2025年生物技术制药试题库完整

名詞解释1、生物技术制药：即采用現代生物技术,借助某些微生物、植物、動物生产醫药物。2、基因工程制药：指运用重组DNA技术生产蛋白质或多肽类药物。3、细胞工程制药：是运用動、植物细胞培养生产药物的技术。4、酶工程制药：是将酶或活细胞固定化後用于药物生产的技术。5、发酵工程制药：指运用微生物代謝過程生产药物的技术。6、抗体工程制药：运用抗原和抗体的特异性結合性质生产药物的技术。7、先导化合物：通過优化药用、減少毒性和副作用可以使其转变為一种新药的化合物。8、生物药物的定义：是指运用微生物學、生物學、醫學、生物化學等的研究成果.從生物体、生物组织、细胞、体液等.综合运用微生物學、化學、生物化學、生物技术、药學等學科的原理和措施制造的一类用于防止、治疗和诊断的制品。9贴壁细胞：生長须有贴附的支持物表面.依托贴附因子生長。10、悬浮细胞：生長不依赖支持物表面.在培养液中呈悬浮状态生長。如血液淋巴细胞、生产干扰素的Namalwa(那馬瓦)细胞。11、兼性贴壁细胞：生長不严格依赖支持物。如中国地仓鼠卵巢细胞.小鼠L929细胞。12牛痘病毒：构建多价疫苗腺病毒、逆转录病毒：用于基因治疗杆状病毒：用于外源基因体現13、生物碱：含氮有机化合物14、生理活性物质：對细胞内生化代謝和生理活動起著调整作用。15、植物抗毒素（phytoalexins）是指在植物防御系统内能對抗微生物攻打的某些次级代謝产物.有些時候持续合成.有些時候在被刺激下才會产生抗毒素.或仅在被诱导下其产量才能增長。16、生物转化定义（biotransformation,bioconversion）：也称生物催化（biocatalysis）,是指运用生物离体培养细胞.固定化的植物（或微生物）细胞或從這些有机体中分离得到的酶等.對外源底物進行构造修饰而获得更有价值产物的一种技术。17、抗体（antibody.Ab）：是B细胞在抗原的刺激下分化為浆细胞.产生具有与對应抗原发生特异性結合反应的免疫球蛋白。18、免疫球蛋白（immunoglobulin.Ig）：具有抗体活性或化學构造与抗体相似的球蛋白统称為免疫球蛋白。19、多克隆抗体：由多种克隆细胞产生的针對多种抗原决定簇的混合抗体制剂。也称第一代人工抗体20、基因工程抗体：是运用DNA重组技术.通過對抗体分子基因构造与功能理解.有目的地在基因水平上對抗体分子進行切割、拼接或修饰.或者直接合成基因序列.再将基因导入细胞体現产生的一类抗体.也称第三代抗体21、药用酶：指可用于防止和治疗疾病的酶。22、酶法制药：指运用酶的催化作用而将前体物质转化為具有药用功能的物质的過程。23、自然选育：在生产過程中.不通過人工诱变处理.根据菌种的自发突变而進行菌种筛选的過程.叫做自然选育或自然分离。填空1、生物药物原料以天然的生物材料為主.包括人体、動物、植物、微生物和多种海洋生物等。2、注射用药规定.對药物制剂的均一性、安全性、稳定性、有效性等3、检查上的特殊性由于生物药物具有特殊的生理功能.（生物药物的活性检查）4、蛋白质类药物的分离纯化措施：（1）沉淀法蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。其原理是使蛋白质胶体颗粒破碎.從而沉淀蛋白质。常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等電點沉淀法、与靶物质結合沉淀法（如抗原—抗体）等。（2）按分子大小分离的措施有超滤法和透析法（即膜分离法）、凝胶层析法、超速离心法等。其中膜分离法可用于生物大分子的浓缩、分级和脱盐。（3）按分子所带電荷進行分离的措施氨基酸、多肽、蛋白质、酶均為两性電解质。根据它們的等電點不一样.调整pH值進行互换、電泳、等電聚焦法等。