2024版新教材高中生物第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用课时作业新人教版选择性必修3

第2节微生物的培育技术及应用一微生物的基本培育技术必备学问基础练进阶训练第一层学问点1培育基的配制1.对微生物所需养分物质的描述，正确的是()A．氮源只作为合成蛋白质的原料B．碳源只作为能源物质C．无机盐可有可无D．水是重要的养分要素之一2．下面是牛肉膏蛋白胨培育基的成分表，其中的牛肉膏和蛋白胨能够供应()成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mLA.碳源B．氮源C.维生素D．包括A、B、C三项3．对微生物所需养分物质的描述，正确的是()A.蛋白质通常是作为碳源B.葡萄糖可作为氮源C.维生素可通过组织提取液供应D.必需添加琼脂后养分物质才能被利用4．关于培育基的配制，下列叙述错误的是()A.在配制培育乳酸菌的培育基时，需加入维生素B.微生物的适应性强，配制培育基时可以不考虑pHC.在液体培育基中加入琼脂可以制成固体培育基D.配制培育基时要留意各种养分的浓度和比例5．[2024·浙江高二校联考期中]凡是微生物生长、繁殖等各种生理活动所需的物质统称为微生物养分物质。下列叙述正确的是()A.全部的碳源都能供应能量B.无机物不能作为碳源或氮源C.同一物质可能既作为碳源又作为氮源D.任何培育基都必需含有水、无机盐、碳源和氮源6．[2024·四川绵阳高二统考期末]人们依据微生物对养分物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的养分物质——培育基，下列有关培育基的叙述，错误的是()A.液体培育基要制成固体培育基，可在培育基中加入琼脂B.细菌在固体培育基上生长，可以形成肉眼可见的菌落C.每种培育基都含有水、碳源、氮源、无机盐等养分物质D.培育基还需满足微生物对pH、特别养分物质及O2的需求学问点2无菌技术7.[2024·江苏淮安高二校考]无菌技术是发酵工程的重要技术。运用的接种针、接种环，最好接受的灭菌方法是()A．紫外线等射线灭菌法B．干热空气灭菌法C．湿热灭菌法D．火焰灼烧灭菌法8．高压蒸汽灭菌锅是一种常用的灭菌设备，其灭菌原理是利用高温高压条件导致()A．菌体和芽孢都存活B．菌体死亡但芽孢存活C．菌体和芽孢都死亡D．菌体存活但芽孢死亡9．[2024·河南商丘一中校考]微生物培育过程中，要特别重视无菌操作，现代生物学试验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的有几项()①煮沸消毒可以杀死微生物的养分细胞和一部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰旁边进行③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④培育基要进行湿热灭菌⑤加入培育基中的指示剂或染色剂不须要灭菌A．一项B．二项C．三项D．四项学问点3微生物的纯培育10.[2024·江苏淮安高二校考]将微生物接入培育基的操作过程称为接种。下列是关于接种方法的叙述，错误的是()A．用涂布器可进行平板稀释涂布接种B．用接种针可进行穿刺接种C．用接种环在平板培育基上划线接种D．用接种针在试管里做斜面接种11．[2024·山东济宁高二校考]下列有关平板划线法操作的叙述，错误的是()A．将接种环放在酒精灯火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C．蘸取菌液和划线均要在酒精灯火焰旁进行D．接种环划线时要将最终一次的划线与第一次的划线相连12．[2024·江苏淮安高二校考]下图是接受平板划线法划线后的示意图。下列有关说法错误的是()A．划线前，应在培育皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号B．在培育基表面连续划线，除第一次划线外，每一次划线都从上一次划线的末端起先C．接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行D．该试验中，接种环的灼烧次数有3次13．酵母菌品质的好坏是影响葡萄酒产量和质量的重要因素。某酒业集团针对山葡萄酸高、糖低、浸出物高等特点，分别出了适合山葡萄发酵的最佳酵母菌种——长白山1号酵母。下列有关酵母菌发酵与培育的说法错误的是()A．长白山1号酵母相较于其他酵母品种更适应酸性环境B．为增加葡萄酒的甜度与酒精度，可适当补加确定量糖源C.山葡萄汁中的糖分为酵母菌生长繁殖供应了碳源和氮源D．试验室培育酵母菌时可加入适量抗生素以防杂菌污染14．[2024·河南洛阳高二校联考]如图为试验室培育和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤。下列叙述错误的是()A．①倒平板时，培育皿倒入培育基后要马上倒放于超净试验台上B．②步骤接种环经灼烧灭菌冷却后蘸取菌液C．③步骤应多个方向划线，使接种物慢慢稀释，培育后出现单个菌落D．接种结束待菌液被培育基吸取后，将④倒置培育，皿底上标注菌种及接种日期等信息15．(不定项)酵母菌的纯化培育过程中，完成稀释涂布平板后，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温箱中培育。下列叙述正确的是()A．用未接种的平板共同培育，其目的是检验培育过程中是否有杂菌污染B．完成稀释涂布平板接种后，需马上将平板倒置，以免表面干燥，影响菌的生长C．倒置培育有利于削减水分蒸发，削减杂菌污染，便利视察计数D．上述培育结束后，若出现了不同形态、大小的菌落，可能的缘由是接种环未灼烧实力素养综合练进阶训练其次层1．培育基须要满足微生物生长对pH、特别养分物质以及O2的需求。下列叙述错误的是()A．培育霉菌时，培育液调至酸性B．培育细菌时，培育基调至强碱性C．