常州市重点中学2025届高三下学期第五次调研考试生物试题含解析

常州市重点中学2025届高三下学期第五次调研考试生物试题考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．图甲表示某动物细胞中一对同源染色体，图乙表示该卵原细胞形成的卵细胞中的一条染色体，若只考虑图中字母所表示的基因，下列相关叙述中正确的是（）A．该卵原细胞形成的第一极体的基因型为aeDB．复制形成的两个A基因发生分离的时期为有丝分裂后期和减数第一次分裂后期C．形成乙的次级卵母细胞中不存在同源染色体，但可能存在等位基因D．甲形成乙的过程中发生了基因重组和染色体结构变异2．下图为甲、乙两种单基因遗传病的遗传家系图，其中I-2只携带一种致病基因。人群中甲病基因频率为1/15，乙病基因频率为1/10。下列叙述正确的是（）A．甲病为伴性遗传，乙病为常染色体遗传B．II-3体细胞内最多含有6个致病基因C．III-1与一正常女性结婚，生下患病小孩的概率为6/11D．III-7与一甲病男性结婚，生下正常小孩的概率为49/1163．下列关于蓝藻和玉米两种生物的说法，正确的是A．遗传物质都是DNAB．细胞分裂方式相同C．光合作用的场所和产物不同D．变异类型相同4．科研人员研究了温度对人工种植的蒲公英光合作用与呼吸作用的影响，其他条件相同且适宜，实验结果如下图所示：据图分析，下列说法正确的是（）A．在光照条件下，30℃环境中蒲公英的实际光合速率比25℃环境中小B．昼夜时间相同且温度不变，则适合蒲公英生长的最适温度是25℃C．P点时，叶表皮细胞产生ATP的场所为细胞溶胶和线粒体D．一直处于光照条件下，P点时蒲公英无法正常生长发育5．如图表示雄果蝇体内某细胞分裂过程中，细胞内每条染色体上DNA含量的变化（甲曲线）及与之对应的细胞中染色体数目变化（乙曲线）。下列说法错误的是（）A．CD与FG对应的时间段，细胞中均含有两个染色体组B．D点所对应时刻之后，单个细胞中可能不含Y染色体C．EF过程中，DNA含量的变化是由于同源染色体的分离D．CD段有可能发生同源染色体上非等位基因之间的重组6．下列关于细胞结构和功能的说法中，正确的是A．核糖体与新冠病毒COVID-19，一种单链RNA病毒）的化学成分相似B．核仁与核糖体的形成密切相关，没有核仁的细胞无法形成核糖体C．ATP和[H]在叶绿体中随水的分解而产生，在线粒体中随水的生成而产生D．核糖体、内质网高尔基体的膜都参与了分泌蛋白的合成与运输7．下列关于动物细胞培养及融合技术的叙述，正确的是（）A．细胞融合即细胞杂交，指由2个或多个细胞融合成1个细胞的现象B．一个脾细胞和一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞C．滋养层细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用D．“多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中核基因表达的分子开关的启动8．（10分）某高等植物细胞呼吸过程中主要物质变化如图，①~③为相关生理过程。下列叙述正确的是（）A．若该植物为玉米，则③只发生在玉米胚细胞的细胞质基质中B．该植物②过程产生ATP的场所是线粒体基质和线粒体内膜C．等量的葡萄糖在有氧呼吸和无氧呼吸过程中产生丙酮酸的量不同D．只给根部细胞提供同位素标记的H218O，在O2和CO2中能同时检测到18O二、非选择题9．（10分）番茄中的番茄红素和胡萝卜中的β-胡萝卜素都属于类胡萝卜素，两种色素都具有很强的抗氧化能力，在生活和生产中得到广泛应用，回答下列问题。