需要含糖量高白色或近白色植物组织、尿液、血浆蛋白质判定蛋白质双缩脲试剂紫色无豆浆、牛奶、鸡蛋清、蛋白质类酶模拟尿糖检测葡萄糖葡萄糖试纸有色无水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”滴瓶第5页验证类与探究类试验1、经过模拟试验探究膜透性2、探究影响酶活性原因3、探究酵母菌呼吸方式4、模拟探究细胞表面积与体积关系5、低温诱导染色体加倍6、探究植物生长调整剂对扦插枝条生根作用7、探究培养液中酵母菌数量动态改变8、探究水族箱(或鱼缸)中群落演替第6页实习和研究性课题这类试验经过调查法,调查法中常使用统计技术和测量技术。实习和研究性课题调查对象统计方法计算公式种群密度取样调查动物标志重捕法植物样方法调查人群中遗传病土壤中小动物类群丰富度调查人类某种遗传病土壤中小动物汇总法取样器取样调查法记名计数法和目测预计法个体总数(N)首次捕捉个体数=再次捕捉个体数重捕到标志个体数全部样方内个体总数样方总面积发病率=患病人数被调查人数*100%第7页三、生物学中惯用试剂成份及使用方法(1)斐林试剂:成份:0.1g/mLNaOH(甲液)和0.05g/mLCuSO4(乙液)。使用方法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则出现砖红色沉淀。(2)班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖溶液混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖测定。(3)双缩脲试剂:由0.1g/mLNaOH(A液)和0.01g/mLCuSO4(B液)组成。向待测液中先加入2mLA液,摇匀,再向其中加入3~4滴B液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则展现紫色。第8页(4)苏丹Ⅲ:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%酒精中,摇匀制得。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。(5)吡罗红(又名派洛宁):用于判定RNA。RNA会被染成红色。(6)甲基绿:用于判定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。DNA遇二苯胺沸水浴蓝色(7)无水乙醇(新人教版):提取叶绿体中色素(8)15%盐酸和95%酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。(9)龙胆紫溶液:浓度为0.01g/mL或0.02g/mL,用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟。第9页(10)20%肝脏研磨液、3%过氧化氢、3.5%氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+催化效率。(新鲜肝脏中含有过氧化氢酶)(11)3%可溶性淀粉溶液、3%蔗糖溶液、2%新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖作用试验。(12)碘液:用于判定淀粉存在。遇淀粉变蓝。(13)层析液:(成份:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素层析,即将色素在滤纸上分离开。(14)二氧化硅:在色素提取分离试验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。(15)碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,预防在研磨时叶绿体中色素受破坏。第10页(16)0.3g/mL蔗糖溶液:相当于30%蔗糖溶液,比植物细胞液浓度大,可用于质壁分离试验。(17)0.1g/mL柠檬酸钠溶液:预防凝血得到血浆。(18)氯化钠溶液:浓度为0.9%时可作为生理盐水。(19)胰蛋白酶:①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开。(20)秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂细胞纺锤体形成。(21)健那绿染液(詹纳斯绿B染液):能使活细胞中线粒体展现蓝绿色(22)溴麝香草酚蓝水溶液遇CO2蓝绿黄(23)重铬酸钾酸性条件下遇酒精灰绿色第11页试验一:观察DNA、RNA在细胞中分布(必修一P26)一.试验目标:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布方法二.试验原理:1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA亲和力不一样,甲基绿使DNA展现绿色,吡罗红使RNA展现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,能够显示DNA和RNA在细胞中分布。2.盐酸能够改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。第12页三.方法步骤:操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干预防污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为预防感染,漱口防止取材失败固定装片水解将烘干载玻片放入质量分数为8%盐酸溶液中,用300C水浴保温5min改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体DNA与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外盐酸染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅区域,移至视野中央,调整清楚后才换用高倍物镜观察使观察效果最正确第13页试验二检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)一.