TCACM1326.38-2019银柴种子超低温保存技术规程

ICSC T/CACM1326.38—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofAporusadioica(Roxb.)Arg. 中华中医药学会T/CACMT/CACM1326.38—目前 活 附录A（规范性附录）试剂的配制和保存方 前——T/CACM1326.1——T/CACM1326.2——T/CACM1326.3——T/CACM1326.4——T/CACM1326.5——T/CACM1326.6——T/CACM1326.7——T/CACM1326.8——T/CACM1326.9——T/CACM1326.10GB/T1.1－2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。T/CACMT/CACM1326.38—Aporusadioica(Roxb.)MuellArgGB/T3543.6银柴Aporusadioica(Roxb.)Muell.为大戟科（Euphorbiaceae）银柴属（AporusaBl.）常绿乔木，在海拔1000m银柴果实Aporusadioica(Roxb.)Muell.Arg.1cm～1.3cm2银柴种子Aporusadioica(Roxb.)Muell.Arg.5.5mm96.94gseedof℃6月～9月，当果皮颜色由绿转为黄绿色，果实自然开裂，种子呈淡黄色时，即可采收，去除外4（2）法测定银柴种子生活力。待测种子在30℃～35℃温水中浸种2h，随后取吸胀种子50粒，整齐1.5％BTB35℃温箱中7h后BTBAA.160%𝐴

×100%⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（1）用尼龙网袋包裹银柴种子，置于盛有变色硅胶的干燥器内，硅胶与种子的体积比为60：1，室温条件下干燥处理2h～8h，在干燥过程可定期测定种子含水量，将种子含水量由15％～20％降至

𝑀1−

×100%……….50015mL（40min，换上预冷新鲜的PVS2后迅速投入液氮中进行超低温保存。LSPVS2AA.2A.324h1402min洗涤液（DS）15min3DSAA.4205.1子生活力≥50％时视为保存成功。2025～30度70％～85％条件下培养。附录BTB精密称取BTB0.1g，溶解于煮沸过的100mL纯水中，然后用滤纸去残渣。滤液若呈黄色，可1.5BTB0.1BTB40mL0.5g加入杯中，加热并不断搅拌使之完全溶解。待溶液稍稍冷却即可趁热倒入9cm培养皿中，使之成一13.7g11.9mLMSpH5.8100mL，高温高压灭菌，4℃冷藏。23.8mL13.6mL13.6mL13.7gMS中，调pH至5.8后，定容至100mL，高温高压灭菌，4℃冷藏。精密称取蔗糖41.1gMS溶液中，调pH至5.8后，定容至100mL，高温高压灭菌，4℃M中国科学院中国植物志委员会.中国植物志.第44(1)卷[M].科学出版社LiPing-tao,ChiuHua-hsing.etal.Euphorbiaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGarde