2025年粤教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.一个DNA分子中，酶a与酶b的识别序列可能有多个B.酶a与酶b切出的黏性末端不能相互连接C.酶a与酶b切断的化学键不完全相同D.用酶a切割有3个切割位点的质粒，得到4种切割产物2、质粒是基因工程最常用的载体，下列有关质粒的说法，错误的是（）A.质粒不仅存在于细菌中，某些病毒也具有B.质粒作为载体时，应具有标记基因和多个限制酶切割位点C.质粒可将目的基因整合到染色体DNA上D.质粒能够在宿主细胞中稳定保存，并在宿主细胞内复制3、葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（）A.无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖B.自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌C.葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的D.制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加4、判断下列有关基因工程和酶的相关叙述，正确的是()A.限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸B.载体的化学本质与载体蛋白相同C.同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具备专一性D.DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键5、基因工程中要使目的基因在受体细胞中稳定存在并能够表达和发挥作用，需要构建基因农达载体，构建过程如图。有关说法不正确的是（）

A.构建重组质粒a是基因工程的核心步骤B.重组质粒a形成过程中，需要BamHI酶和DNA连接酶C.用含有氨苄青霉素的培养基筛选转化成功的大肠杆菌D.图中大肠杆菌感受态细胞可通过Ca2+处理法获得6、下列关于现代生物技术应用的叙述，错误的是（）A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物组织培养技术可用于作物脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育7、T4溶菌酶来源于T4噬菌体，是重要的工业用酶。科学家通过一定技术使T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸（异亮氨酸的密码子是AUU、AUC、AUA，半胱氨酸的密码子是UGU、UGC），于是在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成一个二硫键，从而使T4溶菌酶的耐热性得到了提高。下列叙述正确的是（）A.对T4溶菌酶的改造属于发酵工程的范畴B.参与新的T4溶菌酶合成的tRNA种类一定会发生改变C.改造后的T4溶菌酶中的二硫键的作用类似于DNA中的氢键D.上述改造通过替换T4溶菌酶DNA上的1个碱基对即可实现8、在基因工程操作中常用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测不同DNA片段。科研人员利用EcoRⅠ和SamⅠ两种限制酶处理某DNA分子；得到如下电泳图谱。其中1号泳道是标准DNA样品，2号；3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SamⅠ单独处理、EcoRⅠ和SamⅠ共同处理后的电泳结果。下列说法正确的是（）

A.该DNA可能是含1000bp的环状DNA分子B.电泳图谱中DNA片段越小，距离起点越近C.EcoRⅠ和SamⅠ能够催化DNA的氢键断裂D.EcoRⅠ和SamⅠ的切点最短相距约800bp9、某科研小组把人的诱导多能干细胞注入猪的早期胚胎中，成功培育出人猪嵌合体胚胎，并在猪体内孕育了3-4周后才终止妊娠。下关说法错误的是（）A.实验过程需要利用体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术B.诱导多能干细胞可以由成体的成纤维细胞转化而来C.若成功培育出“人猪嵌合体”将面临巨大的伦理道德挑战D.该研究为在动物内培育出可供移植的人类器官提供了可能评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、营养缺陷性菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力；只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙；丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。

下列分析正确的是（）A.接种到甲培养皿采用的是稀释涂布平板法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型11、如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图；有关叙述正确的是（）

A.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌B.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力D.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落12、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究13、下列有关生物技术的安全性的叙述，正确的是（）A.病毒可感染动物细胞，因此诱导动物细胞融合一般不用病毒B.我国对农业转基因生物实行了严格的标识制度C.经过基因重组的致病菌可能成为生物武器D.转基因物种的迅速扩散有利于增加生物多样性14、筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后；得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是。

A.培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源B.两个菌落中的微生物为同一种微生物C.两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外D.透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大15、某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊；为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场通过以下流程进行了相关操作。下列有关叙述错误的是（）

A.在体外受精前对采集到的精子要进行获能处理B.用孕激素对供体母羊进行处理，可获得更多的卵母细胞C.为避免受体母羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D.为了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术16、2019年12月以来，新型冠状病毒导致的肺炎在世界范围爆发，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验新冠肺炎病原体的方法，以正确诊断。下列与新型冠状病毒研究、诊断有关的说法中正确的是（）A.镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体B.PCR技术：体外基因复制技术，可把病原体的基因逆转录后在几十分钟内扩增到数百万倍C.抗原—抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体D.DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)17、一般包括______、______等技术18、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。19、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。20、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起的丝状物的颜色是____________。获取的丝状物后加入到质量浓度为______________mol/L浓度的NaCL溶液的试管中，使丝状物重新溶解。21、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