培育厌氧微生物时，供应无氧的条件D．培育乳酸菌时，培育基中添加维生素2．[2024·山西太原师范学院附属中学校联考]下列有关微生物培育基及其配制的叙述，正确的是()A．对培育基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等B．若须要调整pH，则应当在对培育基进行湿热灭菌后进行调整C．家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母菌等的培育基D．试验用过的带菌培育基必需经消毒后才能倒掉3．[2024·山西晋中高二校考]下列与微生物试验室培育有关的描述，正确的是()A．培育霉菌和细菌时需将pH调至中性或弱碱性B．平板划线法可以对微生物进行分别和纯化C．干热灭菌应在160～170℃的热空气中维持1～2h，培育基可接受这种方法进行灭菌D．接种环、接种针、涂布器等用具，可以在酒精灯火焰的内焰部分灼烧灭菌4．[2024·山西太原师范学院附属中学校联考]消毒和灭菌是微生物培育中常用的操作方法。下列说法正确的是()A．微生物接种技术的方法不同，但核心都是要防止杂菌污染，保证培育物的纯度B．在100℃条件下煮沸5～6min属于灭菌方法，可杀死微生物的养分细胞和一部分芽孢C．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌D．高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子5．[2024·河南南阳高二校联考]如图是微生物纯培育中平板划线分散单个微生物示意图。下列有关叙述正确的是()A．划线前培育基都必需运用湿热灭菌法灭菌B．划线前后都要将接种环放在酒精灯的火焰旁灭菌C．划线区都有菌落，但一般在5区域得到纯培育物D．划线时要留意将第5次的末端与第1次的划线相连6．微生物培育时常用到无菌技术避开杂菌污染，相关叙述正确的是()A．无菌技术包括对操作者的衣着和手进行灭菌B．倒平板时应当把培育皿盖完全打开，以免培育基溅到培育皿盖上C．配制好的培育基应放入干热灭菌箱中进行灭菌D．接种前后接种环都必需灼烧灭菌7．关于试验室培育和纯化酵母菌过程中的部分操作，下列说法正确的是()A．培育酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌B．配制培育基、倒平板、接种均须要在酒精灯火焰旁进行C．倒好的平板要马上运用，以免表面干燥，影响酵母菌生长D．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线8．[2024·江苏淮安模拟](不定项)下列是关于“酵母菌的纯培育”试验操作的叙述，正确的是()A．将接种环的环端和可能伸入试管的部分在火焰上来回灼烧多次，以达到彻底灭菌的目的B．灼烧的接种环在酒精灯火焰旁冷却后，伸入菌种管轻挑少许菌体C．从菌种管抽出接种环时，不能让其带菌部位触及管壁D．接种环在斜面接种后，需多次灼烧以保证无菌，冷却后放回原处9.[2024·陕西宝鸡一模]微生物的试验室培育，既须要为微生物供应适宜的生存条件，还要防止其他微生物的混入。回答下列有关问题：(1)配制培育基是培育微生物的第一步。各种培育基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、________、N源；而培育基的种类也各不相同，假如按物理性质分，包括固体培育基和________。(2)试验室常运用牛肉膏蛋白胨培育基，其在加入琼脂后，呈现的物理状态为________，若用该培育基来培育细菌，还须要将培育基的pH调至________________。(3)培育微生物时应做好消毒和灭菌工作。倒平板的整个过程都须要在酒精灯火焰旁边操作，以防杂菌污染，这一操作属于________(填“消毒”或“灭菌”)手段。(4)平板划线时要连续划线操作，其目的是将菌种不断稀释，直至成为由一个细胞繁殖而来的群体，称为________。划线时应留意，第一区的划线与最终一区的划线______(填“应当”或“不应”)相连。10．[2024·江苏淮安高二校考]下表是某微生物培育基的配方。请分析回答下列问题：编号①②③④⑤⑥成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4Na2HPO4CaCl2H2O含量0.4g4.0g0.5g1.2g0.5g100mL(1)为防止杂菌污染，常用________________法对培育基灭菌。(2)培育基的配方是依据微生物的养分需求而设定的，从培育基的养分成分看，此培育基可用来培育的微生物同化作用类型是________(填“自养型”或“异养型”)。利用该培育基培育微生物时，微生物所须要的碳源来自________(填“培育基”或“空气”)。(3)微生物从培育基中以________(填“分子”“原子”或“离子”)形式吸取物质①。物质①吸取后可用来合成______________等生物大分子。(4)若要视察培育基表面菌落的特点，培育基中还应添加的成分是________。鉴定菌种时，可依据菌落的__________________________(至少答两点)等方面的特征进行鉴定。(5)培育基中添加确定量物质②和④，请分析所起的作用__________________________________________________________________(至少说出两点)。11．琼脂是一种多糖类物质，由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培育基时常用的凝固剂之一。某试验室在处理一批已进行过微生物培育的废弃固体培育基时发觉，几乎全部培育基上的微生物都已死亡，但在其中一个培育基上存在一个正常生长的菌落。对此，探讨人员做出了以下假说：①此培育基内的养分未被消耗殆尽；②形成此菌落的为自养型微生物；③形成此菌落的微生物能利用琼脂。