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文档简介
细胞治疗流式数据分析员岗位考试试卷及答案一、单项选择题(每题2分,共10题)1.流式细胞仪检测的信号不包括()A.散射光信号B.荧光信号C.化学发光信号D.以上都不对2.以下哪种荧光素发射光颜色为绿色()A.FITCB.PEC.APCD.PerCP3.流式细胞术检测细胞周期,常用的染料是()A.台盼蓝B.碘化丙啶(PI)C.吉姆萨染料D.瑞氏染料4.补偿调节的目的是()A.去除非特异性荧光B.增加荧光强度C.减少不同荧光通道间的重叠D.提高检测灵敏度5.前向散射光(FSC)反映细胞的()A.大小B.内部结构复杂程度C.表面抗原表达D.活性6.流式数据分析中,通常用什么工具圈门()A.鼠标B.键盘C.绘图板D.以上都可以7.正常人体外周血中淋巴细胞比例约为()A.10%-20%B.20%-40%C.40%-60%D.60%-80%8.以下哪种细胞表面标志可用于鉴定T淋巴细胞()A.CD3B.CD19C.CD56D.CD459.流式细胞仪的PMT指的是()A.光电倍增管B.激光发生器C.流动室D.数据采集卡10.进行流式细胞术检测时,细胞悬液的浓度一般要求在()A.10^3-10^4个/mlB.10^5-10^6个/mlC.10^7-10^8个/mlD.10^9-10^10个/ml二、多项选择题(每题2分,共10题)1.流式细胞术的主要应用领域包括()A.细胞免疫表型分析B.细胞周期分析C.细胞凋亡检测D.肿瘤细胞耐药性检测2.常用的流式细胞仪荧光素标记抗体有()A.FITC标记抗体B.PE标记抗体C.APC标记抗体D.AlexaFluor系列标记抗体3.流式数据分析中常用的软件有()A.FlowJoB.FCSExpressC.CellQuestD.SPSS4.影响流式细胞术检测结果准确性的因素有()A.样本制备B.仪器校准C.抗体质量D.数据分析方法5.以下哪些细胞表面标志与B淋巴细胞相关()A.CD19B.CD20C.CD22D.CD36.检测细胞凋亡的方法有()A.AnnexinV/PI双染法B.TUNEL法C.线粒体膜电位检测D.MTT法7.流式细胞仪的主要组成部分包括()A.液流系统B.光学系统C.电子系统D.数据分析系统8.细胞免疫表型分析可用于()A.白血病分型诊断B.免疫缺陷病诊断C.肿瘤免疫治疗监测D.自身免疫性疾病诊断9.流式细胞术样本制备过程中,需要注意的事项有()A.细胞浓度合适B.避免细胞团聚C.去除杂质D.保持细胞活性10.进行流式细胞术实验时,设置的对照包括()A.阴性对照B.阳性对照C.同型对照D.空白对照三、判断题(每题2分,共10题)1.流式细胞术只能检测细胞表面抗原。()2.荧光强度越高,说明细胞表面抗原表达量越高。()3.补偿调节在任何情况下都不需要进行。()4.前向散射光和侧向散射光信号都与细胞内部结构有关。()5.同型对照是为了排除非特异性荧光染色的影响。()6.流式细胞仪可以同时检测多种荧光信号。()7.细胞周期分析中,G1期细胞DNA含量是G2期的两倍。()8.检测细胞凋亡时,AnnexinV阳性、PI阴性的细胞为早期凋亡细胞。()9.流式细胞术样本可以长时间保存后再检测。()10.数据分析时,圈门的方法是固定不变的。()四、简答题(每题5分,共4题)1.简述流式细胞术的基本原理。2.为什么要进行补偿调节?3.列举两种常见的细胞周期分析方法及原理。4.样本制备过程中,如何保证细胞的活性?五、讨论题(每题5分,共4题)1.谈谈流式细胞术在肿瘤免疫治疗监测中的应用及意义。2.在流式数据分析中,如何提高结果的准确性和可靠性?3.当遇到流式细胞仪检测结果异常时,你会从哪些方面进行排查和解决?4.结合实际工作,说说细胞治疗流式数据分析员需要具备哪些技能和素质?答案一、单项选择题1.C2.A3.B4.C5.A6.A7.B8.A9.A10.B二、多项选择题1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABC6.ABC7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD三、判断题1.×(还能检测细胞内抗原等)2.×(存在其他影响因素)3.×(不同荧光通道有重叠时需进行)4.×(前向散射光反映细胞大小,侧向散射光反映内部结构复杂程度)5.√6.√7.×(G2期细胞DNA含量是G1期的两倍)8.√9.×(样本需及时检测,长时间保存会影响结果)10.×(需根据实际情况调整)四、简答题1.流式细胞术基本原理:将细胞制成单细胞悬液,在鞘液包裹下单行通过流动室,在激光照射下产生散射光和荧光信号,散射光反映细胞大小和内部结构,荧光信号由标记抗体上的荧光素受激发产生,光电探测器将光信号转化为电信号,经计算机分析处理得到细胞的相关信息。2.进行补偿调节是因为不同荧光素发射光谱有重叠,在检测多色荧光时,一种荧光信号会渗漏到其他荧光通道,导致检测结果不准确。补偿调节可去除这种荧光信号的重叠干扰,提高检测的准确性。3.常见细胞周期分析方法及原理:-碘化丙啶(PI)染色法:PI可与双链DNA结合,其荧光强度与DNA含量成正比。细胞周期不同阶段DNA含量不同,G1期DNA含量为2C,S期DNA含量介于2C-4C之间,G2/M期DNA含量为4C,通过检测荧光强度可分析细胞周期各阶段比例。-BrdU掺入法:BrdU能掺入到新合成的DNA中,用抗BrdU抗体结合,再用荧光素标记二抗,通过检测荧光标记细胞比例分析细胞周期,可区分处于S期细胞。4.样本制备中保证细胞活性措施:采用合适的缓冲液,维持pH和渗透压稳定;操作过程尽量在低温下进行,减少细胞代谢损伤;避免过度吹打、离心等机械损伤;及时处理样本,减少样本在体外停留时间;添加适当的细胞保护剂等。五、讨论题1.流式细胞术在肿瘤免疫治疗监测中,可通过检测免疫细胞亚群(如T细胞、B细胞、NK细胞等)的数量、比例和功能变化,评估机体免疫状态;监测肿瘤细胞表面抗原表达改变,了解肿瘤细胞异质性及对治疗的反应;检测免疫检查点分子表达,指导免疫治疗药物选择和疗效评估。意义在于实时掌握治疗过程中机体免疫反应和肿瘤细胞变化,为调整治疗方案提供依据,提高治疗效果和患者生存率。2.提高流式数据分析结果准确性和可靠性措施:确保样本制备规范,保证细胞状态良好且均匀分散;仪器定期校准和维护,保证检测信号准确;合理设置对照,包括阴性、阳性、同型对照等,准确识别和去除非特异性信号;熟练掌握数据分析软件操作,正确圈门和设门策略,根据实验目的和细胞特性选择合适分析方法;重复实验,减少实验误差和偶然因素影响;与其他实验方法结果相互验证,提高数据可信度。3.当流式细胞仪检测结果异常时,从以下方面排查解决:样本方面,检查样本制备过程是否规范,如细胞浓度、活性、有无团聚等;抗体方面,查看抗体质量、效价、孵育条件是否合适;仪器方面,检查仪器光路是否校准、液流系统是否正常、PMT电压等参数设置是否正确;环境方面,排查实验环境温度、湿度等是否符合要求;数据分析方面,审视圈门策略、补偿设置是否合理。逐步排查找出原因并解决问题。4.细胞治疗流式数据分析员需具备技能和素质:技能上,熟练掌握流式
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