22、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)23、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共18分)24、如图是从土壤中筛选纤维素分解菌的流程图；回答下列问题：

（1）土壤取样时，一般选择__________________丰富的环境。选择培养的目的是________________________。

（2）若测得稀释一定倍数的0.1mL稀释液中纤维素分解菌的菌落数平均值为51，通过计算得知每毫升样品中有5.1×107个纤维素分解菌，则该稀释液的稀释倍数为_________。

（3）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入CR染料，它可以与纤维素形成_________色复合物。若在鉴别培养基上得到部分有透明圈的菌落（如图），则降解纤维素能力最强的是菌落__________。

25、如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图；请分析回答有关问题：

（1）正确的操作顺序是_______________________（用字母和箭头表示）。

（2）图中C、E步骤都加入了蒸馏水，但其目的不同，分别是_______________________和_______________________。

（3）为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可将其溶解后，滴加________________试剂后沸水浴加热，如果出现___________________；则证明该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是_________________________________________。26、嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。为使其在工业生产中更好地应用；开展了以下实验。如图为质粒限制酶酶切图谱，如表为几种限制酶的识别序列及酶切位点。请回答下列问题：

(1)通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是_________技术。

(2)分析上图，可选择_______和_______两种不同的限制酶切割质粒，以防止质粒自身环化。质粒被切割后，可用_______将其与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是_______。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_______。

(4)蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→_______→_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。评卷人得分六、综合题(共2题，共6分)27、针对肿瘤细胞相关的异常分子和基因；可设计和研制特异性的靶点药物，靶向杀伤肿瘤细胞。

（1）图所示转铁蛋白受体（TfR）与转铁蛋白（Tf）结合；通过胞吞方式，将铁元素运输至胞内。肿瘤细胞由于增长快速，需要更多的铁元素，因此肿瘤细胞表面TfR表达量______（上升或下降）。利用单克隆抗体技术，可研制相应的抗TfR抗体，它们与TfR特异性结合，________________________进而影响肿瘤细胞增长。

（2）若想获得单克隆抗体；可将____________的小鼠的B细胞与____________融合，继而筛选出__________________的杂交瘤细胞，大量培养获得相应抗体，由于该抗体来源于小鼠，称为鼠源单克隆抗体。

（3）将该鼠源单克隆抗体与人癌细胞混合后培养；发现单独使用抗体对人癌细胞的增殖无显著影响，可能的原因是抗体与细胞表面TfR结合后__________________，以至于抗体无法达到抑制细胞铁摄取的目的，所以无法抑制细胞增长。为探究该假说成立与否，采用荧光标记抗体定位，结果发现抗体出现在细胞膜上和细胞内，则此实验结果支持该假说。

（4）由于在本实验中单独使用抗体效果不佳；考虑利用抗体介导杀伤细胞对靶细胞的裂解作用来抑制癌细胞，该过程如下图所示。若无论何种抗体，杀伤细胞都可与之结合，最终使靶细胞裂解死亡，则说明抗体的______段在不同种类的抗体中是相同的。

（5）人的杀伤细胞无法识别鼠源单克隆抗体的Fc段，科学家为此构建了人﹣鼠嵌合抗体。该过程基本流程设计为：____________。A．逆转录获得Fab基因编码区B．从分泌鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNAC．将其导入细胞中进行表达D．对基因的表达产物进行鉴定E．将Fab段的基因编码区与人的Fc段基因进行拼接，构建含人﹣鼠嵌合抗体基因的质粒28、利用基因工程技术培育出油脂高产的四尾栅藻；是获取生物柴油的新途径。科学家欲从紫苏中提取DGAT1基因（催化油脂合成的关键酶基因），导入到四尾栅藻细胞，获得转基因油脂高产的四尾栅藻，流程如图。质粒pCAMBIA与PCR扩增出的DGAT1的酶切位点如图所示。现有BamHI；BglⅡ、EcoRI三种限制性内切核酸酶，它们识别并切割的碱基序列如下表，请回答下列问题：

BamHⅠ5＇G↓GATCC3＇BglⅡ5＇A↓GATCT3＇EcoRⅠ5＇G↓AATTC3＇

(1)①与②过程使用的酶分别是___________。

(2)将DGAT1与pCAMBLA分别用限制酶切割后进行连接可形成重组质粒，目的基因和质粒能连接成重组质粒的原因是____________。将重组质粒导入大肠杆菌后，可向培养基中加入___________筛选出导入质粒的大肠杆菌。

