微生物的控制

主要内容微生物控制目标基本概念物理原因杀菌化学原因杀菌1微生物的控制第1页微生物控制目标1预防疾病发生、发展和传输2预防原材料等微生物污染3预防试验室中纯培养物污染2微生物的控制第2页头发和手指上细菌3微生物的控制第3页基本概念灭菌（sterilization）—杀灭全部微生物方法，包含微生物营养体和芽胞；杀菌(bacteriocidation)—菌体虽死，形体犹存；溶菌（bacteriolysis）—菌体死后，细胞发生溶化、消失现象。4微生物的控制第4页抑制（inhibition）—抑制因子造成微生物生长停顿，移去该因子后恢复；消毒（disinfection）—杀灭病原微生物；防腐（antiseptic）—预防或抑制微生物生长繁殖；无菌（Asepsis）：即不含活菌。灭菌是一个过程，无菌是一个状态.5微生物的控制第5页抑菌溶菌杀菌6微生物的控制第6页物理原因控制微生物

杀灭或抑制微生物物理原因有：温度（热力灭菌法）、辐射作用（紫外线等）、过滤（机械除菌法）、渗透压、干燥、超声波等。7微生物的控制第7页热力灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法火焰灼烧法干烤法常压下加压下巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法高压蒸汽灭菌法连续加压灭菌法8微生物的控制第8页干热灭菌法可使细胞膜破坏、蛋白质变性、原生质干燥、各种细胞成份氧化。热空气灭菌（1）160～170℃/1～2h（oven）烤箱。（2）适合用于耐高温物品：玻璃器皿、金属制品（3）温度不宜超出180℃，同时器皿必须洗净烘干，无油脂。火焰灼烧、焚烧（1）金属制品（镊子，接种环等）。（2）动物尸体，废弃物。干热灭菌法9微生物的控制第9页10微生物的控制第10页湿热灭菌法湿热灭菌法比干热灭菌效果好（1）水蒸汽穿透力强（2）水蒸汽含热潜能高.

（100℃时，1克水分子由气态变为液态，释放2255J热量）（3）水蒸汽更易传递热量（4）蛋白质易凝固变性（含水50%，30min，凝固温度为50℃；含水0%，30min，凝固温度为160~170℃）11微生物的控制第11页

湿热对普通营养体和孢子杀灭条件（1）多数细菌和真菌营养细胞：在60℃左右处理5~10min；（2）酵母菌和真菌孢子：用80℃以上温度处理；（3）细菌芽胞：121℃处理15min以上。12微生物的控制第12页巴氏消毒法（1）适合用于牛奶、酒类、酱油等不能进行高温灭菌液体，保留了食品风味和营养价值。（2）低温维持法（LTH，lowtemperatureholdingmethod）

63℃/30min，（3）高温瞬时法（HTST，hightemperatureshorttime）

72℃/15s，135-150℃/2-6s。13微生物的控制第13页煮沸法和间歇灭菌法煮沸法（1）不能在短时间内杀死全部微生物芽胞和病毒（2）沸水中加入2%NaCO3或2％~5％石炭酸可加速细菌芽胞死亡（3）电饭煲不打开盖子可使食品保留较长时间间歇灭菌法（1）丁达尔灭菌法或分段灭菌法，适合用于不耐热培养基灭菌（2）80~100℃蒸煮15~60min（3）37℃保温过夜，诱导残留芽胞发芽（4）连续重复3天14微生物的控制第14页（常规）高压蒸汽灭菌法

是最可靠、有效消毒灭菌方法，

在高压蒸汽灭菌器内进行。（1）灭菌锅（autoclave）。（2）121℃（1Kg/cm2或15磅/英寸2）维持15~30min（3）113℃/115℃（8磅/10磅）20~30min，含糖培养基。（4）配制高糖培养基，应注意将糖和培养基其它成份分开灭菌。（5）注意事项：P22415微生物的控制第15页高压蒸汽灭菌锅结构16微生物的控制第16页17微生物的控制第17页