(1)从探讨人员所作的假说可以推想①所说的“养分”指的最可能是________________(填“碳源”“氮源”或“无机盐”)。(2)制备牛肉膏蛋白胨培育基的步骤包括：________、灭菌、倒平板。倒平板所用的培育皿和培育基所用的灭菌方法依次是________________和________________。(3)为了检验上述假说①是否正确，探讨人员分别运用两种培育基对上述微生物进行培育，其中一种为牛肉膏蛋白胨培育基a，则另一培育基b中不能加入下列的________。A.牛肉膏B．蛋白胨C.氯化钠D．琼脂(4)若上述a、b培育足够长时间，菌落生长状况为____________________________________时，则解除了假说②③，证明假说①正确。(5)若上述试验否定了假说①，为进一步检验假说②和③，探讨人员想要配制一种新的培育基c，并通过b与c上是否出现菌落作为视察指标，则与b相比，c的成分须要做出的变更是________________________________________________________________________。二微生物的选择培育和计数必备学问基础练进阶训练第一层学问点1选择培育基1.美国科学家布鲁克从热泉中筛选到水生耐热细菌Taq，并从中分别得到了耐高温的TaqDNA聚合酶，解决了体外DNA大量复制的技术问题。下列微生物筛选原理，除哪项外都与之相像()A．从加工糖果、蜂蜜的土壤环境中找寻耐渗透压酵母菌B．从油田土环境中筛选石油分解菌C．从富含纤维素的环境中找寻纤维素分解菌D．从中性或偏碱环境中筛选霉菌2．为了筛选能产生阿拉伯胶(一种多糖)降解酶的菌株SM01，应选用以下表中哪种培育基()(单位：g/L)eq\o(\s\up7(培育),\s\do5(基))eq\o(\s\up7(阿拉),\s\do5(伯胶))eq\o(\s\up7(阿拉伯),\s\do5(胶酶))NaNO3牛肉膏MgSO4KClFeSO4甲25－－310.50.01乙2510－6－－10.50.01丙－－3310.50.01丁25－3－10.50.01A.甲B．乙C.丙D．丁3．下列关于选择培育基的叙述，错误的是()A.选择培育基可允许特定种类的微生物在其上生长B.制备选择培育基时，应依据所选微生物的特点确定培育基的配方C.筛选能分解尿素的细菌时，应以尿素作为唯一的氮源D.与一般培育基相比，选择培育基上生长的微生物的数量一般较多学问点2微生物的选择培育4.[2024·山西太原五中校考]分别土壤中分解尿素的细菌，对培育基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐⑨加青霉素⑩不加青霉素A．①③⑤⑧⑨B．②④⑤⑧⑩C．①③⑤⑧⑩D．①④⑤⑧⑩5．下列操作须要在火焰旁进行的一组是()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培育A．①②③④⑤B．②③④⑤C．③④⑤D．②③④6．下列能选择出分解尿素的细菌的培育基是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素，琼脂、蒸馏水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水7．某种土壤细菌可将尿素(CH4N2O)分解为CO2和NH3，但分解产物CO2不能为该菌供应养分。若欲筛选出该种土壤细菌，仅考虑碳源和氮源，下列培育基设置合理的是()A．仅尿素就可以，既是碳源也是氮源B．仅葡萄糖就可以，可以从空气中固氮C．尿素为氮源，须要葡萄糖作为碳源D．牛肉膏蛋白胨含C和N，可以满足该培育基的碳源和氮源8．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是()A．都只能用于固体培育基接种B．都须要对菌液进行梯度稀释C．接种培育后均可获得单菌落D．接种工具运用后均须要灭菌9．在农业生产中，为了提高农作物的产量，人们会向农田中施用大量的化学肥料。农田中化肥残留过多会影响土壤的理化性质。利用微生物分解残留化肥的效果较好，为了筛选并保存高效分解尿素的微生物，探讨人员配制了两份培育基，如下表所示。下列相关叙述不正确的是()编号成分甲KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水A.尿素分解菌可干脆以尿素作为氮源B.尿素分解菌可用乙培育基进行筛选C.可用稀释涂布平板法来统计土壤样品中分解尿素的活菌数量D.平板划线法时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线学问点3微生物的数量测定10.下列不能测定样品微生物数的方法是()A．稀释涂布平板法B．显微镜干脆计数法C．滤膜法D．平板划线法11．某同学测得每克土壤样品中分解尿素菌落数是2×108个，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL，且每个平板上的菌落数分别为190、200、210个，则土壤样品的稀释倍数为()A．103B．104C．105D．10612．[2024·湖南长沙长郡中学校考]用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推想出样品中的活菌数，缘由是()A．菌落中的细菌数目是固定的B．平板上的一个菌落就是一个细菌C．通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌13．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是()A．接受稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落C．为了保证结果精确，一般接受菌落密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果14．