试验目标:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二.试验原理:一些化学试剂能使生物组织中相关有机化合物,产生特定颜色反应。1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色Cu2O沉淀。如:加热葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红色)+H2O,即Cu(OH)2被还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2.脂肪能够被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中Cu2+作用,产生紫色反应。)第14页三.试验材料1.做可溶性还原性糖判定试验,应选含糖高,颜色为白色植物组织,如苹果、梨。(因为组织颜色较浅,易于观察。)2.做脂肪判定试验。应选富含脂肪种子,以花生种子为最好,试验前普通要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。3.做蛋白质判定试验,可用富含蛋白质黄豆或鸡蛋清。四、试验试剂斐林试剂(包含甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包含A液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%酒精溶液,碘液、蒸馏水。第15页五、方法步骤:(一)可溶性糖判定操作方法注意问题解释1.制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须暂时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生颜色掩盖。2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。3.向试管内注入1mL新制斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保留时,生成Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。4.试管放在盛有50-650C温水大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向试验者。也可用酒精灯对试管直接加热。预防试管内溶液冲出试管,造成烫伤;缩短试验时间。第16页(二)脂肪判定操作方法注意问题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片水滴中,用吸水纸吸去装片中水。干种子要浸泡3~4小时,新花生浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。滴上清水可预防盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。第17页三、蛋白质判定操作方法注意问题解释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。)黄豆浸泡1至2天,轻易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约试验时间。判定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。A液和B液也要分开配制,储存。判定时先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性环境。A、B液混装或同时加入,会造成Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。不然CuSO4蓝色会遮盖反应真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。假如稀释不够,在试验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不轻易彻底,而且试管也不易洗洁净。附:淀粉检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色改变。碘液不要滴太多以免影响颜色观察第18页(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。(2)还原性糖植物组织取材条件?含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。(3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对试验有何影响?加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖降低,使判定时溶液颜色改变不显著。(4)斐林试剂甲、乙两液使用方法?混合目标?为何要现混现用?混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。(5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色改变次序为?浅蓝色棕色砖红色第19页(6)花生种子切片为何要薄?只有很薄切片,才能透光,而用于显微镜观察。(7)转动细准焦螺旋时,若花生切片细胞总有一部分清楚,另一部分含糊,其原因普通是什么?切片厚薄不均匀。(8)脂肪判定中乙醇作用?洗去浮色。(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?先加A液目标怎样经过对比看颜色改变?不能混合;先加A液目标是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。第20页试验三用显微镜观察各种多样细胞(必修一P7)一.试验目标:1)使用高倍显微镜观察几个细胞,比较不一样细胞异同点2)利用制作暂时装片方法二.试验原理:利用高倍镜能够看到一些在低倍镜下无法看到细胞结构,比如:能够看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区分不一样细胞。三.