（4）亲和层析法大部分生物活性物质均有其作用的靶物质.如酶与底物（或克制剂）、抗原与抗体、激素与受体等。5、核酸类药物的分离纯化措施：提取法和发酵法6、糖类药物的分离纯化措施：非降解法、降解法。分离措施：沉淀法和离子互换层析法7、脂类药物的分离纯化措施：沉淀法和离子互换层析法8、氨基酸的生产措施：蛋白质水解法、发酵法、化學合成与酶促合成法9、氨基酸的分离措施：沉淀法、吸附法和离子互换法。10、基因工程菌的培养方式：分批培养、补料分批培养、持续培养、透析培养（运用膜的半透性）、固定化培养（對分泌型菌有利）基因工程菌培养原则11、⑴细胞搜集：离心法、膜分离法。⑵细胞破碎：机械破碎法、非机械破碎法物理、化學和生物學法12、贴壁细胞两种形态：成纤维细胞型、上皮细胞型13、真核细胞基因体現载体种类：病毒载体、质粒载体14、培养基的种类：天然培养基、合成培养基、無血清培养基15、诱导子分类：内源性诱导子、外源性诱导子16、免疫法包括：体内免疫法、体外免疫法、脾内免疫法17突变分為：點突变和染色体畸变。點突变分為：碱基對置换和编码组錯位突变（发生一种基因范围内）染色体畸变（染色体构造的变化）包括缺失、倒位、反复、易位和染色体数目变化等构造变化.通過度离筛选.可获得具有优良性状的变异菌株。嘧啶与嘌呤嘧啶与嘧啶简答1、基因工程制药研究内容：答：（1）药物品种的開发（2）基因工程疫苗（3）基因工程抗体（4）基因诊断与基因治疗（5）建立新药的筛选模型（6）改良菌种以产生新的微生物药物（7）改善药物生产工艺（8）转基因動、植物生产蛋白质类药物2、生物技术制药的特性答：1、高技术2、高投入3、長周期4、高風险5、高收益3、药理學特性（1）治疗的针對性强治疗的生理、生化机制合理.疗效可靠。如细胞色素c為呼吸链的一种重要组员.用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病.效果明显。（2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质.因此具有高效的药理活性（3）毒副作用小.营养价值高（4）生物副作用常有发生(5)用量少.价值高4、生物药物按药物的化學本质和化學特性来分；答：（1）氨基酸及其衍生物类药物（2）多肽和蛋白质类药物（3）酶和辅酶类药物（4）核酸及其降解物和衍生物类药物（5）糖类药物（6）脂类药物（7）细胞生長因子类（8）生物制品类5、生物药物按原料的来源分类答：（1）人体组织来源的生物药物：（2）動物组织来源的生物药物：（3）植物组织来源的生物药物（4）微生物来源的药物（5）海洋生物来源的药物；6、生物药物按生理功能和用途分类答：（1）治疗药物（2）防止药物（3）诊断药物（4）其他生物醫药用品7、生物药物原料选择选择原则重要為答：有效成分含量高、原料来源丰富.易得；原料中杂质含量少；原料成本低等；此外植物原料采收具有季节性、微生物原料要注意微生物生長的對数期、動物原料有的要注意動物的年龄与性别。8、原料的保留措施重要有答：（1）冷冻法（2）有机溶剂脱水法（3）防腐剂保鲜法9、生物药物的提取措施答：（1）是磨切法.（2）是压力法.（3）是反复冻融.（4）是超声波振荡破碎法.（5）是自溶法或酶解法10、人类来源的其他原料的运用答：人胎盘的应用：人胎盘丙种球蛋白、人胎盘白蛋白、人胎盘RNA酶克制剂；人尿的综合运用：11、人血浆白蛋白制备工艺要點：答：（1）络合（利凡诺（雷佛奴尔;利凡诺;乳酸依沙吖啶沉淀））：血浆在搅拌下用NaHCO3调整pH至8.6.加入等体积的2%利凡诺溶液.充足搅拌後静置2~4h.分离上清与络合物沉淀。（2）解离：在沉淀中加灭菌蒸馏水。用0.5mol/LHCl调整pH至弱酸性.加NaCl至0.15%~0.2%.