下图为某同学进行“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”的试验过程示意图。据此推算出每克土壤样品中的该种细菌的数量是()A．1.7×107B．1.7×108C．1.7×109D．1.7×101015．某爱好小组从校内土壤取样，进行“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”试验。小明取10g土壤进行稀释，并从稀释度为106的培育基中筛选出约120个菌落，而其他同学只筛选出约40个菌落。下列叙述错误的是()A．小明出现这种结果的可能缘由之一是和其他同学取样的土壤不相同B．要证明培育基是否受到污染，可将小明配制的空白培育基进行培育C．当稀释倍数太小时，可能由于菌落发生重叠进而导致计数结果偏小D．其他同学10g土样的细菌悬液中分解尿素的细菌数量约为4×108个实力素养综合练进阶训练其次层1．[2024·山西运城高二校联考]下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”试验的叙述，错误的是()A．可以在长期运用尿素肥料的农田土壤中采集土样B.分别菌种所接受的培育基需添加尿素为唯一氮源C.利用稀释涂布平板法纯化菌种时常用菌落数作为统计结果D．实施本试验时所用平板和试管的数目不多而且耗时也较短2．如图为从土壤中分别纯化尿素分解菌的过程。分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培育基碱性增加，pH上升，酚红指示剂会变成红色。下列有关叙述错误的是()A．④过程接受稀释涂布平板法进行接种，接种工具是接种环B．图中所用培育基灭菌常用的方法是湿热灭菌C．①②③④培育基都应以尿素为唯一氮源D．可用酚红染料鉴定，视察菌落四周是否出现红色圈3．[2024·四川雅安中学校考]下列有关分解尿素的细菌，说法正确的是()A．以尿素为唯一氮源的固体培育基平板上可以分别出根瘤菌B．筛选分解尿素的细菌时，培育基中唯一的养分物质是尿素C．加有酚红的以尿素为唯一氮源的培育基，兼有选择与鉴别目标菌种的功能D．脲酶须要经过内质网和高尔基体的加工后才具有生物学活性4．[2024·广东潮州统考期末]下图为探讨人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的流程图，有关叙述不正确的是()A.配制步骤②、③的培育基都要进行严格灭菌B．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的实力C．步骤③接受涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培育基中加入尿素D．步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落5．在“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”探究实践中，要规范地进行无菌操作。下列与无菌操作相关的说法，正确的是()A．为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培育基分装到培育皿中再进行湿热灭菌B．将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释C．将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必需先冷却再进行涂布平板操作D．待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的视察和计数6．如图是某小组培育从土壤中分别出能够分解尿素的细菌的结果示意图，以下相关说法正确的是()A．运用图1所示的接种方法统计所得的活菌数比实际值偏高B．运用图2所示的接种方法需把接种环插入到培育基中操作C．若所得菌落的形态、大小、颜色不一说明土壤中含多种分解尿素细菌D．分别尿素分解菌时需往完全培育基中额外加入尿素制成选择培育基7．[2024·江苏淮安高二校考](不定项)下列相关叙述中正确的是()A．可用平板划线法对微生物进行分别、纯化和计数B．运用过的微生物培育基应进行湿热灭菌处理后再丢弃C．将未接种的平板培育并视察有无菌落，以推断平板是否合格D．可用血球计数板和显微镜对细菌干脆视察计数8．[2024·辽宁模拟预料](不定项)进行土壤中尿素分解菌的选择培育时，利用的培育基组分及含量如表所示。下列分析错误的是()组分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0gH2O定容至1000mLA.KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体供应无机盐，又可调整培育基的pHB.尿素既可为尿素分解菌供应氮源，又可对培育基中的微生物起选择作用C.琼脂既可为尿素分解菌供应碳源，又起到凝固剂的作用D.蒸馏水既可进行定容，又可对培育液进行稀释以便于计数9.[2024·河南新乡二模]产脲酶微生物是能分泌脲酶的一类微生物的统称。试验人员筛选获得了一株能耐受酸性环境的产脲酶菌株，该菌株在pH为4.5～5.5的酒中具有活性，可以消退酒中的尿素，以抑制致癌物质——氨基甲酸乙酯的形成。回答下列问题：(1)产脲酶菌株分泌的脲酶能催化尿素分解生成____________________。配制用于筛选产脲酶菌株的培育基时，对培育基灭菌常用的方法是________________，尿素须要在灭菌后加入，缘由是______________________。(2)某同学设计的两种培育基的部支配方如下表所示：培育基葡萄糖无机盐尿素琼脂水A＋＋＋＋＋B＋＋＋－＋其中能用于筛选纯化产脲酶细菌的是培育基________(填“A”或“B”)，推断依据是________________________________________________________________________。