方法步骤:第一步:转动反光镜使视野明亮第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察物像移至视野中央第三步:用转换器转过高倍物镜问(1)是低倍镜还是高倍镜视野大,视野明亮?为何?提醒:低倍镜视野大,经过光多,放大倍数小;高倍镜视野小,经过光少,但放大倍数高。问(2)为何要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察物像移至视野中央,再换高倍镜观察?提醒:假如直接用高倍镜观察,往往因为观察对象不在视野范围内而找不到。所以,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察物像移至视野中央,再换高倍镜观察。问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?提醒:不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,轻易压坏玻片。第四步:观察并用细胞准焦螺旋调焦。
第21页四:讨论:1.使用高倍镜观察步骤和关键点是什么?答:(1)首先用低倍镜观察,找到要观察物像,移到视野中央。(2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。2.试归纳所观察到细胞在结构上共同点,并描述它们之间差异,分析产生差异可能原因:答:这些细胞在结构上共同点是:有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。各种细胞之间差异和产生差异可能原因是:这些细胞位置和功效不一样,其结构与功效相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生差异。3.P8图是一个大肠杆菌电镜照片和结构模式图,大肠杆菌与你在本试验中观察到细胞有什么主要区分?答:从模式图中能够看出,大肠杆菌没有显著细胞核,没有核膜,细胞外有鞭毛,等等。第22页试验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体(必修一P47)一.试验目标:使用高倍镜观察叶绿体和线粒体形态分布。二.试验原理:叶绿体识别依据:叶绿体是绿色,呈扁平椭圆球形或球形。线粒体识别依据:线粒体形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体活细胞染料,能够使活细胞中线粒体展现蓝绿色。三.试验材料:观察叶绿体时选取:藓类叶、黑藻叶。取这些材料原因是:叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为试验首选材料。若用菠菜叶作试验材料,要取菠菜叶下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。第23页四.方法步骤:步骤注意问题分析1.制片。用镊子取一片黑藻小叶,放入载玻片水滴中,盖上盖玻片。制片和镜检时,暂时装片中叶片不能放干了,要随时保持有水状态不然细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布观察。2.低倍镜下找到叶片细胞3.高倍镜下观察叶绿体形态和分布4.制作人口腔上皮细胞暂时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取碎屑→盖盖玻片5.观察线粒体蓝绿色是线粒体,细胞质靠近无色。第24页(1)为何可直接取用藓类小叶,而不能直接取用菠菜叶?因为藓类小叶很薄,只有一层细胞组成,而菠菜叶由很多层细胞组成。(2)取用菠菜叶下表皮时,为何要稍带些叶肉?表皮细胞除保卫细胞外,普通不含叶绿体,而叶肉细胞含较多叶绿体。(3)怎样加紧黑藻细胞质流动速度?最适温度是多少?进行光照、提升水温、切伤部分叶片;25℃左右。(4)对黑藻什么部位细胞观察,所观察到细胞质流动现象最显著?叶脉附近细胞。第25页(5)若视野中某细胞中细胞质流动方向为顺时针,则在装片中该细胞细胞质实际流动方向是怎样?仍为顺时针。(6)是否普通细胞细胞质不流动,只有黑藻等少数植物细胞质才流动?否,活细胞细胞质都是流动。(7)若观察植物根毛细胞细胞质流动,则对显微镜视野亮度应怎样调整?视野应适当调暗一些,可用反光镜平面镜来采光或缩小光圈。(8)在强光照射下,叶绿体向光面有何改变?叶绿体受光面积较小有一面面向光源。第26页讨论:1、细胞质基质中叶绿体,是不是静止不动?为何?答:不是。呈椭球体形叶绿体在不一样光照条件下能够运动,这种运动能随时改变椭球体方向,使叶绿体既能接收较多光照,又不至于被强光灼伤。2、叶绿体形态和分布,与叶绿体功效有什么关系?答:叶绿体形态和分布都有利于接收光照,完成光合作用。如叶绿体在不一样光照条件下改变方向。又如叶子上面叶肉细胞中叶绿体比下面多,这能够接收更多光照。第27页试验五:经过模拟试验探究膜透性(必修一P60“问题探讨”)一.试验目标:1.说明生物膜含有选择透过性2.尝试模拟试验方法二.试验原理:一些半透膜(如动物膀胱膜、肠衣等),能够让一些物质透过,而另一些物质不能透过。或者(玻璃纸)水分子能够透过,而蔗糖分子因为比较大,不能透过。能够用半透膜将不一样浓度溶液分隔开,然后经过观察溶液液面高低改变,来观察半透膜选择透过特征,进而类比分析得出生物膜透性。三.方法步骤:1.取两个长颈漏斗,分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。2.在A漏斗中注入硫酸铜溶液,B漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少许红墨水,使其略呈红色。3.将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水烧杯中,在两漏斗液面处做标识4.静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色改变及长颈漏斗液面改变,并将观察到结果设计表格进行统计。第28页四.讨论:1.漏斗管内液面为何会升高?答:因为单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗水分子数量多于从长颈漏斗渗出水分子数量,使得管内液面升高。2.假如用一层纱布代替玻璃纸,漏斗管内液面还会升高吗?