不一样温度对细菌杀菌作用18微生物的控制第18页连续加压灭菌法也称连消法。用于大规模工业发酵培养基灭菌。培养基在发酵罐外连续进行连续加热、维持、冷却，然后进入发酵罐。135~140℃处理5~15s。19微生物的控制第19页影响湿热灭菌原因1、微生物原因：杀菌时间与样品中微生物存在状态（芽胞或繁殖体）、微生物种类、菌龄、浓度相关。2、温度和作用时间：温度愈高，致死时间愈短。3、pH影响：pH6.0~8.0不易杀死微生物，偏酸、偏碱都有利于灭菌。4、介质性质：水分能够加速菌体死亡，有机物能够保护微生物。20微生物的控制第20页紫外线和射线1紫外线（1）原理—波长范围100~400nm，在200~300nm间有杀菌作用。核酸、嘌呤、嘧啶、蛋白质能吸收紫外线，细胞DNA最大吸收峰在265nm，形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA复制和蛋白质合成。（2）紫外灯—30~40W，20~30min照射，照射距离2m。（3）穿透力差，不能透过玻璃，适合用于物品表面和空气灭菌。对皮肤和眼结膜有损害。（4）UV照射可产生臭氧、过氧化物，影响微生物生长。（5）日光中紫外线。2X-Ray、阴极-射线、γ-射线（1）适合用于整包装灭菌，塑料制品、食品等（2）穿透力强（3）Co6021微生物的控制第21页22微生物的控制第22页光复活作用当微生物收到紫外线照射后，马上暴露在可见光下时，其中一部分微生物能够恢复正常生长，此即光复活作用。光复活作用在于可见光激活了光修复酶（PRE），PRE能够将TT二聚体切除。23微生物的控制第23页过滤除菌主要用于空气和不耐热液体物质抗生素、血清、酶、糖类溶液等除菌。细菌滤器—材料为玻璃棉，陶瓷，石棉等。取得无菌空气。24微生物的控制第24页滤膜（1）材料为醋酸纤维素，硝酸纤维素；（2）孔径为0.22μm，0.45μm；（3）应用—啤酒，饮料，药品等（对热不稳定，如蛋白质等）。（4）超滤膜可截留病毒、大分子有机物和蛋白质等；钠滤膜可截留小分子有机物、重金属离子等；反渗透（0.0001μm左右）截留无机盐。核孔滤器:由核辐射处理聚碳酸胶片（10μm）经化学腐蚀而成。辐射使胶片局部破坏，化学蚀刻使被破坏地方成孔。孔大小则由蚀刻溶液强度和蚀刻时间来控制。25微生物的控制第25页棉花、玻璃纤维滤膜核孔滤器或石棉26微生物的控制第26页过滤除菌装置27微生物的控制第27页

被阻留在滤膜上大肠杆菌和放线菌扫描电镜照片28微生物的控制第28页

过滤除菌装置29微生物的控制第29页超声波和渗透压超声波（ultrasonic）1破碎细胞（eg：E.coli），提取细胞组分或制备抗原等。2超声波清洗（细胞培养用玻璃器皿）。

渗透压（osmoticpressure）1高渗（胞外水活度低）引发细胞脱水产生质壁分离。2惯用盐腌、糖渍来保留食品。30微生物的控制第30页沉积法和干燥法沉积法用于水净化干燥可用于抑制微生物生长31微生物的控制第31页化学原因控制微生物概念1杀菌剂—杀死微生物化学药品。2抑菌剂—抑制微生物生长化学药品。3防腐剂—控制微生物生长，预防病原菌污染化学药品。4消毒剂—杀死微生物营养体化学药品。5化疗（化学治疗剂）—利用高度选择毒力化学物质杀死或抑制宿主体内病原微生物化学药品。消毒剂和防腐剂间无严格界限32微生物的控制第32页消毒剂种类共十类：重金属盐类——升汞、红汞、硫柳汞氧化剂——高锰酸钾、过氧化氢、过氧乙酸酚类——来苏儿、石炭酸醇类——乙醇（70%）醛类——甲醛、福尔马林（37-40%甲醛）、戊二醛烷化剂——环氧乙烷（气体灭菌剂，易燃、易爆、有毒）

33微生物的控制第33页

卤素类——氯气、漂白粉、碘酸碱类——乳酸、醋酸、生石灰染料——龙胆紫、结晶紫表面活性剂——阳离子型，灭菌效果强，季铵盐类（如新洁尔灭、杜灭芬）；阴离子型，灭菌效果弱，如洗衣粉、肥皂等；非离子型，不灭菌。34微生物的控制第34页

影响消毒剂作用原因1.

消毒剂性质和作用方式2.

微生物种类和数量3.

环境中有机物质4.

消毒剂浓度、作用时间酚系数：石炭酸常被用来作为比较化学消毒剂杀菌能力一个标准，将某消毒剂作不一样稀释后，在一定条件下，一定时间内致死全部供试微生物（普通用金黄色葡萄球菌）最高稀释浓度与到达一样效果石炭酸最高稀释度比值，称为这种消毒剂对该种微生物石炭酸系数（酚系数）。酚系数大，则消毒剂杀菌力强。35微生物的控制第35页

作用机制1.

蛋白质变性作用蛋白质含有立体三维结构，理化原因能破坏蛋白质空间结构或构型，使之活性降低或失去功效。比如，酸碱类（中和电荷，水解蛋白质等）2.

破坏细胞表面结构破坏细胞膜、细胞壁完整性，也可使胞浆成份外泄，造成细胞死亡。比如，表面活性剂，染料（干扰肽聚糖合成）、酚类、醇类等36微生物的控制第36页

3.

改变酶功效集团或直接干扰细胞正常代谢比如，氧化剂，可使-SH成为-S-S-；烷化剂，可使-SH成为-SR；重金属盐类，可使-SH成为-S-Hg-S-；碱性染料可与细菌蛋白质氨基结合，酸性染料可与细菌蛋白质羧基结合，影响蛋白质代谢。丫啶类染料，干扰核酸正常代谢。

*消毒剂作用机制多样性。37微生物的控制第37页化学疗剂抗代谢类药品（antimetabolite）在化学结构上和生物体所必需代谢物（生长因子）很相同，能够和特定酶结合，从而妨碍酶功效。磺胺类药品是经典抗代谢类药品。治疗溶血链球菌、肺炎链球菌、布鲁氏菌属及金黄色葡萄球菌引发各种传染病