10．[2024·浙江舟山统考模拟预料]下图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：(1)土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中产生的__________________催化尿素分解成NH3和CO2。某同学配制以下的培育基成分：葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O(定容至1000mL)。分析培育基的成分可知，上述培育基________(填“能”或“不能”)用于分别出能分解尿素的细菌，理由是__________________________________________________________________________。(2)若在3个细菌培育基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0.1mL，培育一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推想每克土壤样品中的细菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，缘由是________________________________________________________________________。11．生物降解法是常用的降解农药的方法，某探讨小组为分别出能降解敌敌畏(一种有毒的有机农药)的细菌，进行了以下相关操作。回答下列问题：(1)分别原理：土壤中的某种细菌能合成____________，这种物质在把敌敌畏分解成无机物的过程中发挥重要作用。(2)试验流程：①从富含敌敌畏的环境中采集土样配制成土壤菌液。从稀释10倍的菌液中取1mL菌液，加入______中，获得稀释100倍的菌悬液，如此操作直到稀释1000倍。②配制以________为唯一碳源的培育基，并将pH调至中性或弱________性，之后灭菌，倒平板，冷却后需将平板________。③用________法接种细菌，该方法能成功统计菌落数目的关键是选择恰当的________，统计的菌落数通常比实际数目____(填“高”或“低”)。一微生物的基本培育技术必备学问基础练1．答案：D解析：氮源除了用于合成蛋白质以外，还要参与合成核酸、ATP等物质，A错误；碳源主要用于构成微生物体细胞的物质和一些代谢物，B错误；无机盐对微生物的生长是必需的，C错误；水是微生物生命活动必需的一种重要物质，D正确。2．答案：D解析：牛肉膏和蛋白胨含有蛋白质、脂质等有机物，还含有维生素，D正确。3．答案：C解析：蛋白质通常是作为氮源，用于合成蛋白质和参与合成核酸、ATP等物质，A错误；葡萄糖作为碳源，可以给微生物的生长供应能源，B错误；维生素可通过组织提取液供应，C正确；培育基有固体培育基和液体培育基，其中液体培育基不须要添加琼脂，D错误。4．答案：B解析：乳酸菌自身不能合成维生素，而维生素又是维持其生命活动不行缺少的，故需在培育基中添加，A正确；pH影响微生物的生长和代谢，配制培育基时pH确定要适宜，B错误；琼脂在44℃以下凝固，在常规培育条件下呈固态，在液体培育基中加入琼脂可以制成固体培育基，C正确；微生物也是由C、H、O、N、P、S等元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物，可归纳为碳源、氮源、水、无机盐等，但配制时要留意各种养分的浓度和比例，D正确。5．答案：C解析：无机碳源如CO2不能供应能量，A错误；无机物能作为碳源或氮源，如CO2或N2，B错误；同一物质可能既作为碳源又作为氮源，如牛肉膏、蛋白胨，C正确；自养型微生物培育基中可不加入碳源，固氮微生物培育基中可不加入氮源，D错误。6．答案：C解析：琼脂是凝固剂，所以液体培育基要制成固体培育基，可在培育基中加入琼脂，A正确；细菌在固体培育基上生长，可以形成肉眼可见的菌落，B正确；不同微生物生长习性不同，所以不是每种微生物的培育基都含有水、碳源、氮源、无机盐等养分物质，例如培育硝化细菌的培育基不须要加入碳源，C错误；培育基还需满足微生物对pH、特别养分物质及O2的需求，D正确。7．答案：D解析：紫外线等射线灭菌法适用于接种室、接种箱或超净工作台，A项不符合题意；干热空气灭菌法适用于耐高温的和须要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿等)、金属用具等，B项不符合题意；湿热灭菌法是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽灭菌的方法，一般培育基的灭菌常用该方法，C项不符合题意；灼烧灭菌法是指将微生物的接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，干脆在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以快速彻底的灭菌，D项符合题意。8．答案：C解析：湿热灭菌可以杀死包括芽孢在内的全部微生物，因此利用高温高压条件导致菌体和芽孢都死亡。9．答案：B解析：煮沸消毒法，即利用煮沸100℃经5～6min，可杀死微生物的养分细胞和一部分芽孢，①正确；酒精灯火焰旁边存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰旁边进行，②正确；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的野生型酵母菌，故不能对葡萄进行灭菌，③错误；培育基灭菌常用湿热灭菌法，④正确；需进行灭菌的有器皿、培育基、添加剂(指示剂或染色剂)等，⑤错误。