（1）从番茄中提取番茄红素常用萃取法，提取的效率主要取决于______；提取过程应采用水浴加热，在加热瓶口还要加______装置，以防止加热时有机溶剂挥发。胡萝卜中的胡萝卜素也可用萃取法提取，原因是______。（2）工业生产上，常利用微生物发酵的方法提取天然β-胡萝卜素．已知红酵母细跑在合成β-胡萝卜素过程中会产生还原性较强的物质，该物质可将无色的TTC还原为红色复合物。欲从土壤中筛选出能合成β-胡萝卜素的红酵母菌株，首先将土样制成菌液，涂布到含TTC的培养基上，挑选出______菌落，然后通过______法进行分离纯化。（3）工业生产番茄汁时，常常利用果胶酶以提高出汁率，原因是果胶酶能瓦解植物细胞的______。科研人员通过酶解法和吸水胀破法将果胶酶从某种微生物中释放了出来，进一步分离纯化该酶的方法是______，鉴定该酶纯度的方法是______。10．（14分）阿尔茨海默(AD)是一种神经退行性疾病，主要病理特征为β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积导致形成细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化导致神经原纤维缠结，两种情形均可能引起神经细胞凋亡，使学习、记忆能力减退，科研人员为了进一步探究发病机理和治疗方案，进行了如下研究。（1）研究发现，患者脑部的神经元数量及神经元之间的_________（结构）明显减少。进一步研究证实这是由于神经元________（填“胞体”、“树突”或“轴突”）内的核糖体上合成的β﹣淀粉样蛋白（Aβ）异常积累而引发细胞损伤导致。科研人员推断这种异常积累可能与_______Aβ的酶C表达量下降有关。（2）科研人员提取正常人和患者的神经元DNA，对酶C基因进行测序，测序结果完全一致，说明酶C基因表达量的改变不是____________导致。（3）科研人员分别提取正常人和患者神经元的酶C基因启动子的DNA片段，再分别用具有相同识别序列（CCGG）的HpaⅡ和MspⅠ酶切（但HpaⅡ不能切割甲基化的胞嘧啶）。结果显示正常人该DNA片段用MspⅠ切割后产生的片段数目与用HpaⅡ切割后产生的片段数目的差值___________（大于/小于）患者的相应差值，说明患者细胞中酶C基因启动子甲基化程度更高。（4）依据上述结果，研究人员推测，患者神经元内的RNA聚合酶与酶C基因启动子结合受影响，进而影响了酶C基因的转录。结合上述研究提出一种治疗阿尔茨海默症的方案：_______________________。11．（14分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。12．某种多年生雌雄异株植物，其性别决定为XY型，花色有紫、白两种情况。研究人员让两株纯合的紫花个体杂交，F1全为紫花，F1雌、雄个体随机交配，F2中紫花：白花＝15：1，而开白花个体全为雄性（不考虑同源区段）。回答下列问题：（1）控制此种植株花色的等位基因有________对，控制花色的基因在常染色体或性染色体上的分布情况是______________________。（2）研究发现当控制花色的基因全部非纯合状态下，紫色雌花的药用价值很高。由于管理不当造成了亲本与F1植株全部死亡。请利用F2中的个体设计实验，选出药用价值很高的雌株。仅需写出简单的实验设计思路，预期实验结果及结论________________________________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解析】

据图甲可知，两条染色体为同源染色体，其上有三对等位基因；图乙为卵细胞中的一条染色体，图中的D基因变成了d基因，根据染色体的形态，可判断变异是由于非姐妹染色单体间发生交叉互换造成的。【详解】A、由于发生了交叉互换，所以该卵原细胞形成的第一极体的基因型（基因组成）为Ddeeaa，A错误；B、复制形成的两个A基因发生分离的时期为有丝分裂后期和减数第二次分裂后期，B错误；C、图乙中的卵细胞在形成过程中发生了交叉互换，故经减数第一次分裂后形成的乙的次级卵母细胞中不存在同源染色体，但可能存在等位基因，C正确；

D、甲形成乙的过程中只发生了基因重组（交叉互换），D错误。故选C。【点睛】本题考查了生物变异的类型和原因，解答此题需把握题干中两条染色体颜色的不同，并掌握基因的关系，进而分析作答。2、D【解析】

据图分析，图中II-4、II-5患甲病，但是生出了正常的女儿，说明甲病为常染色体显性遗传病；II-4、II-5不患乙病，但是生出了有乙病的儿子，说明乙病为隐性遗传病，又因为I-2只携带一种致病基因（甲病），但是生出了有乙病的儿子，说明乙病为伴X隐性遗传病。【详解】A、根据以上分析已知，甲病为常染色体显性遗传病，乙病为伴X隐性遗传病，A错误；B、II-3两病兼患，假设致病基因分别是A、b，则其基因型为AaXbY，因此其体细胞内最多含有4个致病基因，B错误；C、III-1基因型为AaXBY，由于人群中乙病基因频率为1/10，则正常女性是乙病致病基因携带者的概率=（2×1/10×9/10）÷（2×1/10×9/10+9/10×9/10）=2/11，因此III-1与一正常女性结婚，生下患病小孩的概率=1-正常=1-1/2×(1-2/11×1/4)=23/44，C错误；D、III-7基因型为1/2aaXBXB或1/2aaXBXb，甲病男性基因型为AAXBY或AaXBY，由于人群中甲病基因频率为1/15，则甲病患者是杂合子的概率=（2×1/15×14/15）÷（2×1/15×14/15+1/15×1/15）=28/29，因此III-7与一甲病男性结婚，后代正常的概率=（28/29×1/2）×(1-1/2×1/4)=49/116，D正确。故选D。3、A【解析】蓝藻和玉米都是细胞生物，遗传物质都是DNA，A正确；蓝藻是原核生物，通过二分裂的方式增殖，而玉米是真核生物，主要通过有丝分裂的方式增殖，B错误；蓝藻和玉米光合作用的场所不同，但是产物是相同的，C错误；蓝藻的变异类型只有基因突变，而玉米的变异类型有基因突变、基因重组和染色体变异，D错误。4、C【解析】

图中自变量为温度，本题是研究温度对光合作用与呼吸作用的影响．在读表时，要明确光照下吸收CO2的量为净吸收量，即净光合作用量；黑暗中放出CO2的量代表的是有机物的消耗量，也代表呼吸作用强度。【详解】A、实际光合速率等于净光合速率加上呼吸速率，30℃环境中蒲公英的实际光合速率为6.5mg/h，25℃环境中蒲公英的实际光合速率为5.95mg/h，A错误；B、昼夜时间相同且温度不变，则适合蒲公英生长的最适温度是20℃，B错误；C、P点时，净光合速率大于0，蒲公英既进行光合作用，又进行呼吸作用，但表皮细胞没有叶绿体，所以表皮细胞只进行呼吸作用，产生ATP的场所是细胞溶胶和线粒体，C正确；D、一直处于光照条件下，P点时蒲公英净光合速率大于0，蒲公英能正常生长发育，D错误。故选C。5、C【解析】

根据题意和图示分析可知：图中实线甲表示减数分裂过程中DNA含量变化，虚线乙表示减数分裂过程中染色体含量变化；其中CD段表示减数第一次分裂，DG表示减数第二次分裂，EF表示着丝粒分裂。【详解】A.CD段表示减数第一次分裂，FG表示减数第二次分裂后期，所以CD与FG对应的时间段，细胞中均含有2个染色体组，A正确；B.由于减数第一次分裂后期同源染色体分离，因此D点所对应时刻之后，单个细胞中可能不含Y染色体，B正确；C.DE对应的时间段为减数第二次分裂，细胞中不含同源染色体，因此EF过程中DNA含量的变化与同源染色体的分离无关，C错误；D.CD段表示减数第一次分裂，在前期有可能发生同源染色体上非姐妹染色单体之间的交叉互换，从而导致同源染色体上的非等位基因之间发生重组，D正确。故选C。6、A【解析】

1、原核细胞的核糖体形成与核仁无关；2、核糖体由rRNA和蛋白质构成；3、光合作用的光反应阶段的特征是在光驱动下水分子氧化释放的电子通过类似于线粒体呼吸电子传递链那样的电子传递系统传递给NADP+，使它还原为NADPH。电子传递的另一结果是基质中质子被泵送到类囊体腔中，形成的跨膜质子梯度驱动ADP磷酸化生成ATP。4、有氧呼吸的第三阶段：在线粒体的内膜上，前两阶段脱下的共24个[H]与从外界吸收或叶绿体光合作用产生的6个O2结合成水；在此过程中释放大量的能量，其中一部分能量用于合成ATP，产生大量的能量。【详解】A、核糖体由rRNA和蛋白质构成，新冠病毒也是由RNA和蛋白质构成，A正确；B、原核细胞没有核仁，也能形成核糖体，B错误；C、在线粒体水的生成过程中生成了ATP，但是没有[H]产生，C错误；D、核糖体、内质网高尔基体都参与了分泌蛋白的合成与运输，但核糖体无膜，D错误；故选A。【点睛】结合核糖体的结构、光合作用的光反应阶段及有氧呼吸第三阶段分析选项。7、D【解析】

细胞融合与细胞杂交细胞融合指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。细胞融合可以在基因型相同或不同的细胞间进行，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交。由于细胞杂交中染色体容易丢失,动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。提高细胞克隆形成率的措施有：选择适宜的培养基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋养细胞(如经射线照射本身失去增殖力的小鼠成纤维细胞)支持生长、激素(胰岛素等)刺激、使用CO2培养箱、调节pH等。【详解】A、动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般为两个细胞的融合，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交，A错误；B、抗体生成细胞和瘤细胞的融合叫做杂交瘤技术，据此可知，一个经过免疫的脾细胞与一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞，B错误；C、滋养细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用，不是滋养层细胞支持生长，C错误；D、多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中核基因表达的分子开关的启动，D正确。故选D。8、B【解析】

高等植物的细胞呼吸可以分为有氧呼吸和无氧呼吸两类，有氧呼吸分为三个阶段，分别为葡萄糖在细胞质基质分解为丙酮酸和[H]，丙酮酸在线粒体基质分解为二氧化碳和[H]，氧气和[H]在线粒体内膜上生成水三个过程。而无氧呼吸是在没有氧气的条件下，第一阶段产生的丙酮酸在细胞质基质被分解为酒精和二氧化碳。【详解】A、玉米的胚细胞进行无氧呼吸的产物为乳酸，不是酒精和二氧化碳，A错误；B、②过程主要是指有氧呼吸的第二阶段和第三阶段，场所分别为线粒体基质和线粒体内膜，都会产生ATP，B正确；C、有氧呼吸第一阶段和无氧呼吸第一阶段反应完全相同，会产生等量的丙酮酸，C错误；D、根部细胞没有叶绿体，不会进行光合作用，所以给根部细胞提供同位素标记的H218O，只能在CO2中先检测到18O，D错误；故选B。二、非选择题9、提取液的性质和使用量回流冷凝装置溶于有机溶剂，且不易分解呈红色平板划线法或稀释涂布平板法细胞壁和胞间层凝胶色谱法电泳法【解析】

1、果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳椭醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。2、平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散的培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这些生长在固体培养基表面的子细胞群体就是菌落。3、凝胶色谱法也称为分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动的速度较慢，而相对分子质量较大的蛋白质，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动的速度较快，相对分子质量不同的蛋白质分子得以分离。【详解】（1）番茄红素是一种类胡萝卜素，而类胡萝卜素化学性质比较稳定，不溶于水，易溶于石油醚等有机溶剂，因此常用萃取法从番茄中提取番茄红素。提取的效率主要取决于提取液的性质和使用量。因萃取剂为有机溶剂，易燃、易爆，所以萃取过程应该避免明火加热，而应采用水浴加热。在加热瓶口还要安装回流冷凝装置，防止加热时有机溶剂挥发。根据胡萝卜素溶于有机溶剂，且不易分解的特点，在提取胡萝卜中的胡萝卜素也可用萃取法提取。（2）已知红酵母细跑在合成β-胡萝卜素过程中会产生还原性较强的物质，该物质可将无色的TTC还原为红色复合物。根据这一特性，欲从土壤中筛选出能合成β-胡萝卜素的红酵母菌株，首先制备含TTC的培养基，然后将土样制成菌液，涂布到含TTC的培养基上，挑选出呈红色的菌落，然后通过稀释涂布平板法或平板划线法进行分离纯化。（3）工业生产番茄汁时，常常利用果胶酶以提高出汁率，原因是果胶酶能瓦解植物细胞的细胞壁和胞间层，使榨取果汁变得更容易，果汁更澄清。科研人员通过酶解法和吸水胀破法将果胶酶从某种微生物中释放了出来，进一步分离纯化该酶的方法是凝胶色谱法，鉴定该酶纯度的方法是电泳法。【点睛】本题最后两空是易错空，需要学生认真理解凝胶色谱法和电泳的原理，这是正确解答最后一问的关键！10、突触胞体降解基因突变小于抑制酶C基因启动子甲基化水平增高；增加酶C（或“分解Aβ的酶”）基因的表达量【解析】

1、根据题干信息分析，阿尔茨海默是由非可溶性β-淀粉样蛋白（Aβ）聚集破坏神经细胞所致，表现为记忆力下降和认知功能障碍等，而神经元细胞是神经调节的基本单位，记忆、认知都与人的大脑皮层有关。2、神经纤维未受到刺激时，细胞膜内外的电荷分布情况是外正内负，当某一部位受刺激时，其膜电位变为外负内正；兴奋的传导方向和膜内侧的电流传导方向一致，与膜外侧的电流传导方向相反。兴奋在神经元之间的传递是单向的，神经递质存在于突触前膜的突触小泡中，只能由突触前膜释放，然后作用于突触后膜，因此兴奋只能从一个神经元的轴突传递给另一个神经元的细胞体或树突。信号由电信号转变为化学信号再转变为电信号。【详解】（1）由题干信息“阿尔茨海默病理特征为β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积导致形成细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化导致神经原纤维缠结，两种情形均可能引起神经细胞凋亡”，使患者脑部的神经元数量及神经元之间的突触明显减少。这可能是由于神经元胞体内的核糖体上合成的β-淀粉样蛋白（Aβ）异常积累而引发细胞损伤导致。科研人员推断这种异常积累可能与降解Aβ的酶C表达量下降有关。（2）科研人员提取正常人和患者的神经元DNA，对酶C基因进行测序，测序结果完全一致，说明正常人和患者的酶C基因一样，故酶C基因表达量的改变不是基因突变所致。（3）科研人员分别提取正常人和患者神经元的酶C基因启动子的DNA片段，再分别用具有相同识别序列（CCGG）的HpaⅡ和MspⅠ酶切（但HpaⅡ不能切割甲基化的胞嘧啶）。正常人该DNA片段用MspⅠ切割后产生的片段数目与用HpaⅡ切割后产生的片段数目的差值应为0，若患者的相应差值大于0，说明患者细胞中酶C基因启动子较多的序列不能被HpaII识别、切割，甲基化程度更高。（4）研究人员推测，患者神经元内的RNA聚合酶与酶C基因启动子结合受影响，进而影响了酶C基因的转录。结合推测可通过抑制酶C基因启动子甲基化水平增高；增加酶C（或“分解Aβ的酶”）基因的表达量等方式治疗阿尔茨海默症。【点睛】本题考查神经调节和体液调节的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引