答:用纱布替换玻璃纸时,因纱布孔隙很大,蔗糖分子也能够自由通透,因而液面不会升高。3.假如烧杯中不是清水,而是一样浓度蔗糖溶液,结果会怎样?答:半透膜两侧溶液浓度相等时,单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗水分子数量等于渗出水分子数量,液面也不会升高。第29页试验六观察植物细胞质壁分离和复原(必修一P61“探究”)一、试验目标:1.学会观察植物细胞质壁分离与复原方法。2.了解植物细胞发生渗透作用原理。二.试验原理:1.质壁分离原理:当细胞液浓度小于外界溶液浓度时,细胞就会经过渗透作用而失水,细胞液中水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度收缩。因为原生质层比细胞壁收缩性大,当细胞不停失水时,原生质层就会与细胞壁分离。2.质壁分离复原原理:当细胞液浓度大于外界溶液浓度时,细胞就会经过渗透作用而吸水,外界溶液中水分就经过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐步发生质壁分离复原。二、试验材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮。因为液泡呈紫色,易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。第30页三、试验步骤:步骤注意问题分析1.制作洋葱表皮暂时装片。在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平(也可挑取几条水绵放入水滴中)。盖上盖玻片。盖盖玻片应让盖玻片一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。预防装片产生气泡。2.观察洋葱(或水绵)细胞可看到:液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。(或水绵细胞中有带状叶绿体,原生质层呈绿色,紧贴着细胞壁。液泡含花青素,所以液泡呈紫色。先观察正常细胞与后面“质壁分离”起对照作用。第31页3.观察质壁分离现象。从盖玻片一侧滴入0.3g/ml蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观察到:液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。重复几次糖液浓度不能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞经过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层伸缩性大,液泡和原生质层不停收缩,所以发生质壁分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。不然,细胞严重失水死亡,看不到质壁分离复原。4.观察细胞质壁分离复原现象。从盖玻片一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观察到:液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状。发生质壁分离装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。重复几次。细胞液浓度高于外界溶液,细胞经过渗透作用吸水,所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久,也会死亡。为了使细胞完全浸入清水中。第32页试验讨论答案:1.假如将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?答:表皮细胞维持原状,因为细胞液浓度与外界溶液浓度相等。2.当红细胞细胞膜两侧溶液含有浓度差时,红细胞会不会发生质壁分离?为何?答:不会。因为红细胞不具细胞壁。第33页(1)洋葱为何要选紫色?若紫色过淡怎么办?紫色洋葱有紫色大液泡,便于观察液泡大小改变;让阳光照射。(2)洋葱表皮应撕还是削?为何?表皮应撕不能削,因为削表皮往往太厚。(3)植物细胞为何会出现质壁分离?动物细胞会吗?当细胞失去水分时,其原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性;动物细胞不会发生质壁分离,因为动物细胞没有细胞壁。(4)质壁分离时,液泡大小和颜色改变?复原时呢?细胞发生质壁分离时,液泡变小,紫色加深;当细胞质壁分离复原时,液泡变大,紫色变浅。(5)若发生质壁分离后细胞,不能发生质壁分离复原,其原因是什么?细胞已经死亡(可能是外界溶液浓度过大,细胞失水过多或质壁分离时间过长)第34页(6)怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液浓度?①配制一系列浓度从小到大蔗糖溶液②分别用以上不一样浓度溶液制成某植物细胞暂时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液浓度就介于不能引发质壁分离浓度和能引发质壁分离浓度之间。第35页试验七探究影响酶活性原因(必修一P78、P83)一.试验目标:1.探究不一样温度和PH对过氧化氢酶活性影响。2.培养试验设计能力。二.方法步骤:提出问题→作出假设→设计试验→(包含选择试验材料、选择试验器具、确定试验步骤、设计试验统计表格)→实施试验→分析与结论→表示与交流。实例1:比较过氧化氢酶和Fe3+催化效率一).试验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%FeCl3溶液和质量分数为20%肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数25万倍。