搅拌下解离。加热去杂蛋白：充足解离後.65℃恒温1h.离心分离出上清液。（3）热处理（60℃.10h）：灭活病毒（4）检查措施：冻干品為白色疏松物体。白蛋白含量占95%以上.水分<1%.水溶後pH為6.6~7.2.硫酸铵残留量<0.01%.细菌學和热源质检测合格。12、動物来源药物的特點答：1、具有生物药物的共同特點.2、来源丰富3、种属间差异的考虑13、植物来源药物的特點答：1种类多2构造复杂3小分子4大分子14、生物技术在海洋药物研究与发展中的重要作用。答：1、细胞工程、基因工程、酶工程2、開发海洋生物基因工程药物3、開发海洋生物细胞工程药物4、加强海洋微生物药物的開发5、住研究内容：用基因工程技术研究抗肿瘤药物。15、基因工程药物的发展趋势答：1、研发新型生物药物的新模式2、人类基因组计划与基因工程新药的研发3、药物靶標天然配基的发現和新药的研发4、构建生物分子库以发現新药5、蛋白质工程与新药研究6、糖基化工程与新药研究7、代謝工程—组合生物學与新药研发8、新型生物药物制剂的研究16：运用基因工程技术生产药物的長处：答：1、大量生产過去难以获得的生理活性蛋白和多肽.為临床使用提供有效的保障；2、可以提供足够数量的生理活性物质.以便對其生理、生化和构造進行深入的研究.從而扩大這些物质的应用范围；3、可以发現、挖掘更多的内源性生理活性物质；4、内源生理活性物质在作為药物使用時存在的局限性之处.可通過基因工程和蛋白质工程進行改造和清除5、可获得新型化合物.扩大药物筛选来源。17：集落刺激因子临床应用答：1肿瘤化疗辅助治疗2骨髓移植3骨髓异常增生综合症及再生障碍性贫血4艾滋病18：表皮生長因子临床应用：答：1消化管溃疡和烧伤的治疗；2增長皮肤和牙齿生長3角膜移植、角膜损伤修复、白内障外科手术4伤口愈合及皮肤溃疡19：心钠素及利钠多肽家族作用；答：1使血液向血管外移動.減少心脏的负荷2增長肾血流量3协调中枢神經系统和外周的活動20：基因工程药物制药的重要程序答：⒈目的基因的克隆⒉构建DAN重组体⒊DAN重组体转入宿主菌⒋构建工程菌⒌工程菌发酵⒍体現产物的分离纯化⒎产品的检查等21、最佳的基因体現体系：答：1.目的基因的体現产量高2.体現产物稳定3.生物活性高4.体現产物轻易分离纯化22、体現特點答：1不存在信号肽.多為胞内产物.提取困难2分泌能力局限性.常形成不溶性的包括体3蛋白质不能糖基化4产物蛋白质氮端多一种甲硫氨酸残基5内毒素及蛋白酶的破壞6体現水平高7培养周期短8抗污染能力强23、影响目的基因在酵母菌中体現的原因答：（1）外源基因的拷贝数（2）外源基因的体現效率—启動子（3）外源蛋白的糖基化（4）宿主菌株的影响24、质粒不稳定产生的原因答：⑴含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率和质粒丢失率⑵這两种菌比生長速率差异的大小。25、提高质粒稳定性的措施答：1、选择合适的宿主菌2、选择合适的载体3、选择压力抗菌素克制质粒丢失菌的生長.提高质粒稳定性。4、分阶段控制培养5、控制培养条件温度、pH、培养基组分和溶解氧浓度6、固定化26、重组工程菌培养過程包括:答：⑴摇瓶操作基因工程菌生長的基础条件。⑵培养罐操作确定培养参数和控制方案以及次序。27、影响发酵的重要原因：答：⒈培养基的影响⒉接种量的影响⒊温度的影响⒋溶解氧的影响⒌诱导時机的影响⒍pH的影响28、基因工程药物的分离纯化特點：答：①体現产物在初始料中含量较低；②具有大量细胞及代謝产物；③体現产物稳定性差.易失活变性；④体現产物的种类繁多、构造不一、活性各异；⑤對其质量规定纯度高、無菌、無热原。29、建立分离纯化工艺需理解的多种原因答：1、含目的产物的起始料的特點包括：①菌种的类型及其代謝特性。