山东省济南市师范大学附属中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题 含解析

山东师范大学附属中学2023级高二第二学期阶段性检测生物试题第Ⅰ卷选择题（共55分）一、单项选择题：本题共20小题，每小题2分，共40分。1.下列与传统发酵技术相关的描述，正确的是（）A.传统发酵技术是利用不同原核生物产生不同代谢物的原理，生产人们需要的产物B.发酵是在适宜的条件下，将原料通过微生物的无氧呼吸转化为人类所需产物的过程C.谷物、水果等原料可为微生物的生长提供各种营养物质，发酵前无需进行灭菌处理D.与传统发酵技术相比，发酵工程要接种通过基因工程育种获得的优良菌种【答案】C【解析】【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。【详解】A、传统发酵技术中用到的微生物包含酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌等。其中，酵母菌属于真菌，毛霉也属于真菌，它们都具有成形的细胞核，是真核生物，并非全是原核生物，所以不能说传统发酵技术是利用不同原核生物产生不同代谢物的原理来生产人们需要的产物，A错误；B、发酵是指人们借助微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体本身，或者直接代谢产物、次级代谢产物的过程，并非只是在无氧呼吸条件下，比如醋酸菌发酵产生醋酸是在有氧条件下，B错误；C、谷物、水果等原料本身含有多种营养成分，像糖类、蛋白质、维生素等，这些可为微生物的生长提供各种营养物质。而且在传统发酵过程中，由于原料上本身携带的微生物就可以进行发酵，所以发酵前无需进行灭菌处理，C正确；D、传统发酵技术所利用的菌株通常是原材料自带的菌株，或者是之前发酵保留下来的菌株，大多是混合菌种发酵。而发酵工程使用的菌株多是通过人工分离、选择和培育得到的，一般为纯种发酵，但不一定是通过基因工程育种获得的优良菌种，D错误。故选C。2.《齐民要术》中有关于酿酒的记载：“浸曲三日，如鱼眼汤沸，酸米。其米绝令精细”；有关“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列叙述错误的是（）A.“用水三斗”是防止酒精浓度过高抑制酵母菌的繁殖B.各地酿酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的均为酵母菌C.“动酒酢法”的原理是醋酸菌在O2充足、糖源缺乏时将酒精转化为醋酸D.传统发酵食品的制作过程中，往往不接种菌种，而是利用天然存在的菌种【答案】A【解析】【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水;在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。【详解】AC、“动酒酢法”该方法依据的原理是醋酸菌在氧气充足、糖源不足时将酒精转化为醋酸，"酒一斗，用水三斗，合瓮盛"是防止酒精浓度过高抑制醋酸菌生长繁殖，A错误；C正确；B、各地酿酒的原材料不同，但发酵过程中都是利用酵母菌的无氧呼吸，B正确；D、传统发酵食品的制作过程中，往往不接种菌种，而是利用天然存在的菌种，D正确。故选A。3.研究人员探究了不同盐浓度对泡菜发酵过程中乳酸菌含量的影响。表格为两种盐浓度下泡菜的配方，图像为乳酸菌相对浓度随发酵时间变化曲线。下列说法错误的是（）

