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文档简介
152024-03-15发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区马铃薯标准化技术委员会(SAM/TC4I马铃薯镰刀属真菌病害检测技术规程本文件规定了马铃薯镰刀属真菌病害检测的原理、仪器设备和用具、形态检验、致病性测定、PCR学特征,回接致病性测定及PCR反应结果为鉴定依据,将上述各项措施综合形成一套超净工作台、显微镜、高压灭菌锅、光照培养箱、PCR仪、离心机、凝胶电泳仪、漩涡震荡仪、水接种针、手术刀、镊子、挑针、载玻片、盖玻片、滴管、离心管、培养皿、三角瓶、酒精灯。1切,或切取表皮凹陷病斑处进行观察,观察是6.2病原菌分离培养和纯化PDA培养基上,在25℃恒温下光照、黑暗交替各12h培养5d。待组织长出菌丝后,挑取菌丝体转移到新的PDA培养基上进行培养。待菌落长至培养皿2/3时6.3病原菌形态学鉴定月牙形,2~5个分隔,多为3个分隔,大小3µm~8µm×11µm~70µm;厚垣孢子球形,表面不光滑,发病情况。如出现与病样一致的症状则判定病原菌能够引起按照SN/T2729,采用CTAB法提取8.2对照设置以菌株DNA为模板,利用镰刀菌属真菌的特异性引物8.4结果判定扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增出长度介于700bp~750bp之间的清晰单一23
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