第36页二)方法步骤:步骤注意问题解释取4支洁净试管,编号,分别加入2mLH2O2溶液不让H2O2接触皮肤H2O2有一定腐蚀性将2号试管放在900C左右水浴中加热,观察气泡冒出情况,与1号对照向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜肝脏在制成研磨液因为酶含有高效性,若滴入FeCl3溶液中混有少许过氧化氢酶,会影响试验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数降低,活性降低研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内酶释放出来,增加酶与底物接触面积2-3min后,将点燃卫生香分别放入3号和4号试管内液面上方,观察复燃情况放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中现象:3号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,4号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无改变防止卫生香因潮湿而熄灭第37页实例2:温度对酶活性影响一)试验目标:1.初步学会探索温度对酶活性影响方法。2.探索淀粉酶在不一样温度下催化淀粉水解情况。二)试验原理:1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色复合物。2.淀粉酶能够使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不一样阶段中间产物遇碘后,会展现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售a-淀粉酶最适温度约600C三)方法步骤:第38页操作注意问题解释取3支试管,编上号,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液另取3支试管,编上号,然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液试管分成3组,分别放入热水(约600C)、沸水和冰块中,维持各自温度5min不能只用不一样温度处理淀粉溶液或酶溶液预防混合时,因为两种溶液温度不一样而使混合后温度发生改变,反应温度不是操作者所要控制温度,影响试验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下淀粉溶液中,摇匀后,维持各自温度5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色改变并统计碘液不能滴加太多预防影响试验现象观察第39页用表格形式显示试验步骤序号加入试剂或处理方法试管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL///新鲜淀粉酶溶液///1mL1mL1mL2保温5min600C1000C00C600C1000C00C3将a液加入到A试管,b液加入到B试管,c液加入到C试管中,摇匀4保温5min600C1000C00C5滴入碘液,摇匀2滴2滴2滴6观察现象并统计第40页实例3:PH值对酶活性影响操作步骤:用表格开式显示试验步骤:(注意操作次序不能错)序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL//3注入氢氧化钠溶液/1mL/4注入盐酸//1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保温5min7加入斐林试剂,边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min9观察3支试管中溶液颜色改变变统计第41页(1)为何要选新鲜肝脏?因为在不新鲜肝脏中,过氧化氢酶活性会因为细菌破坏而降低。(2)该试验中所用试管应选较粗还是较细?为何?应选取较粗,因为在较细试管中轻易形成大量气泡,而影响卫生香复燃。(3)为何要选动物肝脏组织来做试验,其它动植物组织研磨液能替换吗?因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富;其它动植物组织也含有少许过氧化氢酶,所以能够替换。(4)相同质量块状肝脏和肝脏研磨液,哪一个催化效果好?为何?研磨液效果好;因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢接触面积。(5)滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时,可否共用下个吸管?为何?不可共用,预防过氧化氢酶与氯化铁混合,而影响试验效果。第42页试验八叶绿体色素提取和分离(必修一P97)一.试验目标:二.试验原理:三、试验材料:幼嫩、鲜绿菠菜叶四、试验步骤:步骤注意问题分析1.提取色素5克绿叶剪碎,放入研钵,加SiO2、CaCO3和5mL丙酮(或10mL无水乙醇)快速、充分研磨。(若没有没有水乙醇,也可用体积分数为95%乙醇,但要加入适量无水碳酸钠,除去水分)加SiO2加CaCO3加丙酮快速加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3预防研磨时叶绿素受到破坏。叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。降低研磨过程叶绿素分解,降低有毒性丙酮挥发。第43页2.搜集滤液漏斗基部放一单层尼龙布,研磨倒入漏斗内挤压,将滤液搜集到小试管中,用棉花塞塞住试管口。尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了预防丙酮挥发。3.制备滤纸条将干燥滤纸,顺着纸纹剪成长10cm,宽1cm纸条,一端剪去二个角,并在距这一端1cm处划一铅笔线。干燥顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角可吸收更多滤液。层析时,色素分离效果好。可使层析液同时抵达滤液细线。4.划滤液细线用毛细吸管吸收少许滤液,沿铅笔线划出细、齐、直一条滤液细线,干后重复三次。滤液细线越细、越齐越好。重复三次。预防色素带之间部分重合。增加色素在滤纸上附着量,试验结果更显著。第44页胡萝卜素(橙黄色)叶黄素(黄色)叶绿素a(蓝绿色)叶绿素b(黄绿色)6.观察试验结果
