生化检验实验室基础知识

关于生化检验实验室基础知识

第二节常用玻璃器材的清洗、规格和使用规则

实验用玻璃仪器分为容器类和量器类。容器类玻璃仪器为常温或加热条件下，物质的反应容器和贮存容器，如试管、烧杯、锥形瓶、试剂瓶等。量器类玻璃仪器用于计量溶液体积，不能作为实验容器，如量筒、容量瓶、移液管、吸量管、滴定管等。第2页,共26页，2024年2月25日，星期天

（一）量筒用于不太精确的液体计量。不能用做反应容器，不能装热的液体。（二）容量瓶用于把精确称量的物质配置成准确浓度的溶液或是将准确容积及浓度的浓溶液稀释成准确浓度及容积的稀溶液。容量瓶与瓶塞要配套使用，使用时不要一次性将溶液加至刻度。容量瓶不能烘烤。一、普通玻璃仪器的使用第3页,共26页，2024年2月25日，星期天（三）移液管、吸量管移液管和吸量管是用于准确量取一定体积液体的量出式的玻璃量器。移液管用于吸取固定量的溶液。最精确。吸量管是具有分刻度的玻璃管，用于吸取非固定量的溶液。（四）自动加样器俗称加样枪，有固定式和可调式两种。其精密度和准确度高于吸量管。第4页,共26页，2024年2月25日，星期天

新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用肥皂水（或去污粉）洗刷再用自来水洗净，然后浸泡在l％～2％盐酸溶液中过夜（不少于4小时），再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，在100℃～130℃烘箱内烤干备用。二、普通玻璃仪器的清洗第5页,共26页，2024年2月25日，星期天1.容器类玻璃仪器如试管、烧杯、锥形瓶等。先用自来水洗刷至无污物，再选用大小合适的毛刷蘸取去污粉（掺入肥皂粉）或浸入肥皂水内。将器皿内外（特别是内壁）细心刷洗，用自来水冲洗干净后，蒸馏水冲洗2～3次，烤干或倒置在清洁处，干后备用。使用过的玻璃仪器的清洗第6页,共26页，2024年2月25日，星期天

清洁液的腐蚀性强，用时注意勿溅在皮肤和衣服上。它的吸水性较强，故应加盖贮存。如果清洁液的颜色逐渐变为绿色，表示效力降低，再加人适量的重铬酸钾和浓硫酸，还可继续使用；如已变成黑色，则不能再用。清洁液适用于事先清洗过但未能洗净的玻璃器皿，将水甩干后浸泡。未清洗或未消毒的器皿不要直接浸泡于清洁液中，否则会使清洁液迅速失效，减低洗涤能力。

清洁液的配制和使用

第7页,共26页，2024年2月25日，星期天第三节实验试剂配制与使用

临床生物化学检验实验需使用大量的化学试剂，因此，了解试剂的规格、性质及特点，掌握试剂的配制、应用及保管等方面的知识，对保证实验结果的准确性，避免和减少不应发生的错误和浪费是非常必要的。第8页,共26页，2024年2月25日，星期天一、化学试剂的等级标准

市场上供应的化学试剂分国产和国外进口两种。由于各国对生产的化学试剂品级规格不一致，选用时应特别注意。(一)国产化学试剂

根据国家标准(GB)或部颁标准(HG)规定，国产试剂一般分四级，各级的名称、符号及主要适用范围见表2—4。

(二)国外进口化学试剂

国外生产化学试剂规格种类繁多，常见国外进口化学试剂的国别和厂名有USA（美国）、E。Merek（德国）、Fluka（瑞士）、Jap（日本）Light（英国）等。第9页,共26页，2024年2月25日，星期天二、生物试剂的种类和应用

生物试剂是用于生物学、医学、药学等学科的科研与实践的专用试剂，分氨基酸、糖、酶、辅酶、蛋白质、核酸、植物碱、甾类化合物、生物染色素等几大类。生物试剂是探索生命奥秘和生物化学检验中的重要武器。以下仅介绍几种与医学检验有关的生物试剂。第10页,共26页，2024年2月25日，星期天三、化学试剂的保管

生物化学检验实验室所用的化学试剂种类很多，且规格要求较高，其中不少又属于剧毒、易爆、易燃、腐蚀性试剂。为防止因储存、使用不当，造成危险事故的发生，保证实验结果的准确性不受试剂变质的影响，了解有关化学试剂的正确保管是十分必要的。

第11页,共26页，2024年2月25日，星期天注意事项

1.储存化学试剂的库房应通风，干燥，冷暗。

2．试剂须按液体、固体分类分开存放，并按序排好，做好标记，便于查找。

3．易燃、易挥发试剂除应盖好内塞瓶盖外，还应用胶粘带密封，以防挥发和泄漏。

4．剧毒药品应专人专柜保管存放，每次使用后要记录用量。

5．强酸、强碱试剂应分开存放。

6．生物制品、酶类制剂均应避光冰箱低温保存。第12页,共26页，2024年2月25日，星期天第四节临床生物化学检验实验室常规仪器使用方法

临床生物化学检验实验需各种仪器，如离心机、电热恒温水浴箱、电热恒温干燥箱、电热搅拌仪、电冰箱和各种光学分析仪等，因此，了解这些仪器的正确使用和保养方法等知识，对保证实验结果的准确性，是非常必要的。第13页,共26页，2024年2月25日，星期天一、离心机