(3)筛选出的重组质粒存在DGATI基因，但DGAT1在四尾栅藻细胞中表达出的肽链不正确，原因可能是____________。为进一步筛选出符合要求的重组质粒，选用___________限制酶对不同的重组质粒进行酶切处理，得到的电泳结果如图所示，其中___________组重组质粒为所需质粒。

参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、A【分析】【分析】

DNA重组技术需要三种基本工具：限制性核酸内切酶；DNA连接酶和运载体。

【详解】

A、一个DNA分子中，可能存在一个至多个酶a与酶b的识别序列；A正确；

B、由题图可知，酶a与酶b的识别序列虽然不同；但切出的黏性末端相同，相同的黏性末端能相互连接，B错误；

C、酶a与酶b切断的化学键均为相邻脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键；C错误；

D；质粒为小型环状DNA分子；用酶a切割有3个切割位点的质粒，最多有3种切割产物，无法得到4种切割产物，D错误。

故选A。2、A【分析】【分析】

质粒是一种裸露的；结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）；以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。

【详解】

A；质粒为小型环状DNA分子；不仅存在于细菌中，也存在于某些真核生物中，但病毒中没有质粒，A错误；

B；质粒作为载体时；应具有标记基因和多个限制酶切割位点，B正确；

C；质粒携带目的基因进入细胞后；进行自主复制，或将目的基因整合到受体细胞染色体DNA上，C正确；

D；质粒能够在宿主细胞中稳定保存；并在宿主细胞内复制，D正确。

故选A。

【点睛】3、D【分析】【分析】

果酒制备的菌种是酵母菌；条件：温度18-25℃，先通气后密闭。通气阶段，酵母菌有氧呼吸获得能量大量繁殖，密闭阶段发酵产生酒精。pH最好是弱酸性。

【详解】

A；酵母菌进行有氧呼吸获得能量大量繁殖；无氧条件下，发酵产生酒精，故无氧条件下酵母菌能进行无氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正确；

B；自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌；B正确；

C；葡萄皮中的色素进入发酵液使葡萄酒呈现颜色；C正确；

D；制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量减少；D错误。

故选D。4、A【分析】【分析】

本题考查基因工程的工具的知识；意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力.

【详解】

限制酶是DNA内切酶；烟草花叶病毒是RNA病毒，酶有专一性，因此不能切割，A正确.

基因工程的载体有质粒；噬菌体和动植物病毒；细胞膜运输载体是蛋白，不相同，B错误.

同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒；但识别的都是相同的核苷酸序列并且在相同的切点作用，仍然体现了酶的专一性，C错误.

DNA连接酶可催化DNA片段间形成磷酸二酯键；D错误.

【点睛】

基因工程需要的工具有：限制酶、DNA连接酶和运载体．限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．DNA连接酶能将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒．5、C【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞。(4)目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；构建重组质粒a——目的基因与运载体的结合是基因工程的核心步骤；A正确；

B；重组质粒a形成过程中；需要BamHI酶切割质粒获得黏性末端，需要DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，B正确；

C；质粒中有抗氨苄青霉素基因；用含有氨苄青霉素的培养基能筛选导入了质粒的大肠杆菌，但该大肠杆菌有可能导入的是空质粒，C错误；

D、图中大肠杆菌感受态细胞可通过Ca2+处理法获得；D正确。

故选C。6、B【分析】蛋白质工程与基因工程不同；基因工程产生的是自然界中原有的蛋白质，而蛋白质工程能创造出自然界没有的蛋白质。体细胞杂交技术目前主要用于制备单克隆抗体，克隆动物涉及了细胞核移植；早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

【详解】

A；蛋白质工程可通过对现有基因进行改造后而合成自然界中不存在的蛋白质；A正确；

B；克隆动物利用了细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术；体细胞杂交技术目前主要用于制备单克隆抗体，B错误；

C；茎尖和根尖等分生区几乎不含病毒；所以将植物分生区（茎尖、根尖等）进行组织培养可以获得脱毒苗，C正确；

D；动物细胞培养技术是细胞工程中基本的技术手段；可为动物的转基因技术提供受体细胞等，并且基因工程中的受精卵同样需要用动物细胞培养技术培养成早期胚胎进行移植，D正确。

故选B。7、C【分析】【分析】

蛋白质工程是以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。

【详解】

A、对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的，故对T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程的范畴；A错误；

B、改造前组成T4溶菌酶的氨基酸中就含有异亮氨酸和半胱氨酸，改造后组成T4溶菌酶的氨基酸中仍含有异亮氨酸和半胱氨酸；因此参与其合成的tRNA种类可能不变，B错误；

C、改造后的T4溶菌酶多了一个二硫键，二硫键使T4溶菌酶的耐热性提高；DNA分子中氢键越多；热稳定性越强，二者作用类似，C正确；

D、要将T4溶菌酶的异亮氨酸变为半胱氨酸；只改变一个氨基酸，发生的是碱基的替换；两种氨基酸最接近的密码子是AUU和UGU，或AUC和UGC，仍然相差两个碱基，由于DNA是双链结构，故对应的DNA上的碱基至少要替换2个碱基对，D错误。

故选C。8、A【分析】【分析】

分析题图：用EcoRⅠ单独处理或用SamⅠ单独处理都只得到一种大小为1000bp的DNA片段，而用EcoRⅠ和SamⅠ共同处理甲后得到长度为200bp和800bp的两种DNA片段，说明甲最可能是含1000bp的环状DNA分子。

【详解】

A、据图可知，用EcoRⅠ单独处理（2号）或用SamⅠ单独处理（3号）都只得到一种大小为1000bp的DNA片段，说明该DNA最可能是含1000bp的环状DNA分子；A正确；

B；由题意可知；电泳图谱中DNA片段越小，距离起点越远，说明图上侧端为起始端，B错误；

C；EcoRⅠ和SamⅠ都是限制酶；限制酶切割DNA分子，破坏的是作用位点上两脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误；

D、由题知，两种限制酶同时切割时则产生800bp和200bp两种长度的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位点至少相距200bp；D错误。

故选A。9、A【分析】【分析】

胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸；丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；本研究主要涉及早期胚胎培养、胚胎移植等现代生物技术；没有体外受精技术，A错误；

B；诱导多能干细胞原理是细胞的增殖；所以可以利用成体的成纤维细胞、B细胞诱导多能干细胞，B正确；

C；在伦理层面；人猪嵌合体会面临巨大的挑战，C正确；

D；人猪嵌合胚胎研究为解决移植器官来源不足和免疫排斥问题带来光明前景；D正确。

故选A。二、多选题(共7题，共14分)10、A:C【分析】【分析】

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

【详解】

A；甲培养皿的菌落均匀分布；接种方法应为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲、丙培养基菌落数目多；包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了同种营养成分的培养基，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性；接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；

D；乙培养皿的培养基是基本培养基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D错误。

故选AC。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；在配制步骤②、③的培养基时；为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，A正确；

B；要筛选出能高效分解尿素细菌；所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B错误；

C；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种；形成相互对照试验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；

D；步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散；可以获得单细胞菌落，D正确。

故选ACD。12、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】13、B:C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．生物安全：①转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”，③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体，④可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”。

【详解】

A；诱导动物细胞可用灭活的病毒；A错误；

B；我国对农业转基因生物实施标识制度；比如由转基因大豆加工制成的大豆油，标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质，B正确；

C；生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等；C正确；

D；转基因物种的无序迅速扩散可能变成野生种类或变成入侵的外来物种；威胁生态系统中其他生物的生存，甚至会破坏生物的多样性，D错误。

故选BC。14、C:D【分析】【分析】

该选择培养基中的唯一碳源是淀粉；只有能利用淀粉的微生物才能存活。利用淀粉的微生物分解淀粉后，会产生以菌落为中心的透明圈。

【详解】

A.淀粉只含有C；H、O三种元素；因此培养基中的淀粉不能为微生物提供氮源，A错误；

B.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物都能分解淀粉，但不一定为同一种微生物，B错误；

C.两个菌落的周围均有透明圈；说明两个菌落中的微生物均能产生淀粉酶并将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；

D.透明圈是由于培养基中的淀粉被微生物产生的淀粉酶分解后而产生的；因此透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大，D正确。

故选CD。15、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体）。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。

②配种或人工授精。

③对胚胎的收集；检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查；此时的胚胎应发育到桑甚胚或胚囊胚阶段。④对胚胎进行移植。