综上所述，B正确。10．答案：D解析：涂布器是常用的接种工具，平板稀释涂布接种接受的是玻璃涂布器，A正确；穿刺接种接受的是接种针，B正确；平板划线法用接种环在平板培育基上划线接种，C正确；斜面接种接受的是接种环，D错误。11．答案：D解析：接种环应当接受灼烧灭菌法进行灭菌，即将接种环放在火焰上灼烧，A正确；将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液，防止高温杀死菌种，B正确；为防止杂菌污染，蘸取菌液和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确；划线时，在进行其次次以及其后的划线操作时要从上一次划线的末端起先划线，且不能将最终一次的划线与第一次的划线相连，D错误。12．答案：D解析：试验过程中运用的平板较多，为避开混淆，运用前做好标记，应在划线前，在培育皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号，A正确；在培育基表面连续划线，除第一次划线外，每一次划线都从上一次划线的末端起先，目的是使微生物数目随划线次数的增加而慢慢削减，最终分散成单个细胞，B正确；微生物试验操作要防止杂菌污染，因此接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确；每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，该试验划线3次，因此灼烧次数为4次，D错误。13．答案：C解析：依据题意可知，长白山1号酵母是针对山葡萄酸高、糖低、浸出物高等特点而分别出的酵母菌种，故其耐酸性更好，A正确；山葡萄中糖低，可适当补加确定量糖源来增加葡萄酒的甜度与酒精度，B正确；山葡萄汁中的糖分只能为酵母菌生长繁殖供应碳源，C错误；抗生素可抑制细菌的生长、繁殖，真菌则不受影响，因此培育酵母菌时加入适量抗生素可防止杂菌污染，D正确。14．答案：A解析：①将锥形瓶中的培育基倒入培育皿，冷却后，倒放于超净试验台上，假如不冷却就倒置会使培育基流到皿盖皿底之间，造成污染，A错误；②中接种环经灼烧灭菌后应冷却后再挑取菌液，以防高温杀死酵母菌，B正确；③步骤应多个方向划线，可使接种物慢慢稀释，得到单个酵母菌培育后出现的单个菌落，C正确；图中操作结束后，为了防止培育皿盖上的水珠滴落到培育基造成污染，须要将培育皿倒置培育，且同时在皿底标注菌种及接种日期等信息，D正确。15．答案：AC解析：用未接种的平板共同培育，可以检验培育过程中是否有杂菌污染，若有污染，则未接种的平板上会有微生物生长，A正确；完成稀释涂布平板接种后，需静置后再将平板倒置，否则菌液滑落，导致接种失败，B错误；将培育皿倒置培育有利于削减水分蒸发，防止冷凝水滴落冲散单菌落，削减杂菌污染，便利视察计数，C正确；上述培育结束后若出现了不同形态、大小的菌落可能的缘由是酵母菌的种类不同，D错误。实力素养综合练1．答案：B解析：培育霉菌时需将培育基的pH调至酸性，A正确；培育细菌时，须要将培育基调至中性或弱碱性，B错误；培育厌氧微生物时，供应无氧的条件，C正确；培育乳酸杆菌时，培育基中添加维生素，D正确。2．答案：C解析：对培育基常用的灭菌方法是湿热灭菌，A错误；若须要调整pH，则应当在对培育基灭菌前进行调整，B错误；家庭制作腐乳时，毛霉、曲霉、酵母菌等所需养分物质均来自豆腐块，因此豆腐块就是它们的培育基，C正确；试验用过的带菌培育基必需经灭菌后才能倒掉，D错误。3．答案：B解析：用于培育细菌的培育基应将pH调至中性或弱碱性，而用于培育真菌的培育基应将pH调至酸性，A错误；平板划线法可以对微生物进行分别和纯化，B正确；培育基常用湿热灭菌法进行灭菌，C错误；接种环、接种针、涂布器等用具，可以在酒精灯火焰的外焰部分灼烧灭菌，外焰的温度最高，D错误。4．答案：A解析：微生物接种技术包括稀释涂布平板法和平板划线法等，虽然接种方法各不相同，但核心都是要防止杂菌污染，保证获得纯净的培育物，A正确；在100℃条件下煮沸5～6min属于煮沸消毒法，可杀死微生物的养分细胞和一部分芽孢，但不属于灭菌方法，B错误；无菌技术中，若处理对象为液体，则可以接受灭菌的方法，如培育液可以利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，C错误；运用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时，只有当压力表的压力降到零时，才能打开排气阀，拧松螺栓，打开盖子，D错误。5．答案：C解析：培育基灭菌一般接受湿热灭菌法，但是对于含有遇高温易分解的养分物质的培育基，不能接受湿热灭菌法进行灭菌，A错误；划线前后要将接种环放在酒精灯的火焰上灼烧灭菌，B错误；全部的划线区都有可能得到菌落，只是5区域中菌落相对较纯，易分别得到纯培育物，C正确；在平板划线时不要将最终一次的划线与第一次的划线相连，避开已分别开的菌种再次聚集，最终无法获得单菌落，D错误。6．答案：D解析：对试验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒，A错误；为防止空气中的杂菌落入培育皿中，倒平板时不能把培育皿盖完全打开，正确的操作是将培育皿打开一条稍大于锥形瓶瓶口的缝隙，B错误；配制好的培育基应放入高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌，C错误；接种前灼烧是为了保证接种时不会污染培育物，接种后再灼烧是防止菌种污染接种室或者超净台，D正确。7．