DB5133-T 97-2024 藏猪人工授精技术规程

ICS65.020.30CCSB405133TechnicalregulationsforartificialinseminationofTibetanpigsIDB5133/T97—2024前言 12规范性引用文件 13术语和定义 14采精公猪选择 25采精公猪调教 26采精公猪采精 37精液质量检测 48精液的稀释、、、 9人工输精 510人工授精后母猪管理 6附录A（资料性）生产记录表 7DB5133/T97—2024本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由甘孜藏族自治州畜牧站提出。本文件由甘孜藏族自治州农牧农村局归口。本文件起草单位：甘孜藏族自治州畜牧站、稻城县农牧农村和科技局、稻城县一沐天珠牧业有限公司、稻城康巴情牧业有限公司。本文件主要起草人：涂永强、王俊杰、毛进彬、彭海云、冯勇、王照燕、杨鹏波、巴桑卓玛、杨甲呷、格桑、马贵云、曹丰磊、丁真卓玛、周璞、许新宏。DB5133/T97—20241藏猪人工授精技术规程本文件规定了藏猪采精公猪选择、调教、采精，精液质量检测、稀释、分装、贮存、运输，人工输精等技术规范要求。本文件适用于甘孜州藏猪人工输精站、养殖大户、专合社、规模养殖场。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T32763藏猪NY/T820种猪登记技术规范DB5133/T7藏猪主要疫病防治技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1前期调教earlytrainingofboars在60日龄～180日龄内，通过专人饲养管理，与初选采精公猪建立情感联系的过程。3.2后期调教late-stagetrainingofboars对180日龄以上、性成熟和体成熟的终选采精公猪进行爬跨假母台和采精调教的过程。3.3精子活力spermmotility在显微镜下观察，精液中呈直线运动的精子数占总精子数的百分率。通常采用0-1.0十级评分，鲜精液的精子活力高于0.8为正常。3.4精子密度spermdensity单位体积精液中的精子数，单位为亿/mL，一般用精子密度测定仪或血球计数板进行测定。3.5有效精子数totalmotilecount精液中呈直线前进运动的精子总数。3.6静立反射standingreflex母猪发情时,接受其它母猪、试情公猪爬跨或人工压背,表现出静立不动的现象。DB5133/T97—202424采精公猪选择4.1初选应参照GB/T32763的规定，选择60日龄，已剪獠牙，体重达5㎏～7㎏，符合藏猪品种特征的健康公猪。要求被毛黑色，嘴筒长，耳小直立，体躯较长，背腰较平直，四肢结实，蹄质坚实直立，阴茎和双睾生长发育正常，无传染性疾病。4.2终选初选公猪饲养至180日龄时，选择性情胆大温顺、体重≥25kg且符合种用标准的个体。5采精公猪调教5.1前期调教5.1.1对终选的采精公猪进行分圈饲养。5.1.2固定责任心强的调教人员，专人饲喂。5.1.3刷拭猪颈、背、腹部，抚摸阴茎部，2次/日；赶猪锻炼，1次/日，建立情感联系和信任。5.2后期调教5.2.1假母台调教采精5.2.1.1选择合适的假母台假母台高度应可调节，前端高度40cm～60cm，长度80cm～100cm，倾斜度10°~20°。5.2.1.2爬跨调教爬跨调教具体操作如下：a)将采精公猪赶至采精圈，地面铺上防滑垫，保持环境安静和适宜光线强度。让采精公猪自由熟悉假母台，同时观察性欲表现。b)在假母台铺上涂抹发情母猪尿液、阴道分泌物或喷洒公猪诱情剂。