②原材料培养基的来源及其质量。③生产工艺及条件。④初始物料的物理、化學和生物學特性。⒉物料中杂质的种类和性质⒊目的产物特性⒋产品质量的规定30、基因工程药物的质量控制理化性质鉴定答：（1）非特异性鉴别（2）特异性鉴别（3）相對分子质量测定（4）等電點测定（5）肽图分析（6）氨基酸构成分析（7）部分氨基酸序列分析（8）蛋白质二硫键分析31、杂质检测答：（1）蛋白质杂质（2）非蛋白类杂质32、動物细胞的生理特點答：⒈细胞的分裂周期長⒉细胞生長需贴附于基质,并有接触克制現象。⒊正常二倍体细胞的生長寿命是有限的⒋動物细胞對周围环境拾分敏感⒌動物细胞對培养基规定高⒍動物细胞蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不一样。33、病毒作為载体的長处：答：①双链DNA.易重组②插入7～8kbDNA不影响正常病毒粒子的形成。③多角体蛋白和病毒粒子的形成無直接关系④多角体蛋白基因有非常强的启動子⑤用光學显微镜可看到多角体.可以此作為標识物.选阳性克隆。⑥如用家蚕杆状病毒.還可在蚕体体現外源基因34、小牛血清的作用答：⑴提供生長因子和激素⑵提供贴附因子和伸展因子⑶提供結合蛋白⑷提供必需脂肪酸和微量元素35、無血清培养基長处答:①提高反复性②減少微生物污染③供应充足稳定④产品易纯化⑤防止血清原因對细胞的毒性⑥減少血清中蛋白對生物测定的干扰36、细胞体外培养基本条件:答：①無菌②营养充足,防止有害物质③氧气④随時清除代謝有害物质⑤良好的生存外环境pH:7.2-7.4渗透压:290-300mOsm/Kg（毫渗透摩尔）温度:37+0.5℃⑥及時分种37、植物组织培养過程再分化答：离体的植物器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽植物体38、影响植物次级代謝产物累积的原因答;1、生物条件：外植体、季节、休眠、分化等；2、物理条件：温度、光（光照時间、光强、光质）、通气（氧气）、酸度和渗透压；3、化學条件：無机盐、碳源、物质生長调整剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物质和前体等4、工业培养条件：培养罐类型、通气、搅拌和培养方式。39、诱导子的作用机制答：1、膜脂超氧化和膜构造功能的变化2、形成和积累抗微生物的低相對分子质量植保素3、蛋白酶克制物的积累保护机体4、合成和分泌降解微生物细胞壁的酶.從而克制微生物生長40、植物生物转化的意义答：（1）在植物细胞培养中.某些重要的次生代謝产物并不形成和累积。不過.這样的培养物却保留了将外源底物转化為有用产物的能力。（2）生物转化既可产生新的化合物、又可改造已經有的化合物、增長目的产物的产量以及克服化學合成的缺陷。（3）植物细胞和器官培养由于催化多步反应常常會产生中间体代謝产物.有助于我們阐明化合物的生物合成途径。（4）催化反应可以在比较温和环境下進行.副产物较少、耗能少.安全以及減少開支等。（5）植物生物转化系统可以与有机合成結合使用而相得益彰。41、抗体药物的特异性答：1、与有关抗原的特异性結合2、對肿瘤靶细胞的选择性杀伤作用3、在動物体内的靶向性分布4、對有关的肿瘤显示更强的疗效5、在临床使用获得确定的疗效42、抗体作為治疗剂的作用答：(1)直接使抗原失去活性(2)使免疫效应细胞将其吞噬并加以破壞(3)使抗原表面弱化而易于受补体破壞43、單克隆抗体特點答：高特异性:均一性:来源稳定：44、药用酶生产细胞的选择答：1、选择条件：（1）酶的产量高.可通過筛选、诱变、或采用基因工程、细胞工程等技术获得。（2）轻易培养和管理（3）产酶稳定性好（4）有助于酶的分离纯化（5）安全可靠2、生产菌的来源（1）菌种保藏机构和有关部门获得（2）自然界筛选.