答案：D解析：接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培育皿等常用干热灭菌法处理，培育基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；倒平板、接种须要在酒精灯火焰旁进行，而配制培育基不须要在酒精灯的火焰旁进行，因为培育基最终还须要灭菌，B错误；倒好的平板须要冷却后运用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，C错误；平板划线转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线，主要目的是杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，D正确。8．答案：ACD解析：为避开杂菌污染，可将接种环的环端和可能伸入试管的部分在火焰上来回灼烧多次，A正确；将灭过菌的接种环伸入菌种管，先将环部接触培育基斜面顶端或其他无菌体的培育基部位使其冷却，再轻轻挑取少许菌体，在抽出接种环时，留意其带菌部位不要触及管壁或通过火焰，B错误，C正确；接种后灼烧是为了杀死残留的菌体，接种环在斜面接种后，需多次灼烧以保证无菌，冷却后放回原处，D正确。9．答案：(1)碳源(或C源)液体培育基(2)固态中性或弱碱性(3)灭菌(4)菌落不应解析：(1)培育基的主要成分有：水、碳源、氮源、无机盐，培育基按其物理性质可分为固体培育基和液体培育基。(2)固体培育基通常加入琼脂作为凝固剂，培育霉菌时，须要将培育基调至酸性；培育细菌时，须要将培育基调至中性或弱碱性。(3)在酒精灯火焰旁边进行倒平板，这一操作属于灭菌手段。(4)菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，平板划线法接种微生物时，其次次划线后每次划线的菌种都来自于上次划线的末端，故留意不要将最终一区的划线与第一区相连。10．答案：(1)湿热灭菌(2)自养型空气(3)离子蛋白质、核酸(4)琼脂(或凝固剂)形态、大小、颜色、隆起程度(5)为微生物供应无机盐，维持培育基的pH稳定(酸碱平衡)解析：(1)对培育基进行灭菌的方法是湿热灭菌法。(2)培育基的成分都是无机物，因此培育的微生物的同化类型是自养型；微生物所需的碳源由空气中的CO2供应。(3)微生物吸取无机盐以离子的形式进行；含N无机物吸取后用于形成含N有机物，其中含N的生物大分子是蛋白质和核酸。(4)菌落须要在固体培育基的表面生长，因此培育基中须要添加琼脂，使液体培育基凝固成固体培育基。依据菌落特征鉴定，菌落特征有形态、大小、颜色、隆起程度等。(5)②④既是无机盐又是缓冲物质，作用是为微生物供应无机盐，维持培育基的pH稳定(酸碱平衡)。11．答案：(1)碳源(2)配制培育基干热灭菌湿热灭菌(3)AB(4)a培育基上长出菌落，b培育基上不长菌落(5)将琼脂换用其他凝固剂解析：(1)从三个假说所指向的微生物来看，其差别主要在于所需碳源不同。(2)制备培育基的基本步骤是配制培育基→灭菌→倒平板。培育皿等玻璃器皿一般接受干热灭菌，而培育基往往接受湿热灭菌。(3)A、B可以为绝大多数微生物供应碳源，而从试验目的分析，b培育基应当要解除依靠此类碳源生活的微生物，故选AB。(4)a培育基上长出菌落，b培育基上不长菌落说明该微生物只能利用常规碳源生活，也就说明假说①更牢靠。(5)要出现菌落，须要用固体培育基，题干提示，琼脂是配制固体培育基常用的凝固剂之一，因此将琼脂换用其它凝固剂，这样就可以通过b和c的对比来确定该微生物能否利用琼脂作为碳源。二微生物的选择培育和计数必备学问基础练1．答案：D解析：酵母菌呼吸作用的底物主要是葡萄糖，所以富含糖果、蜂蜜的土壤环境中简洁找到酵母菌，且这些酵母菌是耐渗透压的酵母菌，A正确；油田土环境中富含石油，简洁筛选出石油分解菌，B正确；纤维素分解菌可以降解纤维素，到富含纤维素的环境中可以找到纤维素分解菌，C正确；培育霉菌时需将培育基的pH调至酸性，培育细菌时需将pH调至中性或弱碱性，D错误。2．答案：D解析：依据题意可知，须要“筛选能产生阿拉伯胶(一种多糖)降解酶的菌株SM01”，须要以阿拉伯胶作为唯一碳源，甲中牛肉膏也属于碳源，因此解除甲培育基，A不符合题意；由于该菌株能够产生阿拉伯胶的降解酶，因此培育基中不能添加阿拉伯胶酶，故解除乙培育基，B不符合题意；丙培育基无阿拉伯胶做碳源，选择牛肉膏做碳源，C不符合题意；丁培育基以阿拉伯胶作为唯一碳源符合要求，即利用培育基丁培育可以筛选该菌株，D符合题意。3．答案：D解析：一般培育基可满足多数微生物的生长需求，选择培育基可允许特定种类的微生物在其上生长，A正确；制备选择培育基时，应依据所选微生物的特点确定培育基的配方，如微生物的特别养分要求或其对某化学、物理因素的抗性，B正确；分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶可分解尿素，因此筛选能分解尿素的细菌时，应以尿素作为唯一的氮源，C正确；一般培育基可满足多数微生物的生长需求，选择培育基可允许特定种类的微生物在其上生长，因此与一般培育基相比，选择培育基上生长的微生物的数量一般较少，D错误。4．答案：C解析：分解尿素的细菌是异养微生物，因此培育基中应当加入有机碳源，如⑤加葡萄糖；培育基中应当以尿素作为唯一氮源制成选择培育基，从物理性质上看分解尿素的微生物的分别用的是固体培育基，因此应加入凝固剂琼脂，且培育基中不能加入青霉素，因为青霉素能抑制分解尿素的细菌的生长，即分别分解尿素的细菌须要在培育基中加入的物质依次为①加尿素、③加琼脂、⑤加葡萄糖、⑧不加硝酸盐，⑩不加青霉素，即C正确。5．答案：D解析：①土壤是微生物的培育基，土壤取样不须要在火焰旁进行，否则会杀死目的菌株，①错误；②称取土壤，为避开杂菌的污染，须要在酒精灯火焰旁进行，②正确；③稀释土壤溶液，为避开杂菌的污染，须要在酒精灯火焰旁进行，③正确；④涂布平板，为避开杂菌的污染，须要在酒精灯火焰旁进行，④正确；⑤微生物的培育，需在确定温度的恒温箱中进行，⑤错误。6．答案：A解析：分解尿素的细菌是异养微生物，因此培育基中应当加入有机碳源，如葡萄糖；分别分解尿素的细菌的培育基从功能上分属于选择培育基，应当以尿素为唯一氮源，而B选项中无氮源，C选项中无碳源，D选项中牛肉膏、蛋白胨都可以作为氮源，故A正确；B、C、D错误。