TCACM1326.29-2019羯布罗香种子超低温保存技术规程_第1页
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ICSC T/CACM1326.29—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofDipterocarpusturbinatusGaertn.f. 中华中医药学会T/CACMT/CACM1326.29—目前 范 附录A（规范性附录）TTC/磷酸盐缓冲液的配制和保存方 前——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM GB/T1.1—20091部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。T/CACMT/CACM1326.29—GB/T3543.6GB/T3543.7羯布罗香12cm～15cm3cm1种子超低温保存seedof月下旬～6月上旬，花萼变为棕色时即可采收，成熟期较短，于一周内采收完，去除果翅，取挑选发育饱满、均匀、健康的种子，置于10℃冰箱中保存备用（存放时间不超过15d）。切羯布罗香种子活力以种子生活力为判别标准。按照GB/T3543.7中的2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测种子生活力。随机抽取30粒种子，剥去外层种皮，沿种脊小心将种子分成2爿后放培养皿内，内侧面向下，滴入TTC溶液浸没种子，室温（25℃)避光放置4h后观察染色结果。TTCA90

𝐴

×100%⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（1）12h～26h50%～60%

𝑀1−

×100%……….30015mL管（每管2粒种子）中，迅速投入液氮中保存。24h10402min取出5管解冻后的种子，按照5.1活力检测方法进行超低温保存后的初始生活力检测。当种子生活力≥60％时视为保存成功。将剩下5管解冻后的羯布罗香种胚，播种到MS固体培养基中，温度28℃～30℃，湿度70%～85%条件下培养。羯布罗香种胚出芽周期大概10d～20d。附录TTC1.00g100mL1TTCpH6.5～7.54溶液I：9.08g磷酸二氢钾溶于1L无菌水中；II：35.81g1LI﹕II2﹕350(2)[MLiHsi-wen,LiJie,PeterS.Ashton.Dipterocarpaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.2007.13:48.国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（第三册）[M].上

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