土壤、深海、温泉、火山、森林等菌种采集地3、产酶菌的筛选（1）菌种采集（2）菌种的分离初筛（3）纯化（4）复筛（5）生产性能鉴定等45、菌种选育目的答：1防止菌种退化2处理生产实际問題3提高生产能力4提高产品质量5開发新产品46、自然选育的目的：答：1淘汰衰弱菌；2保留优良菌；3可纯化菌种；4防止菌种衰退；5稳定生产和提高产量；47、种子扩培的目的答：1接种量的需要；2菌种的驯化；3缩短发酵時间；4保证生产水平。48、种子的选用条件答：1菌种细胞的生長活力强.移种至发酵罐後能迅速生長.缓慢期短；2生理形状稳定；3菌体總量及浓度能满足大容量发酵罐的规定；4無杂菌污染；5保持稳定的生产能力。49、工业微生物的培养类型答：①酶制剂两步：第一步：菌体培养基+葡萄糖→菌体生長↑→酶合成↓→通气↑微生物生長↑酶合成↓克制[菌体生長条件（营养期）]第二步：大量繁殖的菌种→搜集菌体浓缩物→洗涤→放入产酶培养基中（添加诱导物）→菌体产酶↑[产酶条件（自我繁殖期）]酶制剂两步法特點：将菌体生長条件（营养期）与产酶条件（自我繁殖期）辨别開来。50、菌种保藏基本原理答：根据菌种的生理、生化特性.人為地发明条件使菌种的代謝活動处在不活泼状态。51、配制工业发酵培养基的一般规定：答：1、营养物构成较丰富.浓度合适.能满足菌丝体菌种发芽和生長繁殖成大量具有生理功能的需要（产物合成潜力提高）2、在一定条件下.多种原材料彼此不产生化學反应.理化性相對稳定。3、粘度适中.渗透压合适。4、原材料品种及浓度對代謝产物生物合成過程要有助于主产物的生物合成.高产率维持時间長.副产物合成率要降至最低。5、不影响发酵過程的通气和搅拌.便于产物的分离纯化。6、原材料尽量选质优价廉、成本低。52、发酵染菌的危害答：发酵染菌能給生产带来严重危害.防止杂菌污染是任何发酵工廠的一项重要工作内容。尤其是無菌程度规定高的液体深层发酵.污染防止工作的重要性更為突出。53工业常用的灭菌措施答：1化學物质灭菌2热灭菌3辐射灭菌4過滤介质除菌54、菌种保藏所用的基质答：1）

斜面：C/N比例少些.营养成分贫乏些→防止产酸+代謝活動↑+保藏時间↓2）砂土：洗净→防止具有机物→影响菌代謝→灭菌後产毒3）冷冻干燥：保护剂不能過度加热→防止产生有毒物（变性+分解）名詞：1.基因体現：是指构造基因在生物体中的转录、翻译以及所有的加工。2．融合蛋白：原核多肽和真核蛋白結合在一起称融合蛋白3.比生長速率:菌体繁殖速率与培养基中菌体浓度之比4.對数生長期:细菌以最大比生長速率生長,是一种常数。5.“严紧反应”是當氨酰tRNA局限性時,核糖体在密码子上停留,并合成被称為魔點的ppGpp的成果。6.细胞因子：由一类重要由免疫细胞产生的、在体内含量极低的.但具有多种生物學活性的小分子蛋白多肽或糖蛋白。10.白细胞介素（IL）：是可以介导白细胞间及其他细胞间互相作用的细胞因子。13．肿瘤壞死因子：是一类能直接导致肿瘤细胞死亡的细胞因子。14.促血小板生成素：用于癌症化疗或放疗引起的血小板減少症15．集落刺激因子：选择性刺激造血干细胞分化发育成某一细胞谱系的细胞因子的统称16.激素：是由机体的特殊腺体合成和释放.通過循环系统.作用于靶细胞受体的微量信息因子。18.外植体：用于植物组织培养的器官或组织.植物的部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作為外植体進行组织培养。

