血液自动分析的检测原理及临床应用（临床检验技术课件）

检测原理目录CONTENTⅠ电阻抗法检测原理Ⅱ光化学检测原理联合检测原理Ⅲ血栓与止血一般检查Ⅵ血小板检验Ⅴ电阻抗法检测原理电阻抗法血细胞计数原理又名库尔特原理。概述01电阻抗法血细胞计数原理01电阻抗法血细胞计数原理01电阻抗法血细胞计数原理根据电阻抗原理，将体积分为35～450fl的白细胞，分为256个通道，淋巴细胞位于35～90fl的小细胞区，中性粒细胞位于160fl以上的大细胞区，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等，位于90～160fl的中间型细胞区。02白细胞分类计数原理白细分类计数直方图根据各亚群占总体的比例，计算出各亚群细胞的百分率，并同时计算各亚群细胞的绝对值02白细胞分类计数原理光（化）学检测原理01激光散射法用于细胞的分类计数01激光散射法用于细胞的分类计数02常用于血液分析仪检测的染料

荧光染料非荧光染料主要用于核酸染色，被激光照射后产生荧光和散射光有：亚甲基蓝、氯唑黑E和过氧化物酶等03非荧光染料亚甲基蓝用于核酸染色过氧化物酶试剂用于单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞的染色氯唑黑E用于单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞颗粒及白细胞的膜结构染色03非荧光染料经过染色的细胞，随鞘液流经激光检测区时，被染色部分可发生，光吸收现象，使光检测器接收到的散射光强度发生改变，将各种光（化）学信息，进行综合分析，可准确区分正常类型的细胞。总结血液中血红蛋白的测定，采用分光光度法，应用的是朗伯比尔定律联合检测原理01体积、电导、光散射法应用电阻抗原理可测定细胞体积采用高频电磁探针，测量细胞内部结构，细胞核浆比例及细胞内化学成分利用细胞内颗粒物对单色光的散射程度不一，获得细胞内部颗粒信息02光散射与细胞化学法用各种白细胞在染色下，着色不同，进行分类计数单个细胞通过激光束时，利用不同类型的白细胞对光的阻挡及散射特点不同，来进行分类计数03多角度偏振散射光当单个细胞通过激光束时，从0度、7度、90度及90度去偏振，4个不同位点收集光的信息，由于不同类型的白细胞体积大小，内部结构不一样，对光的阻挡及散射都有着自己的特点，以此可对白细胞进行分类计数04电阻抗、射频、流式细胞术与核酸荧光染色法04电阻抗、射频、流式细胞术与核酸荧光染色法利用流式及核酸荧光染色法，获得每个细胞的前向散射光（FSC）,侧向散射光(SSC)，和侧向荧光（SFL）三种光信号，综合这些参数可以对白细胞进行分类计数。05双鞘流技术和细胞化学染色非嗜碱性粒细胞分类计数通道嗜碱性粒细胞分类计数专用通道采用双通道对白细胞进行分类计数05双鞘流技术和细胞化学染色用氯唑黑E，将白细胞进行染色分类利用激光流式细胞技术，检测细胞信息综合这些参数可以对白细胞进行分类计数临床应用目录CONTENTⅠ血细胞分析仪的操作方法、注意事项Ⅱ血细胞分析仪检测参数及临床应用细胞分布图及临床应用Ⅲ血栓与止血一般检查Ⅵ常见报警及干扰因素Ⅳ检测结果显微镜复查规则Ⅴ血细胞分析仪的使用及注意事项血细胞分析仪的使用及注意事项

血细胞分析仪血细胞分析仪的使用及注意事项在使用血细胞分析仪前，必须先掌握分析仪的检测原理血细胞分析仪的使用及注意事项不同类型、型号的仪器操作程序并不完全相同操作前应仔细参阅仪器的说明书认真学习实验室的标准操作程序掌握正确的操作方法掌握正确的操作步骤开始使用仪器独立检测标本血细胞分析仪的使用及注意事项标本准备：使用EDTA-K2抗凝全血，采集静脉血适量，充分混匀，常温保存，立即送检仪器准备：开机前检查器配套试剂、环境温度、废物液桶，开启电源，待仪器完成自检室内质控：完善室内质控的检测，确定仪器在控开始检测：将待测血清置于检测架上，编制检测命令，启动检测程序结果审核与报告：审核检测的结果，发出检测报告操作步骤血细胞分析仪细胞分布图及临床应用01红细胞直方图的临床应用是一条近似正态分布的单峰曲线，通常位于36～360fl范围内，横坐标表示红细胞体积，纵坐标表示,不同体积红细胞,出现的频率。正常红细胞主要分布在50～200fl范围内02异常红细胞直方图分析红细胞直方图时，应注意观察直方图峰的位置、峰底开口宽度、峰顶形状及有无双峰现象03对红细胞直方图的分析一方面有助于贫血的诊断，如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血及铁粒幼细胞性贫血；另一方面，也可用于贫血的疗效观察。缺铁性贫血巨幼细胞性贫血地中海贫血缺铁性贫血治疗有效后03对红细胞直方图的分析正常红细胞直方图小红细胞且大小不均红细胞直方图03对红细胞直方图的分析正常红细胞直方图大红细胞且大小不均红细胞直方图03对红细胞直方图的分析IDA治疗有效红细胞直方图呈双峰正常红细胞直方图03对红细胞直方图的分析MA治疗有效红细胞直方图呈双峰正常红细胞直方图04白细胞直方图的临床应用04白细胞直方图的临床应用淋巴细胞增多白细胞直方图04白细胞直方图的临床应用原始幼稚白细胞增多正常红细胞直方图04白细胞直方图的临床应用中间细胞增多白细胞增多04白细胞直方图的临床应用中间细胞增多白细胞增多05血小板直方图的临床应用05血小板直方图的临床应用06散点图的临床应用平面二维（X、Y轴）图像三维（X、Y、Z轴）图像07白细胞散点图的临床应用08红细胞散点图显示光散射与细胞体积、血红蛋白浓度的关系，它提供红细胞的原始测定数据，和红细胞的计数结果。血细胞分析仪常见报警和干扰因素概述报警形式图形符号文字颜色变化当检测结果,超出实验室设定的参考区间时,仪器可出现报警。01血细胞分析仪常见报警白细胞检测常用的报警提示有原始细胞?未成熟粒细胞?异型淋巴细胞?有核红细胞?WBC散射图异常核左移01血细胞分析仪常见报警红细胞检测常用的报警提示有红细胞大小不均小红细胞增多低色素性贫血红细胞聚集？红细胞碎片？HGB