5.纸层析法分离色素将3mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯。层析液不能没及滤纸条。烧杯要盖培养皿盖。预防色素溶解在层析液中,层析液中苯、丙酮、石油醚易挥发。6.观察试验结果扩散最快是胡萝卜素,扩散最慢是叶绿素b,含量最多是叶绿素a。四种色素之所以能被分离,是因为四种色素随层析液在滤纸上扩散速度不一样。第45页五:试验讨论:
1.滤纸条上滤液细线,为何不能触及层析液?答:滤纸条上滤液细线如触及层析液,滤纸上叶绿体色素就会溶解在层析液中,试验就会失败。2.提取和分离叶绿体色素关键是什么?答:提取叶绿体色素关键是:①叶片要新鲜、浓绿;②研磨要快速、充分;③滤液搜集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。分离叶绿体色素关键是:一是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。第46页(1)对叶片要求?为何要去掉叶柄和粗时脉?绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素极少。(2)二氧化硅作用?不加二氧化硅对试验有何影响?为了使研磨充分。不加二氧化硅,会使滤液和色素带颜色变浅。(3)丙酮作用?它可用什么来替换?用水能替换吗?溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替,但不能用水来代替,因为色素不溶于水。(4)碳酸钙作用?不加碳酸钙对试验有何影响?保护色素,预防在研磨时叶绿体中色素受到破坏。不加碳酸钙,滤液会变成黄绿色或褐色。(5)研磨为何要快速?要充分?过滤时为何用布不用滤纸?研磨快速,是为了预防丙酮大量挥发;只有充分研磨,才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能经过滤纸,但能经过尼龙布。(6)滤纸条为何要剪去两角?预防两侧层析液扩散过快。第47页(7)为何不能用钢笔或圆珠笔画线?因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素,会影响色素分离结果。(8)滤液细线为何要直?为何要重画几次?预防色素带重合;增加色素量,使色素带颜色更深一些。(9)滤液细线为何不能触到层析液?预防色素溶解到层析液中。(10)滤纸条上色素为何会分离?因为不一样色素在层析液中溶解度不一样,因而它们随层析液在滤纸条上扩散速度就不一样。(11)色素带最宽是什么色素?它在层析液中溶解度比什么色素大一些?最宽色素带是叶绿素a,它溶解度比叶绿素b大一些。(12)滤纸条上相互间距最大是哪两种色素?胡萝卜素和叶黄素。(13)色素带最窄是第几条色素带?为何?第一条色素带,因为胡萝卜素在叶绿体四种色素中含量最少。第48页试验九探究酵母菌呼吸方式(必修一P91)一.试验目标:二.试验原理:三.方法步骤:提出问题→作出假设→设计试验→(包含选择试验材料、选择试验器具、确定试验步骤、设计试验统计表格)→实施试验→分析与结论→表示与交流。1.酵母菌培养液配制取20g新鲜食用酵母菌,分成两等份,分别放入锥形瓶A(500mL)和锥形瓶B(500mL)中,再分别向瓶中注入240mL质量分数为5%葡萄糖溶液2.检测CO2产生用锥形瓶和其它材料用具组装好试验装置(如图),并连通橡皮球(或气泵),让空气间断而连续地依次经过3个锥形瓶(约50min)。然后将试验装置放到25-350C环境中培养8-10h。第49页3.检测洒精产生各取2mL酵母菌培养液滤液,分别注入2支洁净试管中。向试管中分别滴加0.5mL溶有0.1g重铬酸钾浓硫酸溶液(体积分数为95%-97%)并轻轻振荡,使它们混合均匀,观察试管中溶液颜色改变。第50页试验十观察细胞有丝分裂(必修一P115)一.试验目标:二.试验原理:三.试验材料:
洋葱(可用葱、蒜代替)。因为根尖生长点属于分生组织,细胞分裂能力强,易观察到有丝分裂各个时期细胞。四.试验步骤:步骤注意问题分析一、根尖培养试验前3~4天,让洋葱放在广口瓶上,底部接触清水。根长约5cm时可用。置于温暖处,常换水。因为细胞分裂和生长需要水分、适宜温度和氧气。第51页二、装片制作(解离→漂洗→染色→制片)1.解离:早晨10时至下午2时,剪取洋葱根尖2~3mm,马上放入盛有质量分数为15%盐酸和体积分数为95%酒精溶液混合液(1:1)玻璃皿中,室温下解离3~5min。解离时间要确保,细胞才能分散开来。解离时间也不宜过长。目标:溶解细胞间质,使组织中细胞相互分离开来。此时,细胞已被盐酸杀死。不然,根尖过于酥软,无法取出。2.漂洗:待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水玻璃皿中漂洗约10min。漂洗要充分,可换水1~2次。目标:洗去解离液,便于染色。3.染色:把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL龙胆紫溶液玻璃皿中染色3~5min。染色时间不宜过长,不然显微镜下一片紫色,无法观察。龙胆紫等为碱性染料,可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色第52页4.制片:用镊子将这段洋葱根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地压载玻片,使细胞分散开来。要弄碎根尖,再垂直向下均匀用力压片,不可移动盖玻片,目标:使细胞分散,防止细胞重合,便于观察。做得成功装片,标本被压成云雾状。三、观察1.低倍镜观察:把装片放在低倍镜下,慢慢移动装片,找到分生区细胞。2.高倍镜观察:移走低倍镜,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清楚,仔细观察,找出处于细胞分裂期中期细胞,再找出前期、后期、末期细胞。一定要找到分生区。在一个视野里,往往不轻易找全有丝分裂过程中各个时期细胞。假如是这么,能够慢慢地移动装片,从邻近分生区细胞中寻找。分生区细胞特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有细胞正处于分裂期。第53页讨论:制作好洋葱根尖有丝分裂装片关键是什么?答:制作好洋葱根尖有丝分裂装片关键有以下几点:(1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃时间;(2)
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