离心分离原理就是利用离心机在高速旋转时产生的强大离心力，使悬浮于溶液中密度不同的微粒依不同的速度沉降，从而达到分离、纯化、制备的目的。离心机的种类很多，按其转速的不同，分普通离心机(<6000rom)、高速离心机(6000~25000rpm)和超高速离心机>30000rpm)。

第14页,共26页，2024年2月25日，星期天二、电热恒温水浴箱

电热恒温水浴箱简称水浴箱，主要用于恒温水热，保持化学反应所需恒温条件。加热装置为浸入式电热管，温度控制为螺旋管式温控器，灵敏度一般为±0．5℃。第15页,共26页，2024年2月25日，星期天

三、电热恒温干燥箱

电热恒温干燥箱又称烤箱，其主要用途是加热烘干洗净的物品和干热灭菌；恒温范围一般为50℃~300℃，温控灵敏度为±1℃。第16页,共26页，2024年2月25日，星期天第五节临床生物化学检验标本采集临床生物化学检验标本的正确采集和处理，是保证分析检测结果准确可靠的一个十分重要的环节。随着科学技术的迅速发展，新技术、新仪器、新试剂盒在检验工作中的大量应用，检测方法的灵敏度和特异性都有显著的提高。在分析检测过程所致的误差已大大减少的今天，往往不易为检测者发现和引起重视的一些非分析检测过程所致的误差，如标本的采集与处理，则必须给予高度重视。第17页,共26页，2024年2月25日，星期天一、标本采集前应考虑的因素

体液中的化学成分，除受病理性因素影响外，还有许多非病理性因素影响体液中化学成分浓度的波动或干扰其测定结果，导致测定结果不能客观的反映病人的真实情况。常见的影响因素有标本采集的时间、体位、年龄、性别、运动、情绪、食物和药物等。第18页,共26页，2024年2月25日，星期天(一)运动的影响

运动对体液化学成分影响程度受运动时间、强度、及平时有无体育训练习惯有关。运动会致机体新陈代谢加快，细胞内ATP减少，细胞膜通透性增加，导致许多胞内酶如天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、碱性磷酸酶等在血清中的活性增高，乳酸明显增高，尿酸和血pH上升。

第19页,共26页，2024年2月25日，星期天(二)饮食的影响

饮食对体液化学成分的影响与饮食量和食品性质有关。一般饮食后可使血糖、钾、铁、三脂酰甘油、胆固醇等浓度升高。高蛋白饮食可使血清中尿素、尿酸及氨略升高，但对肌酐的影响不大。饮茶、咖啡可使体内儿茶酚胺释放增多，葡萄糖浓度略升高，饮咖啡可使血中游离脂肪酸明显升高。饮酒可使血液中乳酸、尿酸、丙氨酸氨基转移酶、丁—谷氨酰升高，长期饮酒者，往往伴高三脂酰甘油血症及γ—谷氨酰基移换酶不正常。第20页,共26页，2024年2月25日，星期天(三)药物的影响

药物对体液化学成分测定结果的影响主要有两种原因，一种是由药物引起的生理变化后，导致血中某些化学成分浓度的改变。如服用利尿药，可使血钾浓度降低；长期服用避孕药，可使丙氨酸氨基转移酶、γ—谷氨酰基移换酶活性升高。另一种是由于存在于体液中的药物本身对分析方法的干扰，这种干扰由药物本身的理化性质，如颜色、荧光、氧化还原性及对酶抑制所致，如服用维生素C对Tdnder反应的干扰第21页,共26页，2024年2月25日，星期天二、血液标本的采集与保存

(一)采集标本前

要逐一核对病人姓名，床号，检品联号，要严防出现化验单上的编号与标本号不一致，分离血清或加样时吸错管号等过失错误。

(二)采血部位

一般从肘静脉取血，若肘静脉不明显，可采手背静脉血，幼儿可从颈外静脉采血。第22页,共26页，2024年2月25日，星期天(三)防止溶血

选用清洁干燥注射器，取血后应先去掉针头，沿管壁将血缓缓注入洁净干燥的容器内，忌用力推压注射器，防止冲击致血细胞破碎而发生溶血。(四)抗凝剂

用血浆作标本时，需在血液：中加入抗凝剂，抗凝剂种类较多，性质及抗凝原理各异，必须根据检测项目，正确选用抗凝剂，否则，会直接影响测定结果。抗凝剂的种类有草酸钾、氟化钠—草酸钾、肝素。

(五)血液标本的保存

血液标本采集后，必须及时送检，为防止血清与红细胞间的物质交换，应及时分离血清(浆)，如不及时分离会导致细胞内钾转移至血清，使血清钾升高。血清中葡萄糖因酵解致血清葡萄糖浓度降低。不能及时检测的标本或需保留以备复查的标本，一般应置4℃～6℃冰箱保存。

第23页,共26页，2024年2月25日，星期天三、尿液标本的收集与保存

尿液标本分随机性一次新鲜尿，定时尿及24小时尿。定量分析多用24小时尿。

(一)24小时尿标本收集第一天嘱病人将尿排尽弃去，并记录排尿时间，以后每次排出的尿均收集于洁净干燥带盖的容器中，直至收集至第二天同一时间最后一次排尿为止。混匀，测量其总量，此即为24小时尿。

第24页,共26页，2024年2月25日，星期天(二)尿液标本的保存

尿液易长细菌，而细菌的生长会致尿液中化学成分发生改变。故24小时尿的收集，均应在收集第一次尿时即加入防腐剂。如10％麝香草酚异丙醇溶液(加量5m1)，加有此种防腐剂的尿标本适宜于糖、胆红素、