配方1盐浓度6%配方2盐浓度8%水（mL）25002500食盐（g）150200白菜（g）812812A.需将食盐溶于清水，盐水煮沸冷却后使用B.为保证发酵顺利进行，两组需定期进行通气、排气且时长相等C.与6%的盐浓度相比，8%的盐浓度不利于乳酸菌数目的增多D.还可跟踪检测两个配方发酵过程中亚硝酸盐含量对两种配方进行比较【答案】B【解析】【分析】由于在泡菜制作过程中，微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐含量会逐渐升高，发酵后期亚硝酸盐又会被某些微生物氧化成硝酸盐，亚硝酸盐含量又会逐渐下降，因此在泡菜制作过程中要检测亚硝酸盐的含量，确定合适的取食时间．【详解】A、将盐水煮沸冷却后再使用，这是为了避免高温杀死乳酸菌，A正确；B、乳酸菌是厌氧菌，发酵过程需要在无氧环境中进行。定期通气会引入氧气，破坏厌氧环境，抑制乳酸菌的生长，B错误；C、据曲线图可知，与6%的盐浓度相比，8%的盐浓度整体菌种数量更少，不利于乳酸菌数目的增多，C正确；D、亚硝酸盐含量是评价泡菜安全性的重要指标，其浓度在发酵过程中会呈现先升后降的趋势。跟踪亚硝酸盐含量可以进一步比较两种配方的优劣，D正确。故选B。4.蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述正确的是（）A.去除蓝莓枝梗后及时冲洗干净，目的是防止杂菌污染B.过程③在氧气不足但糖源充足的条件下可直接发酵为蓝莓醋C.在过程④时，榨出的蓝莓汁需经过湿热灭菌后才能密闭发酵D.过程⑤中发挥作用的微生物的最适生长温度为30~35℃【答案】D【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详解】A、榨汁前需将新鲜的蓝莓进行冲洗，然后除去枝梗，以避免除去枝梗时引起蓝莓破损，防止增加被杂菌污染的机会，A错误；B、过程③是果醋发酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋，B错误；C、过程④果酒制作的菌种的来源于蓝莓皮上野生的酵母菌，所以蓝莓汁不需经过湿热灭菌，C错误；D、过程⑤中发挥作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌，好氧细菌，发酵温度30-35℃，D正确。故选D。5.发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（）A.在发酵之前需要利用固体培养基对菌种进行扩大培养B.在酸性条件下可以利用谷氨酸棒状杆菌发酵得到谷氨酸C.发酵结束后，可通过过滤、沉淀等方法分离出微生物细胞本身D.通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白，用来生产微生物饲料【答案】C【解析】【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详解】A、在发酵之前需要利用液体培养基对菌种进行扩大培养，A错误；B、谷氨酸棒状杆菌发酵得到谷氨酸需要在中性或弱碱性条件下，而不是酸性条件下，B错误；C、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥得到产品，C正确；D、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，而不是从微生物细胞中提取的，可直接作为微生物饲料，D错误。故选C。6.某生物实验室为培养大肠杆菌制备了LB培养基，其营养构成如表。下列叙述错误的是（）组分胰化蛋白胨酵母提取物NaClH2O含量（g）10510定容至1000mLA.该培养基采用高压蒸汽灭菌效果最好B.NaCl既可以提供无机盐，又可以调节渗透压C.酵母提取物可提供碳源、磷酸盐和维生素等营养D.灭菌前需用稀盐酸将培养基的pH调至3.6~4.6【答案】D【解析】【分析】培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。【详解】A、高压蒸汽灭菌可以对培养基进行灭菌，且较彻底，该培养基中没有不耐高温的物质，可以用高压蒸汽灭菌，A正确；B、NaCl可以提供无机盐（Na+、Cl-），也可以调节细胞的渗透压，B正确；C、酵母提取物是将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品，可提供碳源、磷酸盐和维生素等营养，C正确；D、细菌适宜的培养基为中性偏碱，灭菌前需用氢氧化钠将培养基的pH调至中性偏碱，D错误。故选D。7.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，如图为实验室的部分操作步骤，相关说法错误的是（）A.本实验的培养基中应加入苯酚作为唯一碳源B.步骤④中接种环需在每次划线前灼烧处理，接种后的平板需倒置培养C.灭菌处理后的土壤样品经②③④步骤操作后可获得纯化的苯酚降解菌菌落D.可以通过逐步提高培养基中苯酚的浓度，获得高效苯酚降解菌【答案】C【解析】【分析】1、培养基配制时的注意事项：

（1）全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染。

（2）培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基。

（3）平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

（4）在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。

2、实验室常用的灭菌方法：

（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。

（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。

（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

3、微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、本实验是研究降解苯酚的微生物，为排除其它物质对实验结果的影响，故培养基中只能以苯酚为唯一碳源，A正确；

B、每次划线接种结束后必须灼烧接种环，这样能及时杀死接种环上残留的菌种，能够避免细菌污染环境和感染操作者。培养基倒置能够防止培养基的水分蒸发、形成的冷凝水滴落在培养基上造成污染，倒放还可以在某种程度上防止菌落蔓延，以利于形成单个菌落，利于计数，故步骤④中接种环需在每一次划线前灼烧处理，接种后的平板需倒置培养，B正确；

C、菌种的纯化必须保证菌株具有活性，经过灭菌的土样中，菌株已经失去活性，不能再进行纯化操作，故灭菌处理后的土壤样品经②③④步骤操作后不会获得纯化的苯酚降解菌菌落，C错误；