⑤移植后的检查。

【详解】

A；采集到的良种公羊的精子；在体外受精前要进行获能处理，A正确；

B；对本地母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵；进而获得更多卵母细胞，B错误；

C；受体母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；不需要注射免疫抑制剂，C错误；

D；采用胚胎分割技术可提高已有胚胎的利用率；D正确。

故选BC。16、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理：DNA复制。前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链；

2；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；镜检法：在电子显微镜下直接观察病人的痰液或血液；以发现病原体，但光学显微镜不能观察到新冠病毒，A错误；

B；PCR技术：体外基因复制技术；可在几十分钟内把病原体的基因扩增到数百万倍，再经过电泳与病毒样本进行对比，便能知道是否感染病毒，B正确；

C；病毒进入人体后会刺激机体产生特异性免疫反应；产生相应抗体，由于抗体与抗原结合具有特异性，因此抗原通过用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合以发现病原体，C正确；

D；DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针；利用核酸分子杂交原理来检测病原体，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测是否感染病毒的目的，D正确。

故选BCD。三、填空题(共6题，共12分)17、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】冷酒精白色221、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在22、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共1题，共8分)23、A【分析】【详解】

治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。本说法正确。五、实验题(共3题，共18分)24、略

【分析】【分析】

1；选择培养基是指通过培养混合的微生物；仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

2；分解纤维素的微生物的分离的实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖能被微生物利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

3；统计菌落数目的方法：

（1）显微镜直接计数法：

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；

②方法：用计数板计数；

③缺点：不能区分死菌与活菌。

（2）间接计数法（活菌计数法）：

①原理：当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：

a；设置重复组；增强实验的说服力与准确性。

b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M；其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

（1）土壤取样时；一般选择纤维素丰富的环境。选择培养的目的是增加纤维素分解菌的数量。

（2）若测得稀释一定倍数的0.1mL稀释液中纤维素分解菌的菌落数平均值为51，通过计算得知每毫升样品中有5.1×107个纤维素分解菌，则由每mL样品中的菌株数=（c÷V）×M可得，该稀释液的稀释倍数＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入CR染料；它可以与纤维素形成红色复合物。若在鉴别培养基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大说明降解纤维素能力越强，所以图中降解纤维素能力最强的是菌落1。

【点睛】

本题结合流程图，考查微生物的分离和培养，解题关键是识记土壤微生物分离的原理及方法；识记培养基的种类及作用，能结合图中信息准确答题。【解析】纤维素增加纤维素分解菌的数量105红①25、略

【分析】【分析】

1；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度；是随着氯化钠的浓度变化而改变的．当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

2；利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验步骤是：①制备鸡血细胞液；②提取鸡血细胞和物质，③细胞核物质中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤过滤获取纱布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷却酒精使DNA析出，⑧二苯胺鉴定DNA分子。

【详解】

（1）DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水；破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定．所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破；释放细胞核物质；E步骤甲蒸馏水是降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出。

（3）鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA；可滴加二苯胺试剂，在沸水浴加热的条件下如果出现蓝色则该丝状物的主要成分为DNA。

（4）图中A步骤的目的是获取含杂质较少（或较纯净）的DNA。

【点睛】

本题结合图解，考查DNA的粗提取和鉴定，要求考生识记DNA粗提取和鉴定的原理、操作步骤、实验中采用的试剂及试剂的作用等，再结合所学的知识准确答题，难度适中。【解析】C→B→E→D→A使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出二苯胺蓝色提取含杂质较少（或较纯净）的DNA26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作过程主要包括四个步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导人受体细胞；目的基因的检测与鉴定。（1）目的基因的获取方法目的基因的获取方法主要有从自然界已有的物种中分离出来（如鸟枪法从基因文库或cDNA文库中获取）、人工合成（常用的方法有化学合成法和反转录法）、PCR技术扩增目的基因。（2）构建基因表达载体；需分别用限制酶切割目的基因和质粒，用限制酶切割质粒时，选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点、启动子、终止子等必须的结构。用DNA连接酶连接，构成重组质粒。（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法：将含有目的基因的表达载体提纯→从雌性动物体内取出卵（可在体外受精，也可在体内受精）→采用显微注射仪进行显微注射→将注射了目的基因的受精卵经胚胎早期培养一段时间后，移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。

2；蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

【详解】

（1）获取目的基因的方法主要有三种；最简便的是PCR技术。

（2）用限制酶切割质粒时；选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点；启动子、终止子等必须的结构，由图可知可选用NdeⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割质粒。用DNA连接酶将切割后的质粒与