《农产品质量检测技术》课件-29.大肠菌群测定

农产品质量检测技术大肠菌群的测定大肠菌群的测定在食品安全领域，微生物检测是一项至关重要的工作，它直接关系到消费者的健康和安全。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，因为大肠菌群的存在可能表明食品受到了粪便污染，这可能含有病原细菌、病毒或寄生虫，从而对消费者的健康构成威胁。因此，大肠菌群的检测是食品安全检测中不可或缺的一部分。通过检测大肠菌群，我们可以评估食品加工和处理过程中的卫生控制水平，以及食品在储存和运输过程中是否受到污染。一、大肠菌群的定义这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：在37℃、24h内能发酵乳糖，产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称。大肠菌群大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语。它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。大肠埃希氏菌柠檬酸杆菌产气克雷白氏菌阴沟肠杆菌一、大肠菌群的定义大肠菌群在37℃、24h内能发酵乳糖，产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称。二、大肠菌群的测定方法MPN计数法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数。平板计数法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。二、大肠菌群的测定方法大肠菌群MPN计数法MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。待测样品经系列稀释并培养后，根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度，应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。复发酵初发酵样品稀释一MPN法二、大肠菌群的测定方法大肠菌群MPN计数法检样25g(mL)样品+225mL稀释液，均质10倍系列稀释选择适宜3个连续稀释度的样品匀液，接种LST肉汤管不产气产气36℃±1℃24h~48hBGLB肉汤36℃±1℃48h±2h不产气产气大肠菌群阴性大肠菌群阳性查MPN表结果报告初发酵试验复发酵试验（证实实验）样品稀释大肠菌群最可能数(MPN)的报告样品匀液的pH应在6.5~7.5之间，必要时分别用1mol/LNaOH或1mol/LHCl调节。用无菌吸管吸取1mL1∶10样品匀液注入装有9mL生理盐水的无菌试管中，注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面，振摇试管，使其混合均匀，制成1∶100的样品匀液。根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。二、大肠菌群的测定方法大肠菌群平板计数法根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。注意二、大肠菌群的测定方法大肠菌群平板计数法检样25g(mL)样品+225mL稀释液，均质10倍系列稀释选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液，倾注VRBA平板36℃±1℃18h~24h计数典型和可疑菌落结果报告平板菌落数的选择BGLB肉汤平板计数样品稀释证实试验36℃±1℃24h~48h平板计数报告二、大肠菌群的测定方法大肠菌群平板计数法10-4样品稀释液1mL，在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落，挑取其中10个接种BGLB肉汤管，证实有6个阳性管，则该样品的大肠菌群数为：例100×6/10×104/g(mL)=6.0×105CFU/g(mL)随着科技的发展，新的检测技术和方法也在不断涌现，如PCR技术、免疫学方法等，这些现代技术通常具有更高的灵敏度和特异性，可以大幅缩短检测时间，提高检测效率。确保食品安全，是我们每一位食品专业工作者的责任。通