D、可以通过逐步提高培养基中苯酚的浓度，这样降解苯酚能力强的菌株能够存活下来，经过重复培养，便能获得高效苯酚降解菌，D正确。

故选C。8.研究人员拟从新鲜蚯蚓粪中分离筛选出对番茄枯萎病有良好抑制效果的拮抗细菌。将蚯蚓粪加入无菌水中制成悬浮液，利用甲培养基进行筛选纯化后，将获得的不同菌株分别接种至乙培养基扩大培养，48h后进行“平板对峙实验”：在丙培养基的空白平板一侧放置一直径为5mm的番茄枯萎病菌的菌块，在平行另一侧放置相同大小的滤纸片，实验流程如下图。下列说法错误的是（）A.Ⅰ过程使用的接种方法是平板划线法，I~Ⅲ过程均需要无菌操作B.对照组滤纸片用无菌水处理，实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理C.应培养至对照组病菌菌落长满丙培养基时开始测量并计算抑制率D.选择丙培养基上直径大的病菌菌落对应的拮抗菌作为目的菌【答案】D【解析】【分析】分析图形：Ⅰ为接种，根据甲培养基是菌落的形态可知，接种的方法为平板划线法；Ⅱ为将甲培养基中获取的不同菌株分别接种至乙培养基；Ⅲ为接种后进行平板对峙实验。【详解】A、据图可知，甲培养基中是各种线的分布，故步骤Ⅰ使用的接种方法是平板划线法；微生物分离和培养的关键就是防止杂菌污染，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都需要进行无菌操作，A正确；B、本实验的目的是探究拮抗细菌是否对番茄枯萎病有良好抑制，故实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理，对照组滤纸片用无菌水处理，B正确；C、由于对照组没有用拮抗菌菌液处理，故培养至对照组枯萎病菌菌落长满时，通过对滴加拮抗菌液处理组的统计后，开始测量并计算抑制率，C正确；D、为达到阶段一的目的，应选择“平板对峙实验”培养后番茄枯萎病菌菌落直径小的细菌，因为番茄枯萎病菌菌落直径越小，说明抑制效果越好，D错误。故选D。9.天冬氨酸缺陷型菌株不能合成天冬氨酸，必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。影印法（部分过程如图所示）可用于天冬氨酸缺陷型菌株的筛选，其中基本培养基中不含氨基酸，完全培养基中含所有种类的氨基酸；转印是将揭起的丝绒布平移到培养基上，使吸附的菌体“印”在培养基平板上。下列叙述正确的是（）A.培养皿1中的培养基是基本培养基B.过程①和过程②应使用相同的接种工具C.过程②中，应将揭起的丝绒布先转印至培养皿2再转印至培养皿3中D.菌落A可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落【答案】D【解析】【分析】分析题图，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。【详解】A、两种培养基分别培养是为了筛选出氨基酸缺陷型菌株，因此与基本培养基相比，培养皿1中特有的成分有氨基酸，类似于完全培养基，A错误；B、过程①导致菌落均匀分布，因此该方法为稀释涂布平板法，所用工具是涂布器，而过程②所用的工具通常是丝绒布，B错误；C、过程②应将印在丝绒布上的菌落先转印至培养皿3基本培养基上，原因是防止基本培养基中混入氨基酸，C错误；D、比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知，菌落A能在完全培养基上生长，但不能在基本培养基生长，说明菌落A可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落，D正确。故选D。10.黄曲霉毒素是由黄曲霉产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉毒素B（AFB1）的结构类似物——豆香素（C9H6O2）筛选出能高效降解AFB1的菌株，实验过程如下图中的①—④。已知菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的培养液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液中的残留率。检测发现上清液中含有蛋白质K，为验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，进行了实验⑤：在A中加入水解蛋白质K的酶、B中加等量的蒸馏水，充分反应后在两试管中均加入等量的豆香素（C9H6O2）。下列说法错误的是（）A.1号培养基属于选择性培养基，通常需要提前在121℃下进行湿热灭菌B.步骤③使用稀释涂布平板法，目的是筛选出能降解黄曲霉毒素的单菌落C.实验⑤的结果是A试管中豆香素含量基本不变，B试管中豆香素含量减少D.蛋白质K属于降解菌产生的胞外分泌物，可以分解培养液中的蛋白质【答案】D【解析】【分析】1、实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、1号培养基属于选择性培养基，培养基需要提前在121℃下进行湿热灭菌，A正确；B、结合题图信息分析可知，步骤③接种的培养基中菌落均匀分布，使用的接种方法是稀释涂布平板法，目的是筛选出能降解豆香素的单菌落，B正确；C、由题干信息可知，A中加入水解蛋白质K的酶、B中加等量的蒸馏水，故实验⑤的结果是A试管中豆香素含量基本不变，B试管中豆香素含量减少，C正确；D、由题干信息可知，上清液中含有蛋白质K，且上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液中的残留率，据此推测蛋白质K属于降解菌产生的胞外分泌物，可以分解培养液中的豆香素，D错误。故选D。11.通过植物细胞工程对光果甘草进行培养以获得药物甘草西定，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）A.过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养B.过程④常用射线或化学物质处理后即可获得大量目的植株C.过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，应将愈伤组织细胞在液体培养基培养D.所得三种植株中乙和丙的遗传信息与甲相同，植株丁和甲是同一物种【答案】C【解析】【分析】根据图分析，过程①为接种外植体，②为诱导脱分化形成愈伤组织，③为诱导再分化，④为诱变育种，⑤为植物体细胞杂交。【详解】A、生长素/细胞分裂素的值高时，利于生根，该值低时利于生芽，过程③是再分化，需先生芽，再生根，所以需要先在生长素与细胞分裂素比例低的培养基中培养，A错误；B、过程④为诱变育种，常用射线或化学物质处理的是愈伤组织，经筛选，并进一步培养才能获得大量所需的突变体植株丙，B错误；C、过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得，应将愈伤组织细胞悬浮培养，即植物组织培养，C正确；D、所得三种植株中乙和丙的遗传信息不一定与甲相同，因为植株丙是诱变育种得到的，遗传信息可能会发生改变；植株丁经过了植物体细胞杂交，染色体数目发生了改变，和甲不一致，所以不是同一物种，D错误。故选C。12.下图是利用甲（高产）、乙（耐盐）两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的流程图。下列相关叙述正确的是（）A.进行a处理时，需要用到纤维素酶和果胶酶B.b之前的诱导过程除PEG之外还可以使用灭活的病毒C.b之后得到的愈伤组织细胞与正常细胞相比没有细胞壁D.c是具有耐盐性状的幼芽，c即可直接发育为耐盐植株【答案】A【解析】【分析】分析题图：图示为培育高产耐盐的杂种植株的培育过程，其中a表示酶解法去除细胞壁，b表示诱导原生质体融合，c为胚状体。【详解】A、图中a处理是去除植物细胞的细胞壁获得原生质体。植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，使用纤维素酶和果胶酶可以去除细胞壁，所以进行a处理时，需要用到纤维素酶和果胶酶，A正确；B、灭活的病毒常用于诱导动物细胞融合，而植物原生质体融合可以用PEG（聚乙二醇）等方法诱导，一般不使用灭活的病毒，B错误；C、b过程是原生质体融合，之后得到的愈伤组织细胞是具有细胞壁的。植物组织培养过程中，愈伤组织是具有细胞壁的薄壁细胞，C错误；D、是经过在含钠盐浓度为0.6%的固体培养基培养筛选出的具有耐盐性状的愈伤组织，愈伤组织需要经过再分化等过程才能发育为耐盐植株，而不是直接发育为植株，D错误。故选A。13.科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞可培育出不同细胞（过程如图所示），用于治疗阿尔兹海默症、心血管等疾病。下列相关叙述错误的是（）A.图示过程说明人体内细胞分化具有可逆性B.培养成纤维细胞时，需要CO2培养箱进行培养C.病人的成纤维细胞诱导而成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，可避免免疫排斥D.iPS细胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4表达的蛋白质【答案】A【解析】【分析】在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。【详解】A、成纤维细胞在c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4的诱导下才能获得类似于胚胎干细胞的一种细胞，在人体内部不能发生，因此这不能说明人体内的细胞分化具有可逆性，A错误；B、培养成纤维细胞时，动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，所以将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，B正确；C、由于取自身成纤维细胞形成的iPS细胞表面抗原相同，所以可用于自身疾病的治疗，可避免免疫排斥反应，C正确；D、通过在诱导体系中加入c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4获得了iPS