c)将带有发情母猪尿液的毛巾放在公猪鼻子前方，诱导公猪走向假母台前端，此时缓慢提升毛巾高度，使公猪抬头，并爬跨假母台。d)调教频率及时间，3次/周～5次/周，10min/次～15min/次。5.2.1.3采精调教采精调教具体操作如下：a)调教人员先挤净包皮内积尿，再用0.1%高锰酸钾溶液和温水（或湿纸巾）依次清洗外阴部，最后双手使用75%酒精喷雾消毒。b)调教人员蹲在左（右）后侧，对阴茎鞘进行按摩，刺激采精公猪性欲。c)采精公猪阴茎充分勃起后，调教人员用虎口夹紧阴茎，小拇指刺激龟头，随着阴茎的抽动，缓缓拉出阴茎25cm～30cm，待采精公猪完全静立后，在抓稳的同时对阴茎进行施压，刺激采精公猪射精。d)调教频率及时间，1次/周～2次/周，10min/次～15min/次。DB5133/T97—20243e)调教好的公猪不可再进行自然交配。针对假母台调教失败的公猪，可在发情母猪背上调教采精。5.2.2发情母猪背上调教采精5.2.2.1选择适合的发情母猪选择的发情母猪和采精公猪体型大小要基本一致，静立反射良好。5.2.2.2消毒调教人员先使用0.1%高锰酸钾溶液对发情母猪整个臀部进行消毒后用温水冲洗；再挤净采精公猪包皮内积尿，用0.1%高锰酸钾溶液和温水（或湿纸巾）依次清洗公猪外阴部；最后调教人员双手使用75%酒精喷雾消毒。5.2.2.3采精调教将发情母猪和采精公猪赶至采精圈，地面铺上防滑垫，保持环境安静和适宜光线强度。待采精公猪爬跨发情母猪，阴茎充分勃起后，调教人员应快速用虎口夹紧阴茎，随着阴茎的抽动，缓缓拉出阴茎25cm～30cm，待采精公猪完全静立后，在抓稳的同时对阴茎进行施压，刺激采精公猪射精。5.2.2.4调教频率及时间2次/周～3次/周，5min/次～10min/次。5.2.3采精公猪调教管理每次采精调教后，补充优质蛋白质饲料或1个～2个鸡蛋；观察采精公猪体况，加强运动锻炼；采精公猪的疫病防控应符合DB5133/T7的规定。6采精公猪采精6.1采精前准备6.1.1温度调试采精室和精液检测室温度调至25℃~27℃。6.1.2设备调试开启载物台恒温板，将恒温采精杯、水浴锅、恒温干燥箱调至37℃,精液恒温贮存箱调至17℃;调节双显显微镜和精子密度检测仪；使用实验室蒸馏水机备足蒸馏水，提前30min用稀释粉配好所需量的稀释液，将量杯、精液稀释分装杯、精液瓶、玻棒等放入恒温干燥箱中预热至37℃。在恒温采精杯中套好集精袋和三层过滤纸。6.2采精6.2.1采精员先挤净采精公猪包皮内积尿，再用0.1%高锰酸钾溶液和温水（或湿纸巾）依次清洗外阴部，最后双手使用75%酒精喷雾消毒。使用发情母猪背上采精的，还应对发情母猪臀部进行清洗消6.2.2采精员站在公猪左（右）后侧，左（右）手持恒温采精杯，右（左）手戴无屑乳胶手套，按压DB5133/T97—20244阴茎部5s～10s后，待其伸出阴茎，紧握阴茎螺旋状龟头，缓缓拉出阴茎25cm～30cm，轻轻施压促其射精，收集精液。6.2.3射出的初段精液精胶过多，不收集，待射出乳白色精液时开始收集至射精结束。6.3采精频率不超过2次/周，间隔3日及以上。6.4加强管理每次采精后，补充优质公猪蛋白质饲料或1个～2个鸡蛋。平常加强运动。7精液质量检测7.1采精量采集精液后，将集精袋从恒温采精杯中取出，放入精液稀释分装杯中读取刻度。藏猪公猪采精量为50mL～200mL。7.2颜色正常精液为乳白色或淡灰色，有异常颜色如带有绿色、淡红色、红褐色的应弃用。7.3气味藏猪精液带有较浓腥味，有其他异常气味应弃用。7.4精子活力和精子畸形率用玻棒蘸取原精液，滴于载玻片上，用双显显微镜观察。藏猪精液精子活力为0.8～0.95。精子畸形率<10%。7.5精子密度用精子密度仪测定，藏猪精液精子密度为1.4亿/mL～2.4亿/mL。8精液的稀释、分装、储存、运输8.1精液稀释8.1.1计算有效精子数、稀释份数、稀释液添加量根据采精量、精子活力、精子密度计算有效精子数、稀释份数、稀释液添加量。输精每头每次按≥20亿个有效精子数，输精量30mL～40mL进行操作。式中：S——有效精子数，亿；V——采精量，mL；D——精子密度，亿/mL；DB5133/T97—20245M——精子活力。式中：N——稀释份数；S——有效精子数，亿。式中：L——稀释液添加量，mL；N——稀释份数；V——采精量,mL。8.1.2稀释操作8.1.2.1精液的稀释应保证在采集后5min～10min以内进行。8.1.2.2精准测量精液及稀释液温度，保证等温稀释，以精液温度为参照，两者温差≤1℃。8.1.2.3将稀释液沿精液稀释分装杯壁缓缓加入精液中，轻轻晃动混合均匀，不能搅拌和剧烈摇晃。8.1.2.4检测稀释后精液的精子活力，保证活力达到≥0.8。8.2精液分装及储存8.2.1取出对应数量的一次性精液瓶，与精液同温。8.2.2倾斜精液瓶45°,沿瓶壁缓缓倒入30mL～40mL，排出瓶内空气后，加盖密封。8.2.3精液瓶上贴上标签，标明公猪品种、耳号、采精日期、保存有效时间等信息。8.2.4分装好的精液用干毛巾包裹，放至17℃精液恒温贮存箱内。8.2.5隔10h～12h对分装好的精液缓慢摇晃均匀，避免精子沉淀死亡。8.3精液运输8.3.1场内运输将精液从恒温储存箱中取出，放置于水浴锅中升温至37℃后进行镜检，保证精子活力达到≥0.8。将符合要求的精液放入垫有干毛巾的保温箱中进行运输。8.3.2场外运输将精液从恒温储存箱中取出，放入17℃恒温运输箱中，尽量避免强烈震动或碰撞。8.4记录填写采精记录表，应符合NY/T820规定。采精记录表参见附录A。9人工输精9.1母猪发情鉴定每日早上10点～11点、下午3点～4点，饲喂后的母猪用试情公猪进行试情。发情初期，发情母猪爬跨其它母猪或接受其它母猪爬跨，试情公猪试情时，母猪接受爬跨但不静立；发情旺期，母猪表现DB5133/T97—20246为食欲降低，昼夜嘶叫，经产母猪外阴红肿，有少量粘液；初配母猪阴户无明显表现；试情公猪试情时，母猪弓腰竖耳，呈现交配姿势，出现明显的“静立反射”。9.2精液质量检查从17℃恒温精液储存箱中取出精液瓶，放置于水浴锅中升温至37℃后进行镜检，精子活力应≥0.8。9.3输精程序9.3.1将发情母猪赶至输精限位栏中，输精人员先对母猪外阴部、尾根部及臀部周围进行清理消毒，再用湿纸巾擦净母猪外阴部，最后进行双手消毒。9.3.2在一次性输精管头部涂抹上润滑剂，斜向上45°角插入母猪阴道至子宫颈，此时，轻轻向后拉动输精管能感到明显阻力，根据母猪体型，插入深度约15cm～30cm。9.3.3将精液瓶连接到输精管上，精液瓶高于阴户20cm以上，轻轻多次挤压精液瓶排出输精管内空气。观察精液输入情况，若无流动，则需检查输精管是否插入子宫颈，空气是否排净。9.3.4抚摸母猪外阴，按压母猪背部及背侧部，刺激母猪子宫收缩，自主吸收精液。9.3.5输精时间一般为5min～10min，输精完毕后，折叠输精管，打开输精瓶盖，将输精瓶套于折叠处1min～2min，观察有无倒流，若无，则缓缓拉出输精管；若倒流量大，需要再次输精。9.4输精间隔及次数发情母猪出现明显“静立反射”后，应立即准备，进行第1次输精。在上午发情的，5h～8h后在下午进行第2次输精，若次日上午母猪“静立反射”仍明显，需进行第3次输精；在下午发情的，次日上午9点～10点进行第2次输精，若下午母猪仍有明显“静立反射”，需进行第3次输精。9.5输精量根据母猪体型大小，控制在30mL/头·次～40mL/头·次。10人工授精后母猪管理10.1饲养管理母猪进行人工授精后，应由专人负责饲养管理，分妊娠阶段提供相应配合饲料；根据母猪预产期，