DB15T+3689-2024荒漠肉苁蓉愈伤组织生产技术规程

ICS65.020.01CCSICS65.020.01CCSB38内蒙古自治区地方标准DB15/T3689—2024荒漠肉苁蓉愈伤组织生产技术规程CodeofpeacticeofcallusproductionforCistanchedeserticolaMa2024-10-252024-10-252024-11-25内蒙古自治区市场监督管理局发布前 言GB/T1本文件由内蒙古自治区卫生健康委员会提出。本文件由内蒙古自治区中药材（蒙药材）种植标准化技术委员会（SAM/TC54）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古医科大学附属医院。本文件主要起草人：何江峰、王力伟、赵杰、安江红、房永雨、赵小庆、孙华、赵梦然、刘红葵。荒漠肉苁蓉愈伤组织生产技术规程范围本文件规定了荒漠肉苁蓉的外植体采集、预处理、培养基配制、愈伤组织诱导及继代培养的方法。本文件适用于荒漠肉苁蓉愈伤组织的生产。下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，（GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法DB15/T1940西部沙樱组织培养技术规程下列术语和定义适用于本文件。下列术语和定义适用于本文件。3.1荒漠肉苁蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma列当科肉苁蓉属多年生的根寄生草本。4材料准备（Haloxylonammodendron（C.A.Mey.）Bunge）春季苗刚出土时或冬季冻土之前采挖。内蒙古阿拉善盟的梭梭林。采集地下部分，外观要求表皮及鳞片状叶呈乳白色。将采集部位埋进沙土中或放入保鲜袋，在4℃条件下保存，保持表面干燥，1个月内处理。按照DB15/T1940执行。MurashigeandSkoog（MS）2,4（2,4-D）2.0mg/L（GA3）1.0mg/L（PVP）2.0g/L，6（KT）0.5mg/L30.0脂7.0g/L。试剂配制按照GB/T603规定方法配制，所用水执行GB/T6682的规定。1MKOH精确称取28.0gKOH粉末，用蒸馏水溶解，冷却至室温后，定容至500mL，现用现配。1MHCl精确量取43.86mL的市售38%盐酸，加蒸馏水，定容至500mL，现用现配。2,4-D（2.0mg/mL）的配制2,4-D粉末0.2g，加1.0mL1MKOH90100mL0.22μm100mL4GA3（1.0mg/mL）0.1gGA3300μL100mL0.22μm100mL4KT（1.0mg/mL）KT0.1g，加1.0mL1MKOH100mL0.22μm100mL41精确量取100mL次氯酸钠溶液（分析纯，有效氯10%），用蒸馏水定容至1L，现用现配。4.74gMS30g7.0g2.0gPVP800mL1MKOH或HClpH1L1.112130min。502mL2,4-D1mLGA3500μLKT150mL1/5～1/4，分装后的培养基保存于干燥、洁净的储藏室或超净工作台内，1周之内使用。30min，2015min5接种0.3cm×0.3cm×0.3cm5～6将接种好的培养瓶放置在条件适宜的培养架上，培养温度为25±1℃，暗培养。外植体培养20d左右开始膨大，35d左右形成愈伤组织。培养过程中如有污染，及时处理。接种0.3cm×0.3cm×0.3cm5～6培养温度为25±1℃，采用LED全光谱植物生长灯进行补光，光照强度