细胞，说明iPS

细胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sox2和Oct-3/4表达的蛋白质，有助于细胞的脱分化，D正确。故选A。14.抗体—药物偶联物（ADC）通过采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到能特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如图所示，下列有关说法错误的是（）A.单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合B.用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体C.ADC以胞吞的方式进入肿瘤细胞，这体现了细胞膜的功能特点具有一定的流动性D.ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡【答案】C【解析】【分析】分析题图，抗体药物偶联物(ADC)通过将具有生物活性小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。【详解】A、B淋巴细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，利用该细胞制备单克隆抗体，A正确；B、单克隆抗体制备过程中至少经过两次筛选，一次是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，即用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，就可获得既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；C、ADC以胞吞的方式进入肿瘤细胞，这体现了细胞膜的结构特点具有一定的流动性，C错误；D、ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，溶酶体使其裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，D正确。故选C。15.Trop-2是一种跨膜糖蛋白，在多种肿瘤组织中高表达，参与细胞内多种信号转导，从而调控细胞的增殖和转移。Trop-2抗体和细胞毒素类药物SN-38构成偶联物（SG）可以有效治疗乳腺癌，下图为SG的制备过程。下列相关叙述，错误的是（）A.推测肿瘤组织表达Trop-2糖蛋白可促进细胞的增殖和转移B.①过程可用灭活的病毒使细胞膜的蛋白质和脂质分子重新排布C.③过程通过克隆化培养和抗体检测获得分泌抗Trop-2抗体的细胞D.④过程形成SG通过SN-38特异性识别Trop-2并杀伤乳腺癌细胞【答案】D【解析】【分析】单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。【详解】A、根据题意Trop-2

是一种跨膜糖蛋白，在多种肿瘤组织中高表达，参与细胞内多种信号转导，从而调控细胞的增殖和转移，推测肿瘤组织表达Trop-2糖蛋白可促进细胞的增殖和转移，A正确；B、①过程为细胞融合过程，可用灭活的病毒促进细胞融合，B正确；C、通过克隆化培养和抗体检测获得分泌抗Trop-2抗体的细胞，C正确；D、④过程形成SG