19.突变体：细胞自身发生遗传变异或应用诱变处剪发生的遗传变异所得的新细胞21.诱导子：是在植物抗病生理過程中诱发植物产生植物抗毒素和引起植物過敏反应的因子22.内源性诱导子：来自植物细胞的分子.多為植物细胞壁在微生物作用下的降解产物及沉积在细胞壁上的木质素。23.外源性诱导子：又称真诱导子.指病原微生物在入侵植物時自身被降解的产物及其代謝产物27.诱变剂：可以提高生物体突变频率的物质称為诱变剂。28杂交育种：一般指两個不一样基因型的菌株通過接合或原生质体的融合使遗传物质重新组合.再從中分离和筛选出具有新性状的菌株。29.生長因子：從广义上讲.但凡微生物生長不可缺乏的微量的有机物质.如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生長因子。30.前体：在产物的生物合成過程中.被菌体直接用于产物合成而自身构造無明显变化的物质称為前体。31.产物增進剂：是指那些非细胞生長所必须的营养物.又非前体.但加入後却能提高产量的添加剂。32.灭菌：指用化學的或物理學的措施杀灭或除掉物料或设备中所有的有生命的有机体的技术或工艺過程。33.消毒：用物理或化學措施杀死物料、容器、器具内外的病原微生物。35.單克隆抗体：仅识别抗原分子上同一抗原表位区的由同一克隆细胞产生的抗体填空：1.菌种保藏措施：定期保藏法、液体石蜡法、液体石蜡法、砂土管保藏法、冷冻干燥保藏法、液氮保藏法2、链霉菌長处：不致病、使用安全、分泌能力强、体現产物可糖基化。3.酵母菌長处：其基因组小.世代時间短.有單倍体双倍体两种形式.繁殖迅速.無毒性。能外分泌.产物可糖基化。4.單克隆抗体特點：高特异性、均一性、来源稳定5.重要基因工程体現体系比较：体現体系产物产生部位培养方式提纯产物活性潜在危险大肠杆菌多肽、蛋白质、融合蛋白质菌体内轻易部分高产一般對原核好對真核差不大酵母多肽、蛋白质、糖基化蛋白菌体内外分泌轻易可高产菌体内稍复杂真核的靠近天然产物不大哺乳動物完整糖基化蛋白外分泌较难成本高、可高产简朴可达天然产物需注意致癌6.某些比较重要的生物转化类型:（1）羟基化（2）糖基化（3）醇和酮的氧化還原反应（4）、水解反应（5）环氧化反应6、羰基還原反应7、C-C双键的還原反应8.硝基還原反应简答：1、生物药物按生理功能和用途分类（1）治疗药物（2）防止药物（3）诊断药物（4）其他生物醫药用品2、生物药物原料的选择、预处理与保留措施（1）原料选择选择原则重要為：有效成分含量高、原料来源丰富.易得；原料中杂质含量少；原料成本低等；此外植物原料采收具有季节性、微生物原料要注意微生物生長的對数期、動物原料有的要注意動物的年龄与性别。（2）原料的预处理与保留：動物原料采集後要立即处理.清除結缔组织、脂肪组织等.并迅速冷冻贮存。植物原料确定後.要择時采集并就地清除不用的的部分.有用部分保鲜处理.搜集微生物時要及時将菌细胞与培养液分開.進行保鲜处理。3.生物药物原料的保留措施重要有：（1）冷冻法（2）有机溶剂脱水法（3）防腐剂保鲜生物组织和细胞的破碎常用的破碎措施一是磨切法、二是压力法；三是反复冻融法.四是超声波振荡破碎法4、蛋白质类药物的分离纯化措施（1）沉淀法常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等電點沉淀法、与靶物质結合沉淀法（2）按分子大小分离的措施有超滤法和透析法、凝胶层析法、超速离心法等。（3）按分子所带電荷進行分离的措施.根据它們的等電點不一样.调整pH值進行互换、電泳、等電聚焦法等。(4）亲和层析法5、人体来源的生物药物特點：（1）安全性好（2）效价高.疗效可靠（3）稳定性好人体来源的生物药物的研究意义（1）资源的有限性：人体来源是有限的（2）意义：從药學角度研究清晰人体来源的构造和功能.對于使用現代生物技术生产药物具有重大意义.如胰岛素的生产。6.基因工程药物制药的重要程序⒈目的基因的克隆⒉构建DAN重组体⒊DAN重组体转入宿主菌⒋构建工程菌⒌工程菌发酵⒍体現产物的分离纯化⒎产品的检查等★7.