7．答案：C解析：尿素中虽然含有碳和氮，但是碳元素不能被该细菌利用，所以不能作为土壤细菌的碳源，只能作为氮源，A错误；分别纯化的土壤细菌只能利用土壤中的氮源，不能从空气中固氮，B错误；尿素为氮源，须要葡萄糖作为碳源，C正确；牛肉膏蛋白胨虽然含有碳和氮，但是不能用作筛选该种土壤细菌的培育基的碳源和氮源，D错误。8．答案：B解析：将微生物接种到固体培育基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；平板划线法常用来分别微生物，不能用来进行微生物的计数，不须要对菌液进行梯度稀释，B错误；两种接种方法均可在培育基中形成单个菌落，C正确；接种工具运用后均须要灭菌，以免菌种对环境造成污染，D正确。9．答案：B解析：尿素分解菌能合成脲酶，把尿素分解成氨，可干脆以尿素作为氮源，A正确；乙培育基中含有牛肉膏、蛋白胨等氮源，不能用于筛选尿素分解菌，B错误；稀释涂布平板法可对活菌进行计数，所以统计土壤样品中分解尿素的活菌数量可用稀释涂布平板法，C正确；平板划线法时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，D正确。10．答案：D解析：稀释涂布平板法能推想出样品中大约含有多少活菌，A正确；显微镜干脆计数法可测定样品微生物数目，缺点是不能区分死菌与活菌，B正确；滤膜法能测定样品微生物数，例如用滤膜法测定自来水中大肠杆菌的数目，C正确；平板划线法可用于分别微生物，但不能测定样品微生物数目，D错误。11．答案：C解析：依据该同学测得每克土壤样品中分解尿素菌落数是2×108个，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL，且每个平板上的菌落数分别为190、200、210个，平均菌落数为200个，则土壤样品的稀释倍数为：2×108÷(200÷0.1)＝1×105，综上所述，A、B、D错误，C正确。12．答案：D解析：用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培育基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌，D正确，A、B、C错误。13．答案：C解析：接受稀释涂布平板法计数时获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，B正确；为了保证结果精确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；设计试验时，至少要用三个平板做重复试验，才能增加试验的劝服力和精确性；分析结果时，确定要考虑所设置的重复试验的结果是否一样，差别不大时，取平均值作为统计结果，D正确。14．答案：C解析：由样品稀释示意图分析可知，5号试管的稀释倍数为106倍，则5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167)÷3×106÷0.1＝1.7×109个。15．答案：D解析：小明筛选出的菌落数明显比其他同学多，出现这种结果的缘由可能是和其他同学取样的土壤不同，也有可能是培育基混入其他氮源或培育基被污染，A正确；要证明培育基是否受到污染，可将小明配制的培育基不加土样进行培育，即进行空白比照，B正确；当稀释倍数太小时，两个或两个以上细菌连在一起时，培育基上看到的是一个菌落，可能会出现菌落重叠而导致计数结果偏小，C正确；其他同学选出约40个菌落，依据公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，取10g土壤进行稀释，所以土样的细菌悬液中分解尿素的细菌数量约为40×106＝4×107个，D错误。实力素养综合练1．答案：D解析：在找寻目的菌株时，要依据它对生存环境的要求，到相应的环境中去找寻，要得到分解尿素的细菌，可以在长期运用尿素肥料的农田土壤中采集土样，A正确；分别能分解尿素的细菌，须要加入尿素为唯一氮源，这种加入尿素的培育基在功能上属于选择培育基，B正确；菌落是由单个微生物在适宜固体培育基表面或内部生长繁殖到确定程度，形成肉眼可见的有确定形态结构的子细胞的群落，利用稀释涂布平板法纯化菌种时常用菌落数作为统计结果，C正确；本试验运用的平板和试管较多，为避开混淆，应在运用前就做好标记，标记时要注明培育基种类、培育日期以及平板上培育样品的稀释度等，D错误。2．答案：A解析：据图可知，④过程接受的是平板划线法进行接种，接种工具是接种环，A错误；为避开杂菌污染，对培育基常用湿热灭菌法进行灭菌，B正确；尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解，从而能利用尿素，而其它微生物不能，因此要分别纯化尿素分解菌，培育基都应以尿素为唯一氮源，C正确；分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培育基碱性增加，pH上升，酚红指示剂会变红，因此可用酚红染料鉴定，以菌落四周是否出现红色圈来鉴定，D正确。3．答案：C解析：根瘤菌为共生固氮菌，无氮源的培育基上可以分别出根瘤菌，A错误；筛选分解尿素的细菌时，培育基中唯一的氮源是尿素，但培育基中还含有其他养分物质，例如水和无机盐，B错误；分解尿素的细菌的鉴定原理是：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培育基的碱性增加。在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂培育细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，故加有酚红的尿素培育基，兼有选择与鉴别目标