通过Trop-2

抗体特异性识别

Trop-2

并将SN-38运送到相应位置杀伤乳腺癌细胞，D错误。故选D。16.非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难，我国科学家经过反复实验，成功培育出了体细胞克隆猴，流程如图所示。下列说法错误的是（）A.体细胞比胚胎细胞分裂能力强，实验更容易成功B.采集的卵母细胞应培养至MII期C.组蛋白甲基化水平降低可提高胚胎发育率D.组蛋白乙酰化水平升高可提高胚胎发育率【答案】A【解析】【分析】图示过程为体细胞克隆猴培育过程，该过程应用了动物细胞培养、动物细胞融合（去核卵母细胞与体细胞融合）和胚胎移植等技术。体细胞核移植过程中获得的重构胚需要激活才能完成细胞的分裂和发育进程。【详解】A、胎猴体细胞高度分化，表现全能性比较困难，动物体细胞核移植的难度非常大，A错误；B、卵母细胞需在体外培养至成熟，即培养至MII期，B正确；C、据图可知，将组蛋白去甲基化酶的mRNA注入重构胚，这样可降低组蛋白的甲基化水平，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达，激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，提高了胚胎的发育率和妊娠率，C正确；D、据图可知，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂处理重构胚，提高组蛋白的乙酰化水平，激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，提高了胚胎的发育率和妊娠率，D正确。故选A。17.三亲婴儿技术是一种辅助生殖技术，旨在帮助那些有线粒体疾病风险的女性生育健康的孩子。其培育过程如图，下列叙述错误的是（）A.卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物B.供体精子需获能后才能与卵母细胞发生受精作用C.该技术可避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代D.三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖【答案】D【解析】【分析】1、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。2、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。【详解】A、核移植的受体细胞处于MII期，捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的纺锤体染色体复合物，A正确；B、供体精子需经过体外获能处理后才能与卵母细胞发生受精作用，B正确；C、母亲为“三亲婴儿“提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，C正确；D、三亲婴儿来源于精子和卵母细胞结合形成的受精卵，属于有性生殖，D错误。故选D。18.EPO是人体肾脏分泌的一种肽类激素，能使骨髓生成红细胞的量增加，提高血红蛋白含量，增加血液携氧、供氧能力，是临床上一种治疗肾性贫血的药物。下图是采用中国仓鼠卵巢细胞表达系统来生产EPO的过程。下列相关叙述错误的是（）A.在③之前，可以对精子用含有Ca2+载体的获能液处理，使其获得受精的能量B.在③过程，精子需要依次穿越卵母细胞的透明带和卵细胞膜C.在⑥之前，需要割取囊胚的部分滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别D.甲乙丙丁是同一物种，但只有丁获得了人类的EPO基因【答案】A【解析】【分析】图中①表示卵母细胞的采集和培养，②为精子的采集和获能，③为体外受精，④为目的基因导入受体细胞，⑤为胚胎的早期培养，⑥为胚胎移植，⑦为转EPO基因仓鼠的生长发育过程，⑧为检测目的基因EPO是否表达出EPO活性成分。【详解】A、对于仓鼠而言，应采用培养法，即将精子放于人工配制的获能液中，培养一段时间后，精子就可获能；对于牛、羊等家畜的精子而言，可将精子放在含有Ca2+载体的获能液处理，但不是使其获得受精的能量，A错误；B、③为体外受精，受精时，精子需要依次穿越卵母细胞透明带和卵细胞膜，B正确；C、根据题意“采用中国仓鼠卵巢细胞表达系统来生产EPO的过程”，⑥为胚胎移植，在此之前需要割取囊胚的部分滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别，C正确；D、由图示可知，甲乙丙丁仍是同一物种，但只有丁通过转基因技术获得了人类的EPO基因，D正确。故选A。19.下表所示为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点。下列说法错误的是（）限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点注：Y=C或T，R=A或CBglIIA↓GATCTKpnICCTAC↓CEcoRIG↓AATTCMbooI↓GATCHindIGTY↓RACSmaICCC↓GGGA.限制酶的作用底物都是双链DNA，都能切开磷酸二酯键B.BglⅡ和MbooI两种限制酶切后可形成相同的黏性末端C.SmaI切DNA后成的末端可用EcoliDNA连接酶连接D.一种限制酶可能识别多种核苷酸序列【答案】C【解析】【分析】限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（3）结果：形成黏性末端或平末端。【详解】A、限制酶能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，A正确；B、BglⅡ和MbooI两种限制酶切后可形成相同的黏性末端，均为GATC—，B正确；C、SmaI切DNA后成的末端为平末端，而EcoliDNA连接酶只能连接黏性末端，C错误；D、HindI限制酶的识别序列为GTY↓RAC，其中Y=C或T，R=A或G，说明其识别序列不只一种，则一种限制酶可能识别多种核苷酸序列，D正确。故选C。20.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A.可选用新鲜的香蕉、菠菜、猪肝等作为实验材料B.研磨液中2mol/L的NaCl溶液有利于溶解DNA和去除杂质C.