逆转录法1、mRNA的纯化2、cDNA第一链的合成3、cDNA第二链的合成4、cDNA克隆5、将重组体导入宿主细胞6、cDNA文库的鉴定7、目的cDNA克隆的分离和鉴定8、大肠杆菌体現特點：①不存在信号肽.多為胞内产物.提取困难②分泌能力局限性.常形成不溶性的包括体③蛋白质不能糖基化④产物蛋白质氮端多一种甲硫氨酸残基⑤内毒素及蛋白酶的破壞⑥体現水平高⑦培养周期短⑧抗污染能力强9、真核基因在大肠杆菌中的体現形式：①以融合蛋白的形式体現药物基因②以非融合蛋白的形式体現药物基因③分泌型体現药物基因10、枯草芽胞杆菌：①分泌能力强.蛋白质不形成包括体②产物蛋白质不能糖基化③有很强的胞外蛋白酶對产物降解。11.体現用的酵母宿主菌株应具有下列规定：①菌体生長力强；②菌体内源蛋白酶要较弱；③菌株性能稳定.常用的几乎是突变株.防止使用答复突变率高的不稳定体系；最佳使用二倍体或多倍体菌株；④分泌能力强。12、丝状真菌：分泌能力强.能對的進行翻译後加工,有成熟的发酵和後处理工艺。13、哺乳動物细胞長处：体現产物可由重组转化细胞分泌到培养液中.纯化轻易。产物是糖基化的靠近天然物。缺陷：生長慢.生产率低.培养条件苛刻.费用高.培养液浓度稀。14.菌体生長的控制:①合适提高pH②分批培养中选择不一样的碳源③补料培养中控制补料速度④持续培养中控制稀释速率等★15.质粒不稳定产生的两個原因：⑴含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率和质粒丢失率⑵這两种菌比生長速率差异的大小。16.影响发酵的重要原因：⒈培养基的影响⒉接种量的影响⒊温度的影响⒋溶解氧的影响⒌诱导時机的影响⒍pH的影响17、建立分离纯化工艺需理解的多种原因1.含目的产物的起始料的特點：（①菌种的类型及其代謝特性。②原材料培养基的来源及其质量。③生产工艺及条件。④初始物料的物理、化學和生物學特性。）⒉物料中杂质的种类和性质⒊目的产物特性⒋产品质量的规定18、细胞破碎措施：物理破碎法：高压匀浆高速珠磨法超声破碎法高压挤压法化學破碎法：渗透冲击增溶法脂溶法生物破碎法：19、基因工程药物目的产物的质量控制：1、生物學活性测定2、理化性质鉴定3、蛋白质含量测定4、蛋白质纯度分析5、杂质检测6.稳定性考察7.产品一致性的保证20.動物细胞制药特點：缺陷:培养条件高、成本贵、产量低。長处:多半分泌在胞外.搜集纯化以便；得到了较完善的翻译後修饰.尤其是糖基化.故与天然产品一致.更适于临床。21.真核细胞基因体現使用的载体有两类：毒载体㈡质粒载体22、细胞体外培养基本条件:①無菌②营养充足,防止有害物质③氧气④随時清除代謝有害物质⑤良好的生存外环境⑥及時分种★23.添加小牛血清的作用：⑴提供生長因子和激素⑵提供贴附因子和伸展因⑶提供結合蛋白⑷提供必需脂肪酸和微量元素24.無血清培养基長处：①提高反复性②減少微生物污染③供应充足稳定④产品易纯化⑤防止血清原因對细胞的毒性⑥減少血清中蛋白對生物测定的干扰25.外源性诱导子分类：多糖类、糖蛋白类、蛋白类、不饱和脂肪酸类★26.诱变剂：物理：紫外.快中子.等离子等化學：硫酸二乙酯.亚硝基胍等★27.菌种保藏目的：提高菌种存活率和減少菌种的变异.尽量使菌种保持原有的优良生产性能。随時為生产、科研提供优良菌种。28.菌种保藏基本原理：根据菌种的生理、生化特性.人為地发明条件使菌种的代謝活動处在不活泼状态。29.冷冻干燥時.冻結速度↓→细胞内形成冰晶→细胞构造机械损伤→菌种死亡率↑→导致菌种变异↑→菌种性能衰退↑30.影响培养基质量的原因：原材料质量的影响、水质的影响、灭菌的影响、其他影响原因★31.工业常用的灭菌措施：化學物质灭菌热灭菌辐射灭菌過滤介质除菌★32.发酵杂菌污染途径及防治：种子带菌的原因及防止、设备灭菌