干扰？RBC溶血不良大红细胞增多乳糜血01血细胞分析仪常见报警血小板检测常用的报警提示有PLT直方图异常大血小板？血小板

聚集？02常见的干扰因素干扰RBC、Hb、MCV、MCH和MCHC等参数的常见因素冷凝集标本血液中存在冷凝集素，使红细胞在离体后发生聚集。判断方法：仪器出现“RBC聚集？”的报警，或MCV＞llOfl，标本管壁有小的RBC聚集块。纠正方法：将标本置37℃孵育30分钟，立即上机检测。脂血标本脂血是最常见的干扰因素判断方法：仪器出现“乳糜/血红蛋白干扰”的报警；或MCHC≥365g/L；离心可见血浆出现浑浊。纠正方法：可采用离心，血浆置换后，再进行检测溶血标本标本溶血时，由于红细胞破坏导致红细胞计数较真实值偏低，MCV减低，HCT也较真实值，偏低；MCH和MCHC都增高。解决方法：重新采集标本检测02常见的干扰因素干扰RBC的常见因素有核红细胞（NRBC）：在某些病理情况下外周血出现有核红细胞纠正方法：利用手工分类计数对白细胞计数进行校正。红细胞溶血不良：见于某些疾病，标本进行前处理时，不能将红细胞完全溶解破坏解决办法：采用手工方法分类计数WBC。02常见的干扰因素干扰WBC的常见因素有核红细胞（NRBC）：在某些病理情况下外周血出现有核红细胞纠正方法：利用手工分类计数对白细胞计数进行校正。红细胞溶血不良：见于某些疾病，标本进行前处理时，不能将红细胞完全溶解破坏解决办法：采用手工方法分类计数WBC。02常见的干扰因素干扰PLT的常见因素小细胞性贫血标本：某些贫血患者的小红细胞，被当成血小板进行计数，使PLT假性增高。纠正方法：用手工方法计数PLT。血小板聚集或血小板卫星现象：血小板聚集及血小板卫星现象，使PLT计数假性降低。解决方法：解决血小板聚集的问题，再上机检测。细胞碎片：仪器PLT计数异常增高；仪器出现“红细胞溶血不良”或“碎片”的报警。解决办法：采用手工方法计数PLT。02常见的干扰因素干扰网织红细胞计数的常见因素疟原虫和豪-焦（Howell-Jollys）小体使网织红细胞计数（RET）假性增高。血细胞分析仪各项检测参数及临床应用概述01红细胞体积分布宽度RDW其参考区间为11.5%～14.5%。RDW有助于贫血的诊断与鉴别诊断用红细胞体积的变异系数RDW-CV%表示RDW：红细胞不均一性的参数02RDW的临床应用包括结合RDW和MCV两个参数，作为贫血形态学分类的依据鉴别缺铁性贫血和地中海贫血缺铁性贫血患者的早期诊断和疗效观察02RDW的临床应用包括未成熟粒细胞（IG）及大型未染色细胞（LUC）的临床意义。未成熟粒细胞（IG）IG增高可见于感染、肿瘤、类白血病反应、骨髓增生性疾病和慢性粒细胞白血病等。大型未染色细胞（LUC）增多，主要见于感染、免疫性疾病、白血病等。02RDW的临床应用包括平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、大血小板比率（P-LCR）及血小板比容（PCT）的临床应用：1．平均血小板体积（MPV）MPV增高：见于血小板，在周围血液中破坏增多，骨髓代偿生成，增加时；也可见于骨髓纤维化、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢性粒细胞白血病、巨大血小板综合征等。MPV减低：骨髓造血系统衰竭时MPV下降，病情越严重，MPV越低；另外，严重感染伴败血症、脾亢、化疗后、再生障碍性贫血及巨幼细胞性贫血时MPV减低。2．血小板分布宽度，增高见于急性白血病化疗后、巨幼细胞性贫血、慢性粒细胞白血病、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。血小板分布宽度减低：见于反应性血小板增多症、再生障碍性贫血。3．大血小板比率（P-LCR）P-LCR增高见于免疫性血小板减少、慢性出血、血小板增多症、感染等。4．血小板比容（PCT）增高见于反应性及原发性血小板增多症、慢性粒细胞白血病早期。血小板比容减低，见于再生障碍性贫血、化疗后及血小板减少症时。02RDW的临床应用包括血细胞分析仪网织红细胞成熟度分类血细胞分析仪网织红细胞成熟度分类荧光(RNA)强度ReticulocytesPLTRBC高荧光强度低荧光强度中荧光强度WBC前向散射光(细胞大小)03网织红分类的临床应用血细胞分析仪网织红细胞成熟度分类未成熟网织红细胞比率（IRF）的值，可作为评价骨髓造血功能，最早、且较灵敏的指标。红细胞血型分类及命名01血型的概念血型（BG）是血液成分的一种遗传多态性，是产生抗原抗体的遗传性状。血型是由血型基因决定的，不仅红细胞表面存在抗原差异，白细胞、血小板、各种组织细胞表面亦存在抗原差异，并且血浆及体液中也存在抗原或抗体的差异。人类血型不仅与输血有密切的关系，也与器官移植、骨髓移植、溶血性疾病、法医鉴定及考古等有关。02红细胞血型分类国际输血协会（ISBT）红细胞表面抗原命名委员会根据红细胞血型抗原的生化特性、遗传学特性、血清学表现等特点将所发现的人类红细胞血型抗原分为血型系统、血型集合、高频抗原组和低频抗原组。03红细胞血型命名对红细胞血型的命名长期以来没有统一规定，习惯上有的血型抗原用大写英语字母表示，如ABO血型系统的A、B抗原；有的以大、小写字母混合组成，如Lewis系统的Lea、Leb抗原；有的则以字母加数字来表示，如Duffy系统的Fy3、Fy5。03红细胞血型命名1996年，ISBT红细胞抗原命名委员会确定了红细胞血型的命名和表述方法：6位数字和字母/数字两种表述方式，前者适用于计算机语言，后者适用于一般阅读、书写和印刷。ISBT还规定，已有的命名不改变，新发现的抗原必须按“字母＋数字”符号系统标记。04红细胞血型表述6位数字的前3位数字表示某一血型系统（001～030），后3位数字表示抗原的特异性。如001001、001002、001003、分