过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性D.DNA溶液中加入4mL二苯胺试剂后即可出现蓝色【答案】D【解析】【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。【详解】A、新鲜的香蕉、菠菜为植物材料，猪肝为动物材料，它们都含有DNA，均可作为该实验材料，A正确；B、DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较高，有利于溶解DNA，同时一些杂质在该浓度下溶解度较低，可去除杂质，B正确；C、过滤液放入4°C冰箱或加入预冷的酒精，低温环境可抑制DNA酶的活性，减少DNA的分解，C正确；D、DNA溶液中加入4mL二苯胺试剂后，需要沸水浴加热5min左右才会出现蓝色，而不是直接就出现蓝色，D错误。故选D。二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。21.腐乳是我国传统发酵食品，具有很高的营养价值。某科研机构研究了腐乳生产过程中不同浓度的食盐对腐乳中氨基酸含量的影响。下列叙述错误的是（）A.腐乳生产过程中发挥主要作用的微生物是酵母菌B.时间和食盐浓度均可影响腐乳中氨基酸的含量C.经过发酵，豆腐中的蛋白质全部分解为小分子肽D.食盐浓度越高，对微生物抑制作用越强，对制作腐乳越有利【答案】ACD【解析】【分析】腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。【详解】A、腐乳生产过程中发挥主要作用的微生物是毛霉，A错误；B、本实验的自变量是时间和食盐浓度，从图中可以看出，在同一时间的不同食盐浓度中，氨基酸含量不同；在同一食盐浓度的不同时间内，氨基酸含量也不同，所以时间和食盐浓度均可影响腐乳中氨基酸的含量，B正确；C、经过发酵，豆腐中的蛋白质被分解为小分子的肽和氨基酸，C错误；D、高浓度食盐能抑制微生物生长，但同样会影响腐乳的口感，D错误。故选ACD。22.为了筛选高效分解纤维素的细菌，科学家进行了以下实验：①取白蚁的肠道菌悬液接种于CMC液体培养基A；②一段时间后，分瓶继续用CMC液体培养基培养；③将培养液梯度稀释并涂布于CMC固体培养基B；④将B中长出的菌落用牙签点种至CMC固体培养基C的同一位置；⑤向培养基B中加入刚果红，观察透明圈出现情况。下列说法错误的是（）A.CMC培养基应以纤维素为唯一碳源，培养基A和B的区别在于有无琼脂B.用CMC液体培养基培养和分瓶有利于增加纤维素分解菌的种类C.透明圈和菌落半径的比值大小可反映纤维素酶的活性高低和含量多少，应从B中挑取比值大的菌落用于培养D.培养基B起到鉴别作用，培养基C有利于对原菌种进行挑选【答案】B【解析】【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、为了筛选纤维素分解菌，则CMC培养基应以纤维素为唯一碳源，培养基A是液体培养基、B是固体培养基，则区别在于有无琼脂，A正确；B、用CMC液体培养基培养和分瓶有利于增加纤维素分解菌的数量，B错误；C、产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈，透明圈的越大的纤维素分解菌的分解能力越强，纤维素酶活力的越高，则透明圈直径与菌落直径比值大的菌落所产的纤维素酶活力高，则应从B中挑取比值大的菌落用于培养，C正确；D、培养基B加入刚果红是鉴别培养基，起到鉴别作用，B中长出的菌落是分解纤维素的细菌，将B中长出的菌落用牙签点种至CMC固体培养基C的同一位置，有利于对原菌种进行挑选，D正确。故选B。23.苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是（）A.①试管中加入PEG目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生B.图中过程与植物体细胞杂交过程相比，去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同C.离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体D.图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株染色体数目加倍【答案】ABD【解析】【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。这种技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面具有独特的优势。【详解】A、①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合，PEG不具有诱导细胞壁再生的作用，A错误；B、去除细菌细胞壁和植物细胞的细胞壁都可以用酶解法，但所用酶的种类不同；图中为细菌细胞的杂交过程，与植物体细胞杂交过程相比，诱导融合的方法不完全相同；图中过程与植物体细胞杂交所依据的原理均有细胞膜具有一定的流动性，但植物体细胞杂交还利用了植物细胞具有全能性的原理，将杂种细胞培育为杂种植物，B错误；C、溶菌酶可以溶解细菌的细胞壁。离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体，C正确；D、筛选到的融合株，还要从个体生物学水平检测其是否具有杀灭玉米螟和杀灭蚊子的能力，所以图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株既有苏云金杆菌的基因，又有灭蚊球孢菌的基因，但这两种生物是原核生物，不含染色体，D错误。故选ABD。24.如图表示双抗体夹心法检测抗原的过程，该方法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性。下列叙述正确的是（）A.图示两种抗体与样品中待测抗原的结合位点不同B.温度、pH等会影响双抗体夹心法检测抗原的结果C.用双抗体夹心法检测抗原需要制备两种能与抗原结合的单克隆抗体D.双抗体夹心法与只使用单克隆抗体相比，能增加可识别抗原的种类【答案】ABC【解析】【分析】据图分析，固相抗体和抗原特异性结合，再与酶标抗体结合，催化特定底物形成检测产物。【详解】AC、据图可知，用双抗体夹心法检测抗原时需要用到与抗原不同位点结合的两种抗体，因此用双抗体夹心法检测抗原需要制备两种能与抗原结合的单克隆抗体，AC正确；B、据图可知，双抗体夹心法利用酶标抗体中的酶水解相应物质，通过检测水解产物的量来反映样品中抗原的含量，由于酶活性受温度、pH等因素的影响，因此温度、pH等会影响双抗体夹心法检测抗原的结果，B正确；D、抗原与抗体的结合具有特异性，双抗体夹心法与只使用单克隆抗体相比，未增加识别抗原的种类，D错误。故选ABC。25.科学家将编辑基因的分子工具构建到靶向侵染心肌细胞的病毒中，通过尾部静脉注射到成年小鼠体内，成功编辑线粒体DNA。该研究让耳聋、癫痫、肌无力等线粒体遗传病迎来治愈的希望。下列说法正确的是（）A限制性内切核酸酶能对DNA分子进行剪切和拼接B.线粒体遗传病主要与能量代谢障碍有关C.侵染心肌细胞的病毒作为载体导入受体细胞D.耳聋等线粒体遗传病表现为母系遗传【答案】BCD【解析】【分析】线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，是细胞的动力车间。线粒体基因属于细胞质基因，表现为母系遗传的特点。【详解】A、限制性内切核酸酶能对DNA分子进行剪切，但不能进行拼接，DNA拼接需要DNA连接酶，A错误；B、线粒体是有氧呼吸的主要场所，是细胞的“动力工厂”，线粒体遗传病主要与能量代谢障碍有关，B正确；C、侵染心肌细胞的病毒在该研究中作为运载基因的载体，C正确；D、受精卵中的细胞质由卵细胞提供，线粒体中的DNA属于细胞质DNA，所以耳聋等线粒体遗传病表现为母系遗传，D正确。故选BCD。第Ⅱ卷非选择题（共45分）26.某小组利用塑料饮水杯、充氧泵、空气过滤器、回旋式单向阀、硅胶管等材料制作的一种新型的果酒、果醋两用发酵装置，如下图。请分析回答（1）制作果酒、果醋的微生物的代谢类型分别是______型、______型。（2）图中______和不锈钢气泡石能为发酵罐中的培养液进行充氧操作，______能为通入的空气进行无菌过滤，从而对发酵罐中的培养液实现无菌换气。（3）酿制果酒时一般将温度控制在______℃，图示装置一般要先通气后紧闭软管夹，通气的目的是______。若要检测果汁发酵后是否有酒精产生，可从出料口取2mL发酵液加入试管，再滴加0.5mL______溶液，观察是否呈现灰绿色。（4）图中排气构件由回旋式单向阀通过硅胶塞连接于排气口而成，使用前先在单向阀内装入约1/3体积冷却的开水，这样处理的主要好处有______。（至少答出两点）【答案】（1）①.异养兼性厌氧②.异养好氧（2）①.充氧泵②.空气过滤器（3）①.18～30②.有利于酵母菌的繁殖③.酸性重铬酸钾（4）及时排出气体、防止外界杂菌的污染、通过气泡的生成了解发酵状况、排气不需要人工控制等【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳;2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【小问1详解】参与果酒制作的微生物是酵母菌，为异养兼性厌氧型真菌，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，为异养好氧细菌；【小问2详解】由图示装置可知，通电后的充氧泵和不锈钢气泡石能为发酵罐中的培养液进行充氧操作，空气过滤器能为通入的空气进行无菌过滤，从而对发酵罐中的培养液实现无菌换气；【小问3详解】酵母菌发酵的最适温度为18~30℃；通气目的是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；用酸性重铬酸钾可以检测酒精，操作步骤为从出料口取2mL发酵液加入试管，再滴加酸性重铬酸钾溶液，观察溶液是否呈现灰绿色；【小问4详解】排气构件由回旋式单向阀通过硅胶塞连接于排气口而成，使用前先在单向阀内装入约1/3体积冷却的开水，利用水封的原理，不仅能将发酵过程产生的气体及时排出发酵罐，并通过单向阀中气泡的生成了解发酵状况，还能有效隔绝外界空气对发酵介质的氧化及外界杂菌的污染，同时排气不需要人工控制，使用方便。27.某种物质X（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。请分析并回答下列问题：（1）实验时，一般对配制的培养基采用_____方法进行灭菌，乙培养基中的Y物质是_____，按用途分，甲、乙培养基均属于_____培养基。（2）制备实验所需的培养基时，需要调节培养基的pH，应该在灭菌_____（填“前”或“后”）进行操作。倒平板时为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_____附近进行，接种后的培养皿需_____放于37℃恒温培养箱中培养。（3）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0．1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____倍。（4）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的X超过某一浓度时，某菌株对X的降解量反而下降，其原因可能是_____。（5）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是_____。【答案】（1）①.高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）②.凝固剂（或琼脂）③.选择（2）①.前②.酒精灯火焰③.倒置（3）104（4）X浓度超过某值时会抑制菌株生长（或X浓度过高，菌株失水，代谢能力下降）（5）单独设置一个灭菌后不接种的空白培养皿（含培养基）放入相同且适宜条件下培养，观察是否有菌落生成【解析】【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以X为唯一碳源和氮源的选择培养基上，其中Y为琼脂，④为挑取单菌落接种到培养基上，⑤以X为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选。【小问1详解】灭菌的方法包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，而培养基一般使用高压蒸汽灭菌法。微生物的分离和筛选一般使用固体培养基，需要加入琼脂，故物质Y是琼脂。由于甲、乙培养基都是以X为唯一碳源和氮源的培养基，故按用途划分，二者都属于选择培养基。【小问2详解】制备实验所需的培养基时，需要在灭菌前调节培养基的pH，以免调节pH过程中又带来杂菌的污染。倒平板时为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。为防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，需要将其倒置培养。【小问3详解】利用稀释涂布平板法对细菌进行计数，要保证每个平板上长出的菌落数不超过200，假设稀释倍数为a，在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，则有200×a÷0.1=2×107，则稀释倍数a=104。【小问4详解】在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的X超过某一浓度时，可能会导致细菌细胞由于渗透作用失水过多，导致活性丧失，即X浓度超过某一值时会抑制菌株生长。【小问5详解】为了检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是将未接种的培养基在相同且适宜的条件下培养，观察培养基上是否有菌落产生，若有菌落产生则表示培养基灭菌不合格，反之合格。28.三白草和鱼腥草是不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。（1）图1中过程①通常采用________________酶去除细胞壁。过程②可体现细胞膜具有_____________特点，该过程除了可利用聚乙二醇诱导融合外，还可采用的化学法有_______等，杂种原生质体融合完成的标志是_____________。（2）用红色、绿色荧光分别标记三白草、鱼腥草原生质体后，诱导融合（带荧光的原生质体仍能融合和再生），在荧光显微镜下会看到_______种颜色的融合细胞（仅考虑两两融合情况），随后选择带________________的杂种原生质体。（3）图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是__________（填“植物组织培养”或“植物细胞培养”）。（4）由图2可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度约为_____________个/mL。【答案】（1）①.纤维素酶、果胶酶②.一定的流动性##流动性③.高Ca2+-高pH融合法④.再生出细胞壁（2）①.3②.红色和绿色荧光（3）植物细胞培养（4）1×106【解析】【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个·mL-1时，比例最高。【小问1详解】植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，所用酶是纤维素酶和果胶酶。过程②为原生质体融合，原生质体融合体现了细胞膜具有流动性的特点。诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（（聚乙二醇））诱导融合，还可以用高Ca2+-高pH融合法诱导融合。杂种原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁形成杂种细胞。【小问2详解】三白草原生质体被红色荧光标记，鱼腥草原生质体被绿色荧光标记，诱导融合后，在荧光显微镜下可观察到3种颜色的融合细胞：红色和绿色荧光的融合细胞（一个三白草原生质体与一个鱼腥草原生质体融合合）、只有红色荧光的融合细胞（两个三白草原生质体融合）、只有绿色荧光的融合细胞（两个鱼腥草原生质体融合）。【小问3详解】图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是植物细胞培养。这种技术涉及在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养，从而得到分散成游离的悬浮细胞。通过继代培养，这些细胞能够增殖，进而获得大量的细胞群体。这种技术使得我们可以在体外有效地生产所需的代谢产物，实现工厂化、规模化的生产目标。【小问4详解】由图2柱形图可知，在密度为1×106个·mL-1时，双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个·mL-1。29.人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白Ⅱ（cTnl）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnl在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnl的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：（1）动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的______，以满足动物细胞培养的营养需要，将培养的细胞置于含有______的混合气体的CO2培养箱中进行培养。（2）每隔2周用cTnl作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目是______。取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，不同于植物细胞融合的诱导因素是______。（3）将获得的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基进行第一次筛选，核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如下图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”作为选择培养基筛选出杂交瘤细胞。融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中______（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是可以通过______（全合成途径/补救合